Έκφραση του P53 και P63 στα νεοπλάσματα της ουροδόχου κύστης και συσχετισμός με άλλους προγνωστικούς παράγοντες

Abstract

The motive to perform this study was to assess the expression of p53 and p63 in bladder neoplasia of patients undergoing radical cystectomy (because of invasive bladder cancer and T1G3 tumours resistant to BCG treatment) and to correlate the expression with prognostic factors such the stage of disease, the grade of the disease and the survival and the significance of these in the prognosis of patients.We studied 100 cases of patients who underwent radical cystectomy in 2nd Urological Department,University of Athens at Sismanoglio Hospital due to invasive carcinoma of the bladder and superficial carcinoma (T1G3) resistant to intravesical BCG therapy. Pieces from paraffin blocks from the histological preparation of cystectomy stained in Pathology120Department of the upper Hospital, by immunohistochemical method using anti p53 monoclonal antibody DO-7 (Biocare Medical, Concord, CA, USA) To study the expression of the protein p53, and the anti p63 monoclonal antibody BC4A4 (Biocare Medical Concord, CA, USA) to study the expression of the protein p63. The measurement of the expression of proteins p53 and p63 was semiquantitative method in categories from 0 to 3 depending on the response. The above results and the ratio of the expression of a protein relative to the other associated with other prognostic factors such as the final stage of the disease, the degree of malignancy of the tumor, the existence or not lymphatic infiltration in histological preparation of radical cystectomy and the existence infiltrated the pelvic lymph nodes. The patient follow-up was at least three years after radical cystectomy and became either a telephone interview or examination in the outpatient clinic. The prognostic significance of the change of expression of these proteins and their correlation will be studied by calculating the contribution to relapse free survival and overall survival in patients. The statistical analysis of the results was performed with the statistical program SPSS 19.00. The analysis of the study showed that it presented significant relationship of p53 and p63 with prognostic factors mentioned above. A multivariate analysis of the variables used did not result in a statistically significant result and forth and detailed tables for each category comparison of these results.The expression of p54 and p63 biomarkers studied (individually and / or in combination) in patients who underwent radical cystectomy due to invasive bladder CA and T1G3 resistant BCG therapy found to have no statistically significant prognostic value. Although, it was found a statistically significant difference with the stage of disease and the expression of p53.

Ο σκοπός της μελέτης ήταν να προσδιοριστεί η έκφραση του p53 και του p63 στα νεοπλάσματά της ουροδόχου κύστης από ασθενείς που υποβλήθηκαν σε ριζική κυστεκτομή (λόγω διηθητικού CA ουροδόχου κύστεως και σε T1G3 ανθεκτικό σε BCG θεραπεία) και να συσχετιστεί η έκφραση τους με προγνωστικούς παράγοντες όπως το στάδιο της νόσου, ο βαθμός διαφοροποίησης της νόσου και η επιβίωση και την σημασία αυτών στην πρόγνωση των ασθενών.Μελετήθηκαν 100 περιπτώσεις ασθενών που υποβλήθηκαν σε ριζική κυστεκτομή στην Β΄ Ουρολογική Kλινική του Πανεπιστημίου Αθηνών στο Σισμανόγλειο Νοσοκομείο λόγω διηθητικού καρκινώματος της ουροδόχου κύστεως καθώς και επιφανειακού καρκινώματος (Τ1G3) ανθεκτικού σε ενδοκυστική BCG θεραπεία. Τεμάχια από μπλόκ παραφίνης από το ιστολογικό παρασκεύασμα της κυστεκτομής χρώσθηκαν στο Παθολογοανατομικό Εργαστήριο του ανωτέρου Νοσοκομείου, με ανοσοϊστοχημική μέθοδο χρησιμοποιώντας το αντι p53 μονοκλωνικό αντίσωμα DO-7 (Biocare Medical, Concord, CA, USA) για την μελέτη της έκφρασης της πρωτεΐνης p53, και το αντι p63 μονοκλωνικό αντίσωμα BC4A4 (Biocare Medical Concord, CA, USA) για την μελέτη της έκφρασης της πρωτεΐνης p63. Η μέτρηση της έκφρασης των πρωτεινών p53 και p63 έγινε με ημιποσοτική μέθοδο σε κατηγορίες απο 0 έως 3 ανάλογα με την ανταπόκριση. Τα ανωτέρω αποτελέσματα καθώς και ο λόγος της έκφρασης της μιας πρωτεΐνης σε σχέση με την άλλη συσχετίστηκαν με άλλους προγνωστικούς παράγοντες όπως το τελικό στάδιο της νόσου, τον βαθμό κακοήθειας του όγκου, την ύπαρξη ή όχι λεμφαγγειακής διήθησης στο ιστολογικό παρασκεύασμα της ριζικής118κυστεκτομής και την ύπαρξη διηθημένων πυελικών λεμφαδένων. Η παρακολούθηση των ασθενών ήταν τουλάχιστον έως τρία χρόνια μετά την ριζική κυστεκτομή και έγινε είτε με τηλεφωνική συνέντευξη είτε με εξέταση στα εξωτερικά ιατρεία. Η προγνωστική σημασία της αλλαγής έκφρασης των ανωτέρω πρωτεϊνών και της μεταξύ τους συσχέτισης θα μελετηθεί υπολογίζοντας την συμβολή τους στην ελεύθερη υποτροπής επιβίωση καθώς και στην ολική επιβίωση των ασθενών. Η στατιστική ανάλυση των αποτελεσμάτων πραγματοποιήθηκε με το στατιστικό πρόγραμμα SPSS 19.00. Η ανάλυση της μελέτης κατέδειξε ότι δε παρουσιάζεται στατιστικά σημαντική σχέση του p53 και του p63 με τους προγνωστικούς παράγοντες που προαναφέρθηκαν. Η πολυπαραγοντική ανάλυση των μεταβλητών που χρησιμοποιήθηκαν δεν κατέληξε σε κάποιο στατιστικά σημαντικό αποτέλεσμα ενώ παρατέθηκαν και οι αναλυτικοί πίνακες για κάθε κατηγορία σύγκρισης των παραπάνω αποτελεσμάτων.Η έκφραση των βιοδεικτών p54 και p63 που μελετήθηκαν (μεμονωμένα ή/και σε συνδυασμό) σε ασθενείς που υποβλήθηκαν σε ριζική κυστεκτομή λόγω διηθητικού CA ουροδόχου κύστεως και σε T1G3 ανθεκτικό σε BCG θεραπεία, δεν διαπιστώθηκε να παρέχoυν καμία στατιστικά σημαντική προγνωστική αξία στην εκτίμηση των ασθενών αυτών. Διαπιστώθηκε όμως στατιστικά σημαντική διαφορά με το στάδιο της νόσου και την έκφραση του p53