Μοριακή και ανοστοϊστοχημική διερεύνηση της μικροδορυφορικής αστάθειας (MSI) σε καρκινώματα παχέος εντέρου

Abstract

Background/Aim: In the present retrospective study, we assessed the molecular profile and clinicopathological correlations of Greek colorectal carcinoma (CRC) patients. Patients and Methods: Data from 157 CRC patients were collected. High Resolution Melting Analysis and Pyrosequencing/Sanger sequencing were applied to identify KRAS, BRAF, NRAS mutations and Microsatellite instability (MSI) status. Immunohistochemistry was used to characterize the associated Mismatch Repair Protein loss. Statistical calculations were performed using the statistical package SPSS v21.0. Results: KRAS mutations were detected in 39.3% of cases, BRAF in 10.9% and NRAS in 4.9%. MSI status was recognized in 11.5% of CRC patients and was associated with right colon tumors. MSI phenotype was inversely correlated with stage, N status and KRAS mutations and positively correlated with BRAF mutations. Conclusion: MSI positive CRCs in the Greek population are more often right-sided, free of metastasis, KRAS wild type and BRAF mutated. Providing more detailed clinicopathological and molecular data for specific populations enables better clinical management and individualized therapy in the future.

Εισαγωγή: Στην εποχή μας η ιατρική επιστήμη έχει αρχίσει να υιοθετεί την εξατομικευμένη ιατρική θεραπεία σε διάφορες παθήσεις. Καθοριστικής σημασίας στην πρόγνωση και στη θεραπεία του καρκίνου αποτελεί το μοριακό προφίλ του όγκου. Στην παρούσα αναδρομική μελέτη μελετήσαμε τα μοριακά χαρακτηριστικά και τις κλινικοπαθολογοανατομικές συσχετίσεις του ΚΠΕ σε Έλληνες ασθενείς.Υλικά και Μέθοδοι/ Ασθενείς και ΜέθοδοιΣυλλέξαμε πληροφορίες και παθολογοανατομικά δεδομένα από 157 ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου. Mετά από απομόνωση του DNA από τους κύβους παραφίνης των ασθενών, ακολούθησε PCR πραγματικού χρόνου και High Resolution Melting Analysis (HRM) για την ανίχνευση μεταλλαγών στα γονίδια KRAS, BRAF, NRAS και στους υπό διερεύνηση δείκτες μικροδορυφορικής αστάθειας (ΒΑΤ26, ΒΑΤ25, ΝR24, NR21). Οι στατιστικές συσχετίσεις πραγματοποιήθηκαν με το πακέτο SPSSv 21.0. Αποτελέσματα: Μεταλλάξεις του KRAS ανιχνεύτηκαν στο 39,3% των περιπτώσεων, του BRAF στο 10,9% και του NRAS στο 4,9%. Μικροδορυφορική αστάθεια παρατηρήθηκε στο 11,5% των ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου και συσχετίστηκε με καρκινώματα του δεξιού παχέος εντέρου. Ο MSI φαινότυπος είχε αρνητική συσχέτιση με το στάδιο, την παρουσία μεταστάσεων σε λεμφαδένες καθώς και τις μεταλλάξεις του KRAS, ενώ είχε θετική συσχέτιση με μεταλλάξεις του BRAF. Συμπέρασμα: MSI θετικά καρκινώματα του παχέος εντέρου στον ελληνικό πληθυσμό είναι συχνότερα στο δεξιό παχύ έντερο, KRAS μη μεταλλαγμένα και BRAF μεταλλαγμένα. Η συλλογή περαιτέρω κλινικοπαθολογοανατομικών και μοριακών δεδομένων για κάθε πληθυσμό θα επιτρέψει στο μέλλον την καλύτερη κλινική προσέγγιση των ασθενών καθώς και την στοχευμένη θεραπεία αυτών.