Συσχέτιση της ανοσοτροποποιητικής δράσης των πολυακόρεστων λιπαρών οξέων μακράς αλύσου με τον πολυμορφισμό -1082 A/G της ιντερλευκίνης 10 σε παιδιά με τροφική αλλεργία

Abstract

The present study Is the first in vitro study in children with food allergy and healthy controls that investigates the interaction of LCPUFA in lymphocyte cultures and their effect on the production of IL-10 which is the main cytokine produced by iTregs. In addition, this study investigates for the first time the association between IL-10 -1082A/G that lies in the promoter region of the IL-10 gene and the immunomodulatory effect of LCPUFA. The study group included 62 children aged 1-5 years with IgE- mediated food allergy. The control group included 92 children aged 1-7.5 years with negative personal and family history of atopy and negative specific IgE antibodies against the most common food antigens/ or skin prick tests. The study consists of two parts. In the first part of the study, DNA was isolated from all participants and the IL-10 -1082A/G was determined by Sanger sequencing. In the second part of the study, we carried out lymphocyte cultures and we investigated the immunomodulatory effect of LCPUFA on the number of Tregs as well as their function by determining the level of IL-10. In addition, we investigated whether the possible immunomodulatory effect of LCPUFA might be influenced by the genetic profile of the participants and more specifically the IL-10 -1082 A/G. The present study and the in vitro experiments confirmed the immunomodulatory effect of n-3 and n-6 LCPUFA regarding the number of Tregs, the level of IL-10 and the expression of IL-10R. Our study suggests that the immunomodulatory effect of LCPUFA seems to be influenced by the immunological profile of the individuals and the genetic variation.

H παρούσα μελέτη αποτελεί την πρώτη «in vitro μελέτη» σε παιδιά με τροφική αλλεργία και υγιείς μάρτυτες που διερεύνησε την άμεση επίδραση των πολυακόρεστων λιπαρών οξέων μακράς αλύσου (LCPUFA) σε καλλιέργειες λεμφοκυτάρων και στην παραγωγή της IL-­10, η οποία αποτελεί την κύρια κυτταροκίνη που παράγουν τα επαγώγιμα Τregs. Επιπρόσθετα, για πρώτη φορά μελετήθηκε η συσχέτιση της επίδρασης ενός γονιδιακού πολυμορφισμού της IL-­10, του ‐1082A/G, που βρίσκεται στην περιοχή του εκκινητή του γονιδίου της IL-­10, με την ανοσοτροποποιητική δράση των LCPUFA. Την ομάδα μελέτης αποτέλεσαν 62 παιδιά ηλικίας 1-5 ετών με επιβεβαιωμένη IgE- μεσολαβούμενη τροφική αλλεργία. Στην ομάδα ελέγχου συμμετείχαν 92 παιδιά ηλικίας 1-7.5 ετών με αρνητικό ιστορικό ατοπίας και αρνητικό εργαστηριακό έλεγχο για κοινά τροφικά αντιγόνα. Η μελέτη περιλαμβάνει δύο στάδια. Κατά το πρώτο στάδιο πραγματοποιήθηκε η απομόνωση του DNA και ο προσδιορισμός του γονιδιακού πολυμορφισμού -1082A/G της IL-10 με τη μέθοδο Sanger στην ομάδα μελέτης και τους υγιείς μάρτυρες. Κατά το δεύτερο στάδιο της μελέτης, πραμγατοποιήθηκαν καλλιέργειες λεμφοκυττάρων και μελετήθηκε η ανοσοτροποποιητική επίδραση των LCPUFA στον αριθμό των Τ ρυθμιστικών λεμφοκυττάρων, αλλά και τη λειτουργικότητά τους που εκτιμήθηκε με τον προσδιορισμό της παραγωγής της IL-10. Επιπλέον, διερευνήθηκε κατά πόσον η πιθανή ανοσοτροποιητική επίδραση των LCPUFA μπορεί να τροποποιείται σε άτομα που φέρουν το γονιδιακό πολυμορφισμό -1082 Α/G. Η παρούσα μελέτη και τα in vitro πειράματα που πραγματοποιήθηκαν επιβεβαιώνουν την ανοσοτροποποιητική δράση των ω-3 και ω-6 λιπαρών οξέων αναφορικά με τον αριθμό των T ρυθμιστικών λεμφοκυττάρων,το επίπεδο της IL-10 και την έκφραση του υποδοχέα της IL-10. Η ανοσορυθμιστική δράση των LCPUFA φαίνεται ότι εξαρτάται τόσο από το ανοσολογικό υπόβαθρο των ατόμων, όσο και τη γενετική ποικιλομορφία.