Μελέτη της σχέσης δομής και λειτουργίας της απολιποπρωτεΐνης Ε στον εγκέφαλο
Περίληψη
Η απολιποπρωτεῒνη Ε (αποΕ) παίζει σημαντικό ρολό στη μεταφορά λιπιδίων στην κυκλοφορία του αίματος και τον εγκέφαλο. Η ισομορφή αποΕ4 είναι ο σημαντικότερος δείκτης κίνδυνου της νόσου του Alzheimer (AD). Η αποΕ4 είναι επιρρεπής σε πρωτεόλυση και θραύσματα της έχουν εντοπιστεί σε εγκέφαλους ασθενών με AD. Τα θραύσματα της αποΕ4 έχει προταθεί ότι εμπλέκονται στην παθογένεση της AD, αλλά ο μηχανισμός δράσης τους δεν έχει διευκρινιστεί. Στην παρούσα διατριβή μελετήσαμε το ρόλο των θραυσμάτων της αποΕ4 αποΕ4[Δ(186- 299)] και αποΕ4[Δ( 166-299)] στην ομοιόσταση του αμυλοειδούς πεπτιδίου β (Αβ) και τη φλεγμονή στην κυτταρική σειρά νευροβλαστώματος άνθρωπου SK-N-SH. Ανάλυση με Elisa και συνεστιακή μικροσκοπία φθορισμού έδειξε ότι η ελεύθερη λιπιδίων αποΕ4[Δ(166-299)] μειώνει τα εξωκυτταρικά επίπεδα των Αβ40 και Αβ42, προάγοντας την πρόσληψη τους από τα κύτταρα SK-N-SH. Αντίθετα, το μεγαλύτερο θραύσμ
υ της IL-1β στα κύτταρα. Τα αποτελέσματά μας συνολικά υποδεικνύουν άτι συγκεκριμένα πρωτεολυτικά θραύσματα της αποΕ4 μπορεί να προάγουν τη συσσώρευση του Αβ42 ή τη φλεγμονή στους νευρώνες δύο γεγονότα που έχουν συσχετιστεί με την παθογένεση της AD.
περισσότερα
Περίληψη σε άλλη γλώσσα
Apolipoprotein Ε (apoE) plays a crucial role in lipid transport in circulation and the brain. The apoE4 isoform is a major risk factor for Alzheimer s disease (AD) ApoE4 is susceptible to proteolysis and apoE4 fragments have been found in brains of AD patients. These apoE4 fragments have been hypothesized to be involved in the pathogenesis of AD although the mechanism is not clear. In this thesis we studied the effect of apoE4 fragments apoE4[A(186-299)] and apoΕ4[Δ(166-299)] on amyloid peptide β (Aβ) homeostasis and inflammation in human neuroblastoma SK-N-SH cells. Elisa and fluorescence confocal laser scanning microscopy analysis showed that lipid-free apoE4[A(166-299)] reduces the extracellular levels of Aβ40 and Aβ42 by promoting the uptake of Aβ by SK-N-SH cells. A longer length fragment, apoE4[A(186-299)] or full-length apoE4 failed to elicit this effect. ΑροΕ4[Δ(166-299)] effected a 20% reduction of cellular sphingomyelin levels, as well as changes in cellular membrane micro-fl ...