ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΕΝΖΥΜΙΚΗΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑΣ ΑΠΑΚΕΤΥΛΑΣΗΣ ΤΗΣ ΧΙΤΙΝΗΣ

Abstract

Η ΠΑΡΟΥΣΑ ΔΙΔΑΚΤΟΡΙΚΗ ΔΙΑΤΡΙΒΗ ΣΚΟΠΟ ΕΙΧΕ ΤΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΕΝΖΥΜΙΚΗΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑΣ ΑΠΑΚΕΤΥΛΑΣΗΣ ΤΗΣ ΧΙΤΙΝΗΣ (EC3.5.1.41), ΣΥΝΕΧΙΖΟΝΤΑΣ ΤΗΝ ΠΡΟΣΠΑΘΕΙΑ ΓΙΑ ΤΟ ΣΧΕΔΙΑΣΜΟ ΜΙΑΣ ΕΝΖΥΜΑΤΙΚΗΣ ΠΡΟΣΕΓΓΙΣΗΣ ΓΙΑ ΤΗ ΜΕΤΑΤΡΟΠΗ ΤΗΣ ΧΙΤΙΝΗΣ ΣΕ ΧΙΤΟΖΑΝΗ. ΣΕ ΑΥΤΑ ΤΑ ΠΛΑΙΣΙΑ ΑΠΟΜΟΝΩΘΗΚΕ ΑΠΟ ΤΟ ΘΡΕΠΤΙΚΟ ΜΕΣΟ ΑΝΑΠΤΥΞΗΣ ΤΟΥ ΜΥΚΗΤΑ COLLETOTRICHUM LINDEMUTHIANUM ΜΙΑ ΝΕΑ ΑΠΑΚΕΤΥΛΑΣΗ ΤΗΣ ΧΙΤΙΝΗΣ. ΑΚΟΛΟΥΘΗΣΕ ΠΛΗΡΗΣ ΒΙΟΧΗΜΙΚΟΣ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΚΑΙ ΜΕΛΕΤΗ ΤΟΥ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΥ ΔΡΑΣΗΣ ΤΟΥΑΝΤΙΣΤΟΙΧΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΑΠΟ ΤΟ ΜΥΚΗΤΑ MUCOR ROUXIL, ΣΕ ΟΛΙΓΟΜΕΡΗ Ν - ΑΚΕΤΥΛΟΓΛΥΚΟΖΑΜΙΝΗΣ. Η ΜΕΛΕΤΗ ΕΓΙΝΕ ΜΕ ΧΡΗΣΗ ΕΝΟΣ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ ΔΥΟ ΕΞΩΓΛΥΚΟΣΙΔΑΣΩΝ, ΣΕ ΣΥΝΔΙΑΣΜΟ ΜΕ ΥΓΡΗ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑ ΥΨΗΛΗΣ ΠΙΕΣΗΣ, ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΜΕ ΦΑΣΜΑΤΟΣΚΟΠΙΑ ΜΑΖΑΣ(ESI - MS). ΤΕΛΟΣ, ΓΙΑ ΠΡΩΤΗ ΦΟΡΑ, ΑΠΟΜΟΝΩΘΗΚΕ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΗΚΕ ΤΟ ΓΟΝΙΔΙΟ ΜΙΑΣ ΧΙΤΑΣΗΣ ΑΠΟ ΕΝΑ ΨΥΧΡΟΦΙΛΟ ΜΙΚΡΟΟΡΓΑΝΙΣΜΟ, ΤΟ ΒΑΚΤΗΡΙΟ ARTHROBACTER SP.TAD20.

THE PRESENT DOCTORAL DISSERTATION FOCUSES ON THE STUDY OF CHITIN DEACETYLASE ACTIVITY, CONTINUING THE EFFORT TOWARDS THE DESIGN OF AN ENZYMATIC PROCESS FOR THE DEACETYLATION OF CHITIN. A NEW CHITIN DEACETYLASE WAS PURIFIED TO HOMOGENEITY FROM THE CULTURE FILTRARE OF THE FUNGUS COLLETOTRICHUM LINDEMUTHIANUM AND FURTHER CHARACTERIZED. THE MODE OF ACTION OF CHITIN DEACETYLASE FROM THE FUNGUS MUCOR ROUXII WAS STUDIED ON WATER SOLUBLE CHITIN OLIGOMERS. TWO DIFFERENTALTERNATIVE PROCEDURES WERE USED; MASS SPECTROSCOPY AND THE SEQUENCIAL ACTION OF TWO EXO-GLYCOSIDASES IN CONJUCTION HPLC. FUTHERMORE, THE GENE CODING FORTHE SYNTHESIS OF A CHITINASE WAS CLONED FROM THE PSYCHROPHILIC BACTERIUM ARTHROBACTER SPTAD20. INTERESTINGLY, IT IS THE FIRST CHITINASE GENE EVER CLONED FROM A PSYCHROPHILIC MICROORGANISM.