Μελέτη του ρόλου των μορίων αξίνης-2 (Axin-2) β-κατενίνης (β-catenin) και Ε-καδχερίνης (E-cadherin) στην κυτταρική προσκόλληση και στον παθογενετικό μηχανισμό της μετάστασης σε πρωτοπαθή καρκινώματα του παχέος εντέρου

Abstract

Introduction: Aberrant activation of the Wnt signaling pathway has been implicated as a key regulator of colorectal (CRC) tumorigenesis. β-catenin and AXIN-2 play an important role in the signaling output of the Wnt cascade and in the regulation of the stability of the Wnt signaling pathway. E-cadherin is the best-characterized molecular marker of epithelial-mesenchymal transition (EMT) and Slug has also been shown to repress E-cadherin transcription.Aim: To investigate E-cadherin, b-catenin, AXIN-2 and Slug expression in a series of 57 CRC patients and relate these findings with the patients’ clinicopathological features and prognosis.Material and Methods: Cancer tissue samples and adjacent normal tissue were obtained from 29 females and 28 males with a mean age of 67±10.4 years, with histologically confirmed CRC. Quantitative RT-PCR and immunohistochemistry analyses were performed to characterize the expression of the aforementioned markers. All statistical analysis was performed using SPSS. Results: β-catenin overexpression in the nucleus was associated with advanced N stage. Kaplan-Meier survival curves demonstrated that patients with β-catenin overexpression in the nucleus and with negative E-cadherin mRNA expression presented a significantly unfavorable overall survival time (OS). Multivariable COX regression analysis showed that β-catenin overexpression in the nucleus and E-cadherin mRNA expression is independent prognostic factor for OS. Statistical analysis showed a positive correlation between β-catenin and AXIN-2 mRNA and a significant inverse correlation between Slug mRNA and mRNA/protein expression of E-cadherin.Conclusions: Nuclear b-catenin is key factor in Wnt pathway and serves as valuable prognostic factor. Contrary to previous reports, we suggest that AXIN-2 acts as an oncogene. E-cadherin is associated with dedifferentiation and poor prognosis. A strong inverse correlation between Slug and E-cadherin was observed and this observation may reflect the co-effect of epigenetic alterations in E-cadherin regulation.

Εισαγωγή: Η ανώμαλη ενεργοποίηση της οδού Wnt έχει ενοχοποιηθεί στην ογκογένεση του κολοορθικού καρκίνου (CRC). Η β-κατενίνη και η αξίνη-2 έχουν ρόλο-κλειδί στην απόδοση του Wnt και στη ρύθμιση της σταθεροποίησης της οδού αντίστοιχα. Η Ε-καδχερίνη είναι μοριακός δείκτης της επιθήλιο-μεσεγχυματικής μετάπτωσης (ΕΜΜ) ενώ το Slug καταστέλλει τη μεταγραφή της Ε-καδχερίνης.Σκοπός: Η διερεύνηση της έκφρασης της Ε-καδχερίνης, β-κατενίνης, αξίνης-2 και του Slug σε 57 ασθενείς με CRC και η συσχέτιση των ευρημάτων με τα κλινικο-παθολογοανατομικά χαρακτηριστικά και την πρόγνωση αυτών.Υλικό και μέθοδος: Ελήφθησαν δείγματα από 29 γυναίκες και 28 άνδρες με μέση ηλικία 67+/-10.4 έτη, με ιστολογικά επιβεβαιωμένο CRC. Έγιναν αναλύσεις με ανοσοϊστοχημεία και ποσοτική RT-PCR για να χαρακτηριστεί η έκφραση των υπό μελέτη δεικτών. Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με το SPSS.Αποτελέσματα: Η υπερέκφραση της β-κατενίνης στον πυρήνα συσχετίστηκε με προχωρημένο στάδιο λεμφαδένων. Η καμπύλη επιβίωσης Kaplan-Meier έδειξε ότι οι ασθενείς με υπερέκφραση της β-κατενίνης στον πυρήνα παρουσίασαν σημαντικά μειωμένη συνολική διάρκεια επιβίωσης, όπως και οι ασθενείς με αρνητική έκφραση Ε-καδχερίνης mRNA και ότι οι ασθενείς με αρνητική έκφραση Ε-καδχερίνης στο mRNA και την πρωτεΐνη, παρουσίασαν σημαντικά και οριακά σημαντικά αντίστοιχα μειωμένη διάρκεια επιβίωσης ελεύθερης νόσου. Σε πολυπαραγοντική Cox ανάλυση φάνηκε ότι η έκφραση της β-κατενίνης και της Ε-καδχερίνης στον πυρήνα αποτελεί ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για τη συνολική επιβίωση. Υπήρξε θετική συσχέτιση μεταξύ της β-κατενίνης και του επιπέδου mRNA της αξίνης-2 και σημαντικά αρνητική συσχέτιση μεταξύ του Slug mRNA και της mRNA/πρωτεϊνικής έκφρασης της Ε-καδχερίνης.Συμπέρασμα: Η πυρηνική β-κατενίνη είναι παράγοντας-κλειδί στο μονοπάτι Wnt και δρα ως πολύτιμος προγνωστικός παράγοντας. Αντίθετα με προηγούμενες αναφορές πιστεύουμε ότι η αξίνη-2 δρα σαν ογκογονίδιο. Η Ε-καδχερίνη σχετίζεται με την αποδιαφοροποίηση και την πτωχή πρόγνωση. Δείξαμε μία ισχυρή αντίστροφη συσχέτιση ανάμεσα στο Slug και την Ε-καδχερίνη και αυτή η παρατήρηση ίσως αντανακλά τη συνδρομή επιγενετικών μεταβολών στη ρύθμιση της Ε-καδχερίνης.