Τυποποίηση στελεχών λεγεωνέλλας pneumophila ορότυπων 2-14 και ανίχνευση γονιδίων παθογονικότητας

Abstract

The aim of this study is to explore the dispersion, clonality, and virulence of Legionella pneumophila serogroups 2 to 14 in the Greek environment. Eighty L.pneumophila serogroup 2 to 14 strains isolated from water distribution systems of hotels, hospitals, athletic venues, and ferries in Greece were tested by monoclonal antibodies(MAbs) for serogroup discrimination and molecularly by amplified fragment length polymorphism (AFLP) for genetic diversity. Fifty-six of 80 strains were also typed by the sequence-based typing (SBT) method. Αll strains were further analyzed for detection of two pathogenicity loci: Legionella vir homologue (lvh) and repeats in structural toxin (rtxA). Thirty-seven strains (46.2%) belonged to serogroup 6, 26 strains (32.5%) to serogroup 3, and 7 (8.8%) to other serogroups (4,5,8, and 10). Ten strains (12.5%) were non typeable (NT) into the known serogroups.Thirty-nine different AFLP types were found among the 80 L.pneumophila serogroup 2 to 14 strains, and 24 different SBT types were found among the 56 strains tested. Among the 80 strains, the lvh locus was present in 75 (93.8%), the rtxA locus was found in 76 (95%), and both loci were found in 73 (91.3%) strains.This study showed that there is genetic variability of L.pneumophila serogroups 2 to 14 in the Greek environment as well as a high percentage of the pathogenicity loci. Introducing an effective diagnostic test for L.pneumophila serogroups 2 to 14 in urine and promoting the examination of respiratory specimens from patients hospitalized for pneumonia in Greek hospitals are essential.

Ο σκοπός αυτής της μελέτης είναι να εξερευνήσει την διασπορά, την κλωνικότητα και τη λοιμογονικότητα της Legionella pneumophila οροτύπων 2-14 στο Ελληνικό Περιβάλλον. Ογδόντα στελέχη Legionella pneumophila οροτύπων 2-14 που απομονώθηκαν από το δίκτυο πόσιμου νερού των ξενοδοχείων, νοσοκομείων, αθλητικών εγκαταστάσεων και φέρυ στην Ελλάδα οροτυπήθηκαν με μονοκλωνικά αντισώματα (Mabs) και αναλύθηκαν με μοριακή ανάλυςη με amplified fragment length polymorphism (AFLP) για γενετική διάκριςη. Πενήντα έξι από τα ογδόντα στελέχη τυποποιήθηκαν επίσης με τη μέθοδο της διαδοχικής αλληλούχισης SBT. Όλα τα στελέχη αναλύθηκαν περαιτέρω για την ανίχνευση γονιδίων παθογονικότητας: Legionella vir homologue (lvh) και repeats in structural toxin (rtxA). Τριάντα επτά στελέχη (46,2%) ανήκαν στον ορότυπο 6, 26 στελέχη (32,5%) στον ορότυπο 3, και 7 (8,8%) σε άλλους οροτύπους (4,5,8, και 10). Δέκα στελέχη (12,5%) ήταν μη τυποποίησιμα στους γνωστούς οροτύπους (NT). Τριανταεννέα διαφορετικοί AFLP τύποι βρέθηκαν ανάμεσα στα 80 στελέχη L.pneumophila οροτύπων 2-14 και 24 διαφορετικοί SBT τύποι βρέθηκαν στα 56 στελέχη που δοκιμάστηκαν. Ανάμεσα στα 80 στελέχη, ο γενετικός τόπος lvh βρέθηκε σε 75 (93,8%), ο γενετικός τόπος rtxA βρέθηκε σε 76 (95%), και οι δύο γενετικοί τόποι βρέθηκαν σε 73 (91,3%) στελέχη. Αυτή η μελέτη έδειξε ότι η γενετική ποικιλλότητα της L.pneumophila οροτύπων 2-14 στο ελληνικό περιβάλλον καθώς και το υψηλό ποσοστό των γενετικών τόπων παθογονικότητας. Η εισαγωγή ενός αποτελεσματικού διαγνωστικού τεστ για την L.pneumophila οροτύπων 2 - 14 σε ούρα και η προώθηςη της εξέτασης δειγμάτων του αναπνευστικού για τους νοσηλευόμενους ασθενείς για πνευμονία στα ελληνικά νοσοκομεία είναι απαραίτητη.