ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝ ΑΡΡΕΝΟΕΙΔΙΚΩΝ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ ΤΗΣ ΑΙΜΟΛΕΜΦΟΥ (MSSPS) ΣΤΗ ΜΕΣΟΓΕΙΑΚΗ ΜΥΓΑ CERATITIS CAPITATA: ΚΛΩΝΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΕΝΟΣ MSSP - CDNA

Abstract

THE AIM OF THIS STUDY WAS THE ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF MALE SPECIFIC GENES IN MEDITERRANEAN FRUIT FLY C.CAPITATA IN ORDER TO GENERATE GENETIC SEXINSTRAINS. TWO MAJOR MALE SPECIFIC SERUM POLYPEPTIDES, THE MSSP - Α AND Β, HAVE BEEN IDENTIFIED IN C.CAPITATA WITH MOLECULAR WEIGHTS 13.5 AND 14.5 RESPECTIVELY. IN ADULT MALES, THE FAT BODY SYNTHESIZES AND SECRETES INTO THE HEAMOLYMPH THE MSSPS POLYPEPTIDES. FURTHERMORE, THE MALE FAT BODY CONTAINS TWO ABUNDANT MRNAS WHICH YIELD, IN VITRO, TWO PRE - MSSPS WHICH UNDERGO POST - TRANSLATIONAL MODIFICATIONS TO GIVE RISE TO THE MATURE MSSPS. STUDIES DURING MALE DEVELOPMENT, SUGGEST THAT THE ONSET OF MSSPS SYNTHESIS IS REGULATED AT THE TRANSCRIPTIONAL LEVEL WHILE AT LATER STAGES OF DEVELOPMENT THE SYNTHESIS OF MSSPS IS REGULATED AT THE TRANSLATIONAL LEVEL. THE SYNTHESIS OF THE TWO MSSPS IS NOT CO - ORDINATED DURING DEVELOPMENT AND SEEMS TO BE DUE TO DIFFERENT TRANSLATIONAL RATES OF THE RESPECTIVE TRANSCRIPTS. BY SCREENING AN EXPRESSION LIBRARY WE HAVE ISOLATED AND DETERMINED THE NUCLEOTIDE SEQUENCE OF A CDNA CLONE CODING FOR THE MSSP - Α. SOUTHERN ANALYSIS INDICATED THAT THERE ARE MULTIPLE COPIES OF MSSP GENES IN THE MEDFLY GENOME. NORTHERN ANALYSIS SHOWED THAT THE MSSP MRNAS ARE SYNTHESIZED ONLY IN ADULT MALES AND THE ACCUMULATION PATTERNS OFTHESE MRNAS DURING DEVELOPMENT, SUGGEST THAT THE EXPRESSION OF THE MSSPS GENES IS DEVELOPMENTALLY REGULATED AT THE TRANSCRIPTIONAL AND TRANSLATIONAL LEVELS. WE SUGGEST THAT MSSPS REPRESENT PBPS (PHEROMON BINDING PROTEINS).

ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΗΣ ΔΙΑΤΡΙΒΗΣ ΗΤΑΝ Η ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΚΑΙ Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΑΡΡΕΝΟΕΙΔΙΚΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΤΗΣ ΜΕΣΟΓΕΙΑΚΗΣ ΜΥΓΑΣ, ΜΕ ΑΠΩΤΕΡΟ ΣΤΟΧΟ ΤΗ ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΣΤΕΛΕΧΩΝ ΓΕΝΕΤΙΚΟΥ ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟΥ ΤΟΥ ΦΥΛΟΥ ΣΤΗ ΜΕΣΟΓΕΙΑΚΗ ΜΥΓΑ. ΣΤΗΝ ΑΙΜΟΛΕΜΦΟ ΤΗΣ C.CAPITATA,ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ ΔΥΟ ΚΥΡΙΑ ΑΡΡΕΝΟΕΙΔΙΚΑ ΠΟΛΥΠΕΠΤΙΔΙΑ ΤΑ MSSP - Α ΚΑΙ Β ΜΕ ΜΟΡΙΑΚΑ ΒΑΡΗ 14.5 ΚΑΙ 13.5 KDA ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΑ. Ο ΛΙΠΩΔΗΣ ΙΣΤΟΣ ΤΩΝ ΑΡΣΕΝΙΚΩΝ ΑΤΟΜΩΝ ΣΥΝΘΕΤΕΙ ΤΑ MSSPS ΤΑ ΟΠΟΙΑ ΑΚΟΛΟΥΘΩΣ ΚΑΙ ΕΚΚΡΙΝΕΙ ΣΤΗΝ ΑΙΜΟΛΕΜΦΟ. ΕΠΙΣΗΣ ΠΕΡΙΕΧΕΙ ΔΥΟ ΚΥΡΙΑ ΑΡΡΕΝΟΕΙΔΙΚΑ ΜΕΤΑΓΡΑΦΑ ΤΑ ΟΠΟΙΑ ΜΕΤΑΦΡΑΖΟΜΕΝΑ IN VITRO, ΔΙΝΟΥΝ ΔΥΟ ΠΡΟ - MSSPS ΠΟΥ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΜΕΤΑ - ΜΕΤΑΦΡΑΣΤΚΕΣ ΤΡΟΠΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΔΙΝΟΥΝ ΤΑΚΥΡΙΑ MSSP ΠΟΛΥΠΕΠΤΙΔΙΑ. Η ΕΝΑΡΞΗ ΤΗΣ ΣΥΝΘΕΣΗΣ ΤΩΝ MSSPS ΡΥΘΜΙΖΕΤΑΙ ΣΤΟ ΜΕΤΑΓΡΑΦΙΚΟ ΕΠΙΠΕΔΟ ΕΝΩ Η ΣΥΝΘΕΣΗ ΤΩΝ MSSPS ΣΤΑ ΕΠΟΜΕΝΑ ΣΤΑΔΙΑ ΑΝΑΠΤΥΞΗΣ, ΥΠΟΚΕΙΤΑΙ ΣΕ ΜΕΤΑΦΡΑΣΤΙΚΟ ΕΛΕΓΧΟ. Η ΣΥΝΘΕΣΗ ΤΩΝ MSSP ΠΟΛΥΠΕΠΤΙΔΙΩΝ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΔΕΝ ΕΙΝΑΙ ΣΥΓΧΡΟΝΗ ΚΑΙ ΟΦΕΙΛΕΤΑΙ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟΥΣ ΜΕΤΑΦΡΑΣΤΙΚΟΥΣ ΡΥΘΜΟΥΣ ΤΩΝ ΜΕΤΑΓΡΑΦΩΝ ΤΟΥΣ. Η ΔΙΑΛΟΓΗ ΜΙΑΣ ΒΙΒΛΙΟΘΗΚΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΜΕ ANTI - MSSP ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ, ΕΔΩΣΕ ΕΝΑ ΚΛΩΝΟ CDNA ΠΟΥ ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΕΙ ΣΤΟ ΠΟΛΥΠΕΠΤΙΔΙΟ MSSP - Α. Η ΑΝΑΛΥΣΗ ΚΑΤΑ SOUTHERN ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ ΤΑ ΑΡΡΕΝΟΕΙΔΙΚΑ ΓΟΝΙΔΙΑ ΑΝΗΚΟΥΝ ΣΕ ΜΙΑ ΠΟΛΥΓΟΝΙΔΙΑΚΗΟΙΚΟΓΕΝΕΙΑ. Η ΑΝΑΛΥΣΗ ΚΑΤΑ NORTHERN ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ ΤΑ MSSP MRNAS ΣΥΝΘΕΤΟΝΤΑΙ ΜΟΝΟ ΣΤΑ ΑΡΣΕΝΙΚΑ ΑΤΟΜΑ ΤΟΥ ΕΙΔΟΥΣ ΚΑΙ Η ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΩΝ MSSP ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΑΝΑΠΤΥΞΗ, ΡΥΘΜΙΖΕΤΑΙ ΚΑΙ ΣΤΟ ΜΕΤΑΦΡΑΣΤΙΚΟ ΕΠΙΠΕΔΟ ΜΕΣΩ ΕΝΟΣ ΧΡΟΝΟΕΙΔΙΚΟΥ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΥ ΠΟΛΥΑΔΕΝΥΛΙΩΣΗΣ. ΟΙ MSSPS ΠΙΘΑΝΟΝ ΝΑ ΛΕΙΤΟΥΡΓΟΥΝ ΣΑΝ ΜΟΡΙΑ - ΦΟΡΕΙΣ ΦΕΡΟΜΟΝΩΝ ΣΤΑ ΑΡΣΕΝΙΚΑ ΑΤΟΜΑ.