Ο ρόλος του υποδοχέα ανιχνευτή ασβεστίου στην εμφάνιση της πρώιμης υπασβεσταιμίας στα νεογνά των μητέρων με σακχαρώδη διαβήτη κύησης.

Abstract

Introduction: Infants born from mothers with Gestational diabetes mellitus (GDM) experience several complications, including a higher rate of postnatal hypocalcemia. In this study, we investigated the association between Calcium Sensing Receptor (CaSR) and neonatal hypocalcemia observed in GDM pregnancies.Methods: Our study consisted of 58 pregnant women with GDM and 40 healthy women and their neonates. CaSR placental expression was evaluated with immunohistochemistry and Western Blot. Three CaSR single nucleotide polymorphisms, A986S, R990G, Q1011E, were evaluated in neonate’s genomic DNA. Serum Calcium (Ca), P, Mg, 25(OH)D and PTH were measured in cord blood and at 2nd day of life.Results: GDM neonates had lower mean cord blood Ca levels than controls (9,87±0,86 mg/dl vs 10,39±0,53 mg/dl, p=0,001) while 15,5% developed postnatal hypocalcemia. CaSR expression was lower in GDM than in healthy placentas (p<0,001). In the GDM group, reduced CaSR immunostaining was associated with lower Ca cord blood levels, in syncytiotrophoblasts (p=0,042) and extravillous cytotrophoblasts (p=0,002). Moreover, the absence of the S allele of the A986S polymorphism was associated with lower serum Ca levels both at birth (AA: 9,64±0,2 mg/dl, AS+SS: 10,31±0,47 mg/dl, p=0,002) and at 2nd day of life (AA: 8,22±0,9 mg/dl, AS+SS: 8,82±0,71 mg/dl, p=0,019).Conclusions: Our results showed that CaSR is under-expressed in GDM compared with healthy placentas and this alteration may be associated with the lower Ca levels measured in cord blood of GDM infants. Placental CaSR seems to exert a local effect in fetal Ca homeostasis, which is dissociated from its contribution to the regulation of Ca homeostasis in postnatal life.

Τα νεογνά των διαβητικών μητέρων εμφανίζουν αυξημένη συχνότητα εμφάνισης υπασβεστιαιμίας μετά τη γέννηση. Στην παρούσα εργασία, μελετήσαμε την πιθανή συμβολή του υποδοχέα ανιχνευτή ασβεστίου-Calcium Sensing Receptor (CaSR), στην πρώιμη υπασβεστιαιμία των νεογνών των διαβητικών μητέρων.Μέθοδολογία: Συλλέξαμε δείγματα πλακούντα και αίματος ομφαλίου λώρου από 58 ζεύγη μητέρων-νεογνών με σακχαρώδη διαβήτη κύησης και 40 αντίστοιχα ζεύγη μαρτύρων, καθώς και αίμα για τη μέτρηση βιοχημικών παραμέτρων κατά το 2ο 24ωρο ζωής των νεογνών. Μελετήσαμε την έκφραση της πρωτεΐνης του CaSR στον πλακούντα μέσω ανοσοïστοχημείας και Western Blot ανάλυσης και παράλληλα, αναλύσαμε την παρουσία 3 πολυμορφισμών του CaSR, A986S, R990G, Q1011E στο γενωμικό υλικό των νεογνών. Τέλος μετρήσαμε τα επίπεδα βιοχημικών παραμέτρων (ασβέστιο, μαγνήσιο, φώσφορο, 25(OH)D, παραθορμόνη) στο αίμα του ομφαλίου λώρου και στο περιφερικό αίμα των νεογνών στο 2ο 24ωρο ζωής.Αποτελέσματα: Τα νεογνά των διαβητικών μητέρων εμφάνισαν χαμηλότερα επίπεδα ασβεστίου τόσο στον ομφάλιο λώρο (9,87±0,86 mg/dl έναντι 10,39±0,53, p=0,001) όσο και στο 2ο 24ωρο ζωής (8,45±0,90 mg/dl και 9,78±0,63 mg/dl, p<0,001), ενώ το 15,5% του πληθυσμού παρουσίασε πρώιμη υπασβεστιαιμία (ασβέστιο ≤7,5 mg/dl). Παράλληλα, η έκφραση του CaSR ήταν σημαντικά χαμηλότερη στους πλακούντες των μητέρων που έπασχαν από σακχαρώδη διαβήτη κύησης συγκριτικά με τις υγιείς μητέρες (p<0,001). Στην ομάδα των διαβητικών μητέρων, χαμηλότερη έκφραση του CaSR συσχετιζόταν με χαμηλότερα επίπεδα ασβεστίου στον ομφάλιο λώρο, τόσο στην συγκυτιοτροφοβλάστη (p=0,042) όσο και στους εξωλαχνωτούς κυτταροτροφοβλάστες (p=0,002). Επιπρόσθετα, η απουσία του S αλληλίου του A986S πολυμορφισμού, συσχετιζόταν με χαμηλότερα επίπεδα ασβεστίου τόσο στη γέννηση (AA: 9,64±0,92 mg/dl, AS+SS: 10,31±0,47 mg/dl, p=0,002) όσο και στο 2ο 24ωρο ζωής (AA: 8,22±0,9 mg/dl, AS+SS: 8,82±0,71 mg/dl, p=0,019) . Δεν βρέθηκε συσχέτιση μεταξύ του πολυμορφισμού A986S και των επιπέδων έκφρασης του CaSR στον πλακούντα.Συμπεράσματα: Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι 1) η έκφραση του CaSR στον πλακούντα είναι μειωμένη στις κυήσεις που επιπλέκονται από σακχαρώδη διαβήτη 2) η μειωμένη έκφραση CaSR στον πλακούντα διαβητικών μητέρων σχετίζεται με χαμηλότερα επίπεδα ασβεστίου στον ομφάλιο λώρο των νεογνών των διαβητικών μητέρων και 3) ο ρόλος του υποδοχέα στη ρύθμιση της πλακουντικής ομοιόστασης του ασβεστίου είναι ξεχωριστός από τον ρόλο που έχει ο υποδοχέας στον ανθρώπινο οργανισμό μετά τη γέννηση.