Συγκολλητικότητα των αιμοπεταλίων ex vivo και παράγοντας von Willebrand σε ασθενείς με σακχαρώδη διαβήτη τύπου Ι

Abstract

Object of this study was the investigation of the effect of type I diabetes mellitus on the platelet count and platelet functionality, as well as, on the levels of von Willebrand (vWF) and VIII: C factors. Ninety four children with diabetes (47 males and 47 females) and 52 (21 males and 31 females) healthy children aged 2-24 years were studied following parental consent. The children with diabetes were followed in the Pediatric Department’s Diabetes Centre, Faculty of Nursing, University of Athens. The healthy children were selected as controls from children admitted to the “P & A Kyriakou” Children’s Hospital for clinical - laboratory tests and minor surgery. The laboratory tests were carried out at the Laboratory of Hygiene and Epidemiology of the University of Athens Medical School and the Hematology Department of the “P & A Kyriakou” Children’s Hospital in Athens. Platelet aggregation was measured with an aggregometer PAP – 4 model 430, Biodata Co, using a turbidometric technique, according to the method of Born and O’Brien, by the addition of three agonists (ADP, collagen, ristocetine). Platelet count and size were determined with the Coulter STKS hematologic analyzer. The plasma antigenic activity of vWF was measured by Laurell electroimmunodifusion. The vWF ristocetine cofactor was measured after the platelets were washed and fixed. The concentration of VIII: C factor was measured with the method of APTT in real time. The tests (fibrinogen, glycosylated Hb) were carried out with routine laboratory techniques. Analysis of data was performed using the SPSS statistical - analysis package. The outcome (or dependent variable) was: a) the platelet count, b) the platelet aggregation ex vivo after adding three different agonists (ADP, collagen, ristocetine), c) the vWF και VIII: C factors. As predictor (or independent) variable was the existence or none of type I diabetes mellitus. The confounders which were controlled in data analysis were: a) the age, b) the gender, c) the system of ABO blood group, d) the height, e) the weight, f) the glycosylated Hb και g) the duration of diabetes. The following results were obtained: 1) A smaller number of platelets in children with diabetes (x±SE = 240.000 ± 6.000/mm3) was observed as compared with the healthy ones (x±SE = 288.000 ± 10.000/mm3) 2) No statistically significant difference was found in the functionality of the platelets (in vitro aggregability to ADP, collagen and ristocetine) between children with diabetes and healthy individuals 3) No differences were observed in the distribution of children with diabetes and healthy children among the four groups of the ABO system 4) Greater antigenic activity of the vWF was observed in children with diabetes (95% CI of β = 19,3 - 45) as compared to healthy children. The same positive relation was observed regarding the vWF Rcof (95% CI of β = 28,2 - 57,9) 5) Higher levels of the factor VIII: C were found in children with diabetes (95% CI of β = 5,34 - 43,5) as compared to healthy children 6) The level of glycosylated Hb in children with diabetes depends positively on the duration of the disease and gender.

Μελετήθηκε η επίδραση του ινσουλινοεξαρτώμενου σακχαρώδη διαβήτη (ΙΕΣΔ) στον αριθμό και τη λειτουργικότητα των αιμοπεταλίων ex vivo, στα επίπεδα του vW (αντιγόνου και συμπαράγοντα ριστοσετίνης), του παράγοντα VΙΙΙ: C και της γλυκοζιωμένης αιμοσφαιρίνης. Στην εργασία συμμετείχαν, μετά από έγγραφη συναίνεση των γονέων τους, 94 διαβητικά παιδιά (47 αγόρια και 47 κορίτσια) και 52 υγιή παιδιά (21 αγόρια και 31 κορίτσια), ηλικίας 2-24 ετών. Τα διαβητικά παιδιά παρακολουθούνταν από το Διαβητολογικό Κέντρο του ΠΓΝΑ «Π&Α ΚΥΡΙΑΚΟΥ». Οι εργαστηριακές δοκιμασίες γινόντουσαν στα ερευνητικά εργαστήρια της Υγιεινής και Επιδημιολογίας του Πανεπιστημίου Αθηνών και του Αιματολογικού Εργαστηρίου του ΠΓΝΑ «Π&Α ΚΥΡΙΑΚΟΥ». Για τη μελέτη της συγκολλητικότητας των αιμοπεταλίων ex vivo, κατόπιν προσθήκης τριών αγωνιστών (ADP, κολλαγόνο, ριστοσετίνη) χρησιμοποιήθηκε το συγκολλητινόμετρο (αγγρεγκόμετρο) ΡΑΡ - 4 model 430 της BioData. Για την αρίθμηση των αιμοπεταλίων χρησιμοποιήθηκε ο αιματολογικός αναλυτής Coulter STKS. Η ανάλυση των δεδομένων έγινε σε ηλεκτρονικό υπολογιστή με το στατιστικό πακέτο SPSS. Εφαρμόστηκε το υπόδειγμα της απλής και πολλαπλής γραμμικής παλινδρόμησης και εξουδετερώθηκαν οκτώ συγχυτικοί παράγοντες (ηλικία, φύλο, ομάδα αίματος ΑΒΟ, ινωδογόνο, ανάστημα, σωματικό βάρος, γλυκοζιωμένη αιμοσφαιρίνη, χρονικό διάστημα από την εμφάνιση του σακχαρώδη διαβήτη). Τα αποτελέσματα συνοψίζονται ως κάτωθι: 1. Διαπιστώθηκε μικρότερος αριθμός αιμοπεταλίων στα διαβητικά παιδιά (x±SE = 240.000 ± 6.000/mm3) σε σχέση με τα υγιή (x±SE = 288.000 ± 10.000/mm3). 2. Αντίθετα δεν διαπιστώθηκε, στατιστικά σημαντική, μεταβολή της λειτουργικότητας των αιμοπεταλίων στα διαβητικά παιδιά, όπως αυτή μελετάται in vitro με τη συγκολλητικότητα των αιμοπεταλίων κατόπιν προσθήκης τριών αγωνιστών: ADP (95% ΔΕ του β = -8,8 έως +3,2), κολλαγόνο (95% ΔΕ του β = - 2,18 έως +4,49), ριστοσετίνη (95% ΔΕ του β = - 44,85 έως +7,86). 3. Δεν παρατηρήθηκε επίσης διαφορά στην κατανομή των διαβητικών και υγιών παιδιών στις τέσσερις ομάδες αίματος του συστήματος ΑΒΟ. 4. Διαπιστώθηκαν μεγαλύτερες συγκεντρώσεις του αντιγόνου του παράγοντα vW στα διαβητικά (95% ΔΕ του β = 19,3 έως 45) σε σχέση με τα υγιή παιδιά και υψηλότερες τιμές του vWRCoF (95% ΔΕ του β = 23,2 έως 57,9). 5. Υψηλότερα επίπεδα του παράγοντα VIII: C βρέθηκαν στα διαβητικά σε σχέση με τα υγιή παιδιά (95% ΔΕ του β = 5,34 έως 43,5). 6. Τα επίπεδα της γλυκοζιωμένης αιμοσφαιρίνης στα διαβητικά παιδιά εξαρτώνται όχι μόνο από τη διάρκεια της νόσου αλλά και από το φύλο.