Προσδιορισμός φαρμάκων σε πλάσμα αίματος με την τεχνική LC - MS

Abstract

The discipline of researching and evaluating new pharmaceuticalproducts is a critical field, given that is directly linked to public health.Especially concerning the field of pharmacokinetics, which demands thedevelopment and application of sound analytical methods. The presentdoctoral thesis focuses on the determination of drugs in blood plasma withLC-MS and is divided in three sections:The determination of fluconazole in plasma in the range of 0.05-10μg/mL with liquid-liquid extraction. Method development focused on lowsample volume, low runtime and partial automation of the method to enablethe analysis of large numbers of samples within the day, as required duringbioequivalence studies.The determination of domperidone and haloperidol in plasma withfocus on the achievement of extremely low limit of quantitation (0,1-50 ng/mL)and achieving the determination of both analytes with the same method,which assumes one method validation for two bioequivalence studies.The determination of metoclopramide in plasma, with focus on extremely lowlimit of quantitation (0,1-50 ng/mL) and the development of a method with verylow runtime to enable the bioanalytical part of a bioequivalence study to becompleted within three daysAll three methods were validated according to the guideline of theEuropean Medicines Association for the validation of bioanalytical methods

Η έρευνα για την παραγωγή και αξιολόγηση νέων φαρμάκων είναι έναιδιαίτερα κρίσιμο πεδίο, αφού επηρεάζει άμεσα τη δημόσια υγεία. Ιδιαίτερα τοπεδίο των φαρμακοκινητικών μελετών και των μελετών βιοϊσοδυναμίας,απαιτεί την ανάπτυξη και εφαρμογή αξιόπιστων αναλυτικών μεθόδωνπροσδιορισμού φαρμάκων σε βιολογικά υγρά. Η παρούσα διατριβήπραγματεύεται τον προσδιορισμό φαρμάκων σε πλάσμα μευγροχρωματογραφία-φασματομετρία μαζών παγίδας ιόντων και χωρίζεται σετρία τμήματα:Ο προσδιορισμός φλουκοναζόλης σε πλάσμα αίματος στην περιοχή0,05-10 μg/mL με υγρό-υγρό εκχύλιση. Δόθηκε ιδιαίτερη προσοχή στηνεπίτευξη χαμηλού όγκου δείγματος, χαμηλού χρόνου χρωματογραφίας και τημερική αυτοματοποίηση της μεθόδου, όπως και των δύο επόμενων, ώστε ναείναι δυνατή η ανάλυση μεγάλου αριθμού δειγμάτων ημερησίως, όπωςαπαιτούν οι κλινικές μελέτες.Η μέθοδος προσδιορισμού δομπεριδόνης και αλοπεριδόλης σε πλάσμααίματος αναπτύχθηκε με γνώμονα την ποσοτικοποίηση των αναλύτων σεεξαιρετικά χαμηλά επίπεδα (0,1-50 ng/mL) και την εξοικονόμησηχρόνου/πόρων προσδιορίζοντας ταυτόχρονα και με μία επικύρωση δύοαναλύτες.Τέλος, ο προσδιορισμός του μετοκλοπραμιδίου σε πλάσμα αίματοςέγινε με γνώμονα την ποσοτικοποίηση σε εξαιρετικά χαμηλά επίπεδα (0,1-50ng/mL) και τη ανάπτυξη μεθόδου με εξαιρετικά χαμηλό χρόνοχρωματογραφίας που θα επιτρέπει την ανάλυση μίας ολόκληρης κλινικήςμελέτης σε χρόνο τριών ημερών. Οι μέθοδοι επικυρώθηκαν με βάση τηνοδηγία του ευρωπαϊκού οργανισμού φαρμάκων για την επικύρωσηαναλυτικών μεθόδων.