Μελέτη του μεταβολισμού του παράγοντα ενεργοποίησης αιμοπεταλίων (PAF) σε ανθρώπινα μεσαγγειακά κύτταρα - επίδραση αντι-φλεγμονοδών, αντι-καρκινικών και αντι-ιϊκών παραγόντων στην δράση του PAF και των ενζύμων του μεταβολισμού του

Abstract

This study is a part of a general concept of the study of the implication of Platelet Activating Factor (PAF) and its metabolism in the mechanisms that result in renal diseases, cancer and AIDS. PAF metabolism was studied in human mesangial cells (HMC) and several factors that exhibit their beneficial effect in the above diseases also through their effect in PAF metabolism and its biological actions, were clarified. In particular: 1. A new enzymatic assay for the determination of the biosynthetic enzyme of PAF, PAF-CPT, was developed for the first time. Ιt was found that the activity of PAF-CPT is present in HMC and its biochemical properties and kinetic parameters in HMC were established for the first time. 2. Several drugs (simvastatin, IFNa, rupatadine, tinzaparin, and acetylsalicylic acid) and bioactive compounds of Mediterranean diet (polar lipids of olive oil, olive pomace, sea bass “Dicentrarchus labrax,” and gilthead sea bream “Sparus aurata” and resveratrol) exhibited an inhibitory effect on PAF-CPT activity. Simvastatin and polar lipids of olive pomace inhibited also the biosynthetic enzyme of PAF, Lyso-PAF-AT, while they induced the basic degradative enzyme of PAF, PAF-AH, of HMC. 3. Finally, several anti-HIV drugs, backbones and regimens of highly active antiretroviral therapy exhibited inhibitory effect against PAF-activity. Lopinavir -r and Tenofovir DF also inhibited the biosynthetic enzymes PAF-CPT and Lyso-PAF-AT, while lopinavir-r induced PAF-AH activity of HMC.

Η παρούσα μελέτη εντάσσεται στο γενικότερο πλαίσιο μελέτης της συμμετοχής του Παράγοντα Ενεργοποίησης Αιμοπεταλίων (PAF) στους μηχανισμούς πρόκλησης των νεφρικών παθήσεων, του καρκίνου και του AIDS. Μελετήθηκε ο μεταβολισμός του PAF σε ανθρώπινα μεσαγγειακά κύτταρα (HMC) και καθορίσθηκαν παράγοντες που επιδρώντας στην δράση και στα επίπεδα του παραγόμενου PAF, επιδεικνύουν ευεργετικές ιδιότητες στις προαναφερθείσες σημαντικές παθολογικές καταστάσεις. Συγκεκριμένα: 1. Αναπτύχθηκε νέα μέθοδος προσδιορισμού της ενζυμικής δραστικότητας του βιοσυνθετικού ενζύμου του PAF, PAF-CPT. Σύμφωνα με αυτήν, προσδιορίστηκε η δραστικότητα της PAF-CPT και καθορίστηκαν τα βιοχημικά χαρακτηριστικά και οι κινητικές παράμετροι του σε HMC. 2. Διάφορες φαρμακευτικές ουσίες (ρουπαταδίνη, συμβαστατίνη, ακετυλοσαλικυλικό οξύ, τινζαπαρίνη και IFNα), και βιολογικώς δραστικά συστατικά τροφίμων της Μεσογειακής δίαιτας (πολικά λιποειδή από ελαιόλαδο, ελαιοπυρήνα, τσιπούρα, λαυράκι και ρεσβερατρόλη) αναστέλλουν in vitro την PAF-CPT των HMC. Η συμβαστατίνη και τα πολικά λιποειδή από ελαιοπυρήνα ανέστειλαν και την Lyso-PAF-AT (βιοσυνθετικό ένζυμο του PAF) ενώ διέγειραν το βασικό αποικοδομητικό ένζυμο του PAF, PAF-AH. 3. Τέλος, διάφορα αντι-HIV φάρμακα και συνδυασμοί τους της αντιρετροϊκής θεραπείας επιδεικνύουν μια ανασταλτική επίδραση έναντι της βιολογικής δράσης του PAF. Δύο από αυτά τα φάρμακα (Lopinavir-r και Tenofovir-DF) ανέστειλαν τις PAF-CPT και Lyso-PAF-AT, ενώ το Lopinavir -r ενεργοποιεί την PAF-AH των HMC.