Ο ρόλος της παθολογικής αγγειογένεσης του πλακούντα στην εκδήλωση ενδομήτριας καθυστέρησης της εμβρυακής ανάπτυξης σχετιζόμενης ή μη με προεκλαμψία: μελέτη της έκφρασης των γονιδίων Ang-1, Ang-2, και των υποδοχέων τους Tie-1 και Tie-2 καθώς και του γονιδίου PIGF και του υποδοχέα του sFlt-1 σε πλακούντες από παθολογικές κυήσεις

Abstract

Objective: Angiopoietin (Ang)-1 and Ang-2 are angiogenic growth factors that play crucial role in the later stages of placental angiogenesis. Animal and human studies have shown that Ang-1, Ang-2 and Tie-2 are expressed in placenta even from the first trimester. However, little is known about the role of angiopoietins in pregnancies with impaired placentation such as preeclampsia and fetal growth restriction. In addition, the majority of published studies examined the maternal serum levels of these factors in different trimesters. Our aim was to investigate theplacental expression of angiopoietin (Ang)-1, Ang-2 and their receptor, Tie-2, in preeclampsia (PE) with or without intrauterine growth restriction (IUGR). Methods:This is a case-control study of 128 singleton pregnancies. The study population comprised of placentas obtained from 28 women with PE, 30 women with PE and IUGR (PE-IUGR), 30 women with IUGR pregnancies and 40 women with normotensive singleton pregnancies. Placental samples were collected at delivery from all the sub- groups.The expression status of the genes was evaluated by quantitative real-time PCR.Results: In both PE and PE-IUGR groups, compared to the control group, there was significantly higher expression of Ang-2 (p < 0.001) and Tie-2 (p=0.008) and lower expression of Ang-1 (p=0.001). The magnitude of the differences was similar for Ang-1 for both groups, whereas the magnitude of the differences was higher for Ang-2 and Tie-2 in PE-IUGR group compared to controls. Ang-2 and Tie-2 were correlated in both PE (r=0.8602, p< 0.001) and PE-IUGR (r=0.6342, p< 0.001) groups. In PE-IUGR group, Ang-1 was associated to Ang-2 (r=0.3458, p=0.0452) and Tie-2 (r=0.4448, p=0.0084). Log10 Ang-1 but not Ang-2 was gestational age dependent (R2=0.40, p < 0.001). After conversion in Multiples of the Median (MoM) log10MoM Ang-1 was reduced in the PE group (mean= -0.8181, p< 0.001) and the PE-IUGR group (mean= - 1.2583, p< 0.001) compared to control group (mean= - 0.0924). In IUGR pregnancies, the placenta expression levels of Ang-2 and Tie-2 were significantly higher compared to the control group (p<0.001 καιp=0.002 respectively). Instead, the Ang-1 expression level was lower in pathological pregnancies (p=0.001). A significant correlation between Ang-1 and Tie-2 was observed in placentae from IUGR pregnancies whereas such an association did not exist in normal pregnancies. Conclusion: We have demonstrated increased placental expression of Ang-2 and Tie-2 along with lower expression levels of Ang-1 in pregnancies with PE, IUGR and PE-IUGR. Our findings show that the angiopoietin axis seems to be disrupted in such pregnancies. Whether the results of this study represent the angiogenic imbalance observed in PE and IUGR pregnancies or they are part of the pathophysiology of these conditions has to be further investigated. Additionally, evidence provided from this study may serve as a stimulus for larger studies that will investigate the prognostic role of Ang-1 and Ang-2 in distinct forms of PE.

Σκοπός: Σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η εξέταση της πλακουντιακής έκφρασης των αγγειοποιητινών (Ang)-1, Ang-2 και του υποδοχέα τους Tie-2, σε κυήσεις με προεκλαμψία (PE) με ή χωρίς συνυπάρχουσα ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης (IUGR). Υλικό & Μέθοδος:Case-control μελέτη που βασίζεται στη συλλογή πλακουντιακού ιστού από 28 κυήσεις στην ομάδα PE, 30 κυήσεις στην ομάδα PE-IUGR, 30 κυήσεις στην ομάδα IUGR και 40 κυήσεις στην ομάδα ελέγχου. Η έκφραση των παραγόντων αυτών αξιολογήθηκε με τη μέθοδο quantitative real-time PCR.Αποτελέσματα:Στις ομάδες κυήσεων με PE και PE-IUGR παρατηρήθηκε σημαντικά υψηλότερη έκφραση της Ang-2 (p< 0.001) και του υποδοχέα Tie-2 (p=0.008) και χαμηλότερη έκφραση της Ang-1 (p=0.001) συγκριτικά με την ομάδα ελέγχου. Η μεταβολή αυτή που καταγράφηκε στην έκφραση της Ang-1 ήταν το ίδιο σημαντική και στις δύο ομάδες ενώ ήταν πολύ πιο έντονη για την Ang-2 και τον υποδοχέα Tie-2 στην ομάδα PE-IUGR σε σχέση με τις φυσιολογικές κυήσεις. Συσχέτιση μεταξύ των μορίων Ang-2 και Tie-2 παρατηρήθηκε στην ομάδα PE (r=0.8602, p< 0.001) και στην ομάδα PE-IUGR (r=0.6342, p< 0.001). Επιπλέον, στην ομάδα PE-IUGR, η Ang-1 βρέθηκε να συσχετίζεται με τηνAng-2 (r=0.3458, p=0.0452) και τον υποδοχέαTie-2 (r=0.4448, p=0.0084). Η log10Ang-1 αλλά όχι η Ang-2 φάνηκε ότι εξαρτάται από την ηλικία κύησης (R2=0.40, p< 0.001). Μετά από μετατροπή σε Multiples of the Median (MoM) η παράμετρος log10MoMAng-1 παρατηρήθηκε να είναι μειωμένη στην ομάδα κυήσεων με προεκλαμψία (mean= -0.8181, p< 0.001) καθώς και στην ομάδα κυήσεων με προεκλαμψία και ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης (mean= - 1.2583, p< 0.001) σε σχέση με την ομάδα ελέγχου (mean= - 0.0924). Στις κυήσεις με ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης, τα επίπεδα έκφρασης των Αng-2 και Tie-2 είναι σημαντικά υψηλότερα σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (p<0.001 και p=0.002 αντίστοιχα). Τα επίπεδα έκφρασης της Ang-1 είναι χαμηλότερα στις παθολογικές κυήσεις (p=0.001). Επιπλέον, παρατηρήθηκε σημαντική συσχέτιση μεταξύ του παράγοντα Αng-1 και του υποδοχέα Tie-2 σε πλακούντες με ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης αλλά όχι σε πλακούντες από ανεπίπλεκτες κυήσεις. Συμπεράσματα: Η ανάλυση των αποτελεσμάτων της μελέτης αυτής έδειξε ότι η πλακουντιακή έκφραση της Ang-2 και του υποδοχέα Tie-2 είναι αυξημένη ενώ τα επίπεδα έκφρασης της Ang-1 είναι μειωμένα στις κυήσεις με προεκλαμψία ως μεμονωμένη νόσο ή σε συνδυασμό με περιορισμό της εμβρυικής ανάπτυξης. Επίσης, τα ευρήματα της μελέτης αυτής καταδεικνύουν ανάλογες μεταβολές στην πλακουντιακή έκφραση των αγγειοποιητινών Ang-1 &Ang-2 και του υποδοχέα τους Tie-2 σε κυήσεις με ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης.Τα ευρήματα αυτά δείχνουν ότι ο άξονας των αγγειοποιητινών φαίνεται να διαταράσσεται στις γυναίκες με προεκλαμψία ή/και ενδομήτρια καθυστέρηση της ανάπτυξης. Το ερώτημα αν οι μεταβολές αυτές στην έκφραση των αγγειοποιητινών εκδηλώνονται στα πλαίσια της αγγειακής διαταραχής που παρατηρείται στις κυήσεις με τις δύο αυτές επιπλοκές της κύησης ή αποτελούν μέρος της παθοφυσιολογίας τους αναμένεται να απαντηθεί.