Έκφραση και κλινική σημασία των Claudin77, PDL-1, PTEN, C-KIT, C-MET, CMYC, ALK, CK5/6, CK17, P53, EGFR, KI67 και P63 στον τριπλά αρνητικό καρκίνο του μαστού

Abstract

Triple Negative Breast Cancer (TNBC) represents 10-15% of the breast cancer subtypes andimmunohistochemically it is characterized by the lack of expression of estrogen receptor (ER),progesterone receptor (PR) and human epidermal growth factor receptor type 2 (HER2). It isresponsible for a disproportionate share of mortality owing to its aggressive clinical behavior,poor prognosis and lack of targeted therapies. Background/Aim: To explore the relationship between p53, p63, c-kit, Ki67, cMet, claudin7, CK5/6, CK17, AR, PTEN, EGFR, ALK, PDL-1 and c-MYC expression with clinicopathological features of triple- negative breast cancer and evaluate their prognostic value. Materials and Methods: Immunohistochemistry was performed in 84 triple-negative breast cancer samples versus the 14 antigens in 3μm thickness sections from the three paraffinembedded TMA cubes. Results: Univariate statistical analysis, with Fisher’s exact test showed a statistically significant relationship between claudin-7 and tumour grade (p=0.004) between claudin-7 and lymphovascular invasion, between protein p53 and positive lymph nodes (p=0.015) and also a statistically significant relationship between the markers ckit and ck5/6 (p-value=0.022), ckit and EGFR (p-value=0.055), AR and cmet (p-value=0.041), CK5/6 and EGFR (p-value=0.004), CK17 and Ki67 (p-value=0.041), Ki67 and cmet (p-value=0.002). Multivariate statistical analysis with logistic regression model with stepwise backward elimination of variables with a p-value=0.05 showed high expression of claudin7 (OR=65.8, 95%CI=4.35-995.19, p-value=0.003) and low expression of c-kit (OR=0.14, 95%CI=0.025-0.793, pvalue=0.026) and protein p63 (OR=0.18 95%CI=0.035-0.978, p-value=0.047) to be associated with higher tumor grade. Higher AR expression (OR=13.44, 95%CI=1.28-141.56, pvalue=0.031) and lower expression of CK5/6 CK5/6 cytokeratins was found in patients with positive lymphovascular invasion (LVI) (OR=0.072, 95%CI=0.007-0.732, p-value=0.026). Only the cell proliferation index (Ki67) has been proven to be statistically significant for disease-free survival (p-value=0.0378), and overall survival (p-value=0.0186). Conclusion: High expression of claudin-7 and low expression of c-kit and protein p63 are associated with higher tumor grade. AR and CK5/6 expression seem to be important in LVI.These findings suggest that these biomarkers may be useful as prognostic or predictive markersin TNBC.

Ο τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού (TNBC) αντιπροσωπεύει το 10-15% των καρκίνωντου μαστού και ορίζεται ανοσοΐστοχημικά από την έλλειψη έκφρασης των ER, PR και HER2.Χαρακτηρίζεται από υψηλότερη θνησιμότητα σε σχέση με τους άλλους υποτύπους λόγω τηςεπιθετικής κλινικής συμπεριφοράς του, της κακής πρόγνωσης του και της έλλειψης στοχευμένων θεραπειών. Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η αξιολόγηση προγνωστικών δεικτών για τους TNBCs -p53, p63, C-KIT, Ki67, cMet, claudin 7, CK 5/6, CK17, AR, PTEN, EGFR, ALK, PDL-1 και cMYC - σε σχέση με τον υψηλότερο βαθμό κακοήθειας, θετικούς λεμφαδένες, την λεμφαγγειακήδιήθηση (LVI), τοπική υποτροπή, μεταστάσεις, την ελεύθερη νόσου επιβίωση (DFS) καθώς και την συνολική επιβίωση (OS). Υλικό-Μέθοδοι: Διενεργήθηκε απλή ανοσοϊστοχημεία έναντι των 14 αντιγόνων σε 84 ασθενείς με τριπλά αρνητικό διηθητικό καρκίνωμα του μαστού. Επιλέγηκαν κατάλληλοι κύβοι παραφίνης για την δημιουργία ιστικών μικροσυστοιχιών (Tissue MicroArrays-TMA). Η ανοσοϊστοχημική διερεύνηση εφαρμόσθηκε σε τομές πάχους 3 μm, από τους τρεις ΤΜΑ κύβους παραφίνης. Αποτελέσματα: Μονοπαραγοντική ανάλυση με το Fisher’s exact test εδειξε στατιστικάσημαντική σχέση μεταξύ του βαθμού κακοήθειας του όγκου και της CLAUDIN 7 (pvalue=0.004), των θετικών λεμφαδένων και της πρωτεΐνης p53 (p-value=0.015), της λεμφαγγειακής διήθησης και της CLAUDIN 7 (p-value=0.032), καθώς και μεταξύ των μοριακών δεικτών ckit και των ck5/6 (p-value=0.022), ckit και EGFR (p-value=0.055), AR και cΜet (p-value=0.041), CK5/6 και EGFR (p-value=0.004), CK17 και Ki67 (p-value=0.041), Ki67 και cΜet (p-value=0.002). Η σημασία αυτής της συσχέτισης μεταξύ των δεικτών δεν έχει διερευνηθεί. Πολυπαραγοντική ανάλυση με logistic regression model with stepwise backward elimination of variables with a p-value=0.05 για τον βαθμό κακοήθειας έδειξε: Υψηλότερη έκφραση της cl7 ( OR=65.8, 95%CI=4.35-995.19, p-value=0.003), χαμηλότερη έκφραση της ckit (OR=0.14, 95%CI=0.025-0.793, p-value=0.026) αλλά και της πρωτεΐνης p63 (OR=0.18 95%CI=0.035-0.978, p-value=0.047) σχετίζονταν με υψηλότερο βαθμό κακοήθειας του όγκου. Παρατηρήθηκε υψηλότερη έκφραση του AR (OR=13.44, 95%CI=1.28-141.56, pvalue=0.031) και χαμηλότερη έκφραση των CK5/6 OR=0.072, 95%CI=0.007-0.732, (pvalue=0.026) σε ασθενείς με θετική LVI. Σύμφωνα με το Α-rank B, μόνο το Κi67 απεδείχθη στατιστικά σημαντικό για την OS (pvalue=0.0186) και για την DFS (p-alue=0.0378).Συμπέρασμα: Υψηλή έκφραση της claudin-7 και χαμηλή έκφραση της c-kit και της πρωτεΐνης p63 σχετίζονταν με υψηλότερο βαθμό κακοήθειας του όγκου. Υψηλότερη έκφραση του AR, και χαμηλότερη έκφραση των CK5/6 φαίνεται να σχετίζονται με θετικό LVI. Αυτά τα ευρήματα εισηγούνται ότι αυτοί οι μοριακοί δείκτες μπορεί να χρησιμοποιηθούν ως προγνωστικοί δείκτεςγια τους TNBCς.