Κυτταρική απάντηση από το τενόντιο έλυτρο σε συρραφέντα τένοντα

Abstract

Purpose: We aimed to investigate the synovial sheath cell migration in response to flexor tendon injury under direct visualization and the metabolic cellular activities during the healing process.Methods: We used New Zealand rabbits based on an animal model described in previous studies, which we modified in order to create conditions similar to real tendon injury and healing. We study two groups. In the group A we study the cell migration from the synovial sheath during healing. In the group B we study the differences of the cellular activity during healing. In the group A we used a special paint marker (1,1'-dioctadecyl1-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine-percolate - Dil) of the sheath cells. In the group B we used the following dyes: Ki-67, CD-68, EGF-R, and P53. The flexor digitorum profondus first was sectioned through a distal skin incision and pulled outside the sheath through a proximal skin incision. Then, in the group A, the sheath was labelled. A second intrasynovial full thickness cross-section of the flexor was done and repaired by Kessler and running type suture. We harvested the tendons day 1, 3, 5, 7, 14 and 28 after tendon injury. Tendon sections were prepared with cryotomy and tested by infrared microscope for the group A and stored in formalin for the group B. In group A, to evaluate our results, we divided the migration of synovial sheath cells in four phases: 1st phase) no or sporadic migration to the surface of the tendon, 2nd phase) massive migration to the surface of the tendon, 3rd phase) migration just below the surface of the tendon, and 4th phase) migration in the endotenon. For each day’s group the percentage of tendon sections in each phase of migration was determined. In group B we evaluated the percentage of tendon section for each postoperative group day in each positive dye.Results: According to our findings the second phase of migration of cells was 85% reached on the 3rd day, the third phase 66,6% reached on the seventh day and the fourth phase 50% reached on the fourteenth day after flexor tendon injury. Metabolic activities of synovial sheath cells and the epitendon cells are increased during the first days of tendon injury and later, after two weeks, are increased of the endotendon cells.Conclusions: This study confirms that the synovial sheath cells migrate first into the surface and later into the core of the healing tendon. The increase of the metabolic activity coincides with the cellular migration from the synovial sheath.

Σκοπός: Να μελετήσουμε το βαθμό της μετανάστευσης των κυττάρων από το τενόντιο έλυτρο μετά από διατομή και συρραφή του τένοντα υπό άμεση όραση και να μελετήσουμε τις μεταβολικές δραστηριότητες των κυττάρων του τένοντα κατά τη διάρκεια της επούλουσής του.Μέθοδος: Η μελέτη πραγματοποιήθηκε σε 72 κόνικλους Νέας Ζηλανδίας. Χρησιμοποιήσαμε ένα ζωικό μοντέλο από προηγούμενη μελέτη το οποίο τροποποιήσαμε με σκοπό να δημιουργήσουμε συνθήκες πλησιέστερες στην πραγματικότητα τραυματισμού του τένοντα και επούλωσής του. Τα πειραματόζωα χωρίστηκαν σε δύο ομάδες προκειμένου να μελετήσουμε την κυτταρική μετανάστευση στη πρώτη ομάδα και τις μεταβολικές δραστηριότητες στη δεύτερη ομάδα. Στη πρώτη ομάδα χρησιμοποιήθηκε μια ειδική βαφή (1,1'-dioctadecyl1-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine-percolate - Dil) που μαρκάρει τα κύτταρα του ελύτρου. Ο εν τω βάθει καμπτήρας των δακτύλων του πρόσθιου άκρου συρόταν εκτός του ελύτρου και στη συνέχεια το έλυτρο βαφόταν με την ειδική βαφή. Στη συνέχεια γινόταν πλήρης διατομή και αποκατάσταση του τμήματος του καμπτήρα που βρίσκεται εντός του ελύτρου με συρραφή τύπου Kessler και περιφερικά συνεχόμενη συρραφή. Εντέλει, καμπτήρας επανατοποθετείτο στο έλυτρο. Στη δεύτερη ομάδα γινόταν ακριβώς η ίδια διαδικασία χωρίς τη χρήση της ειδικής βαφής. Στα αντίθετα άκρα γινόταν η ίδια διαδικασία χωρίς τη διατομή του ενδο-ελυτρικού τμήματος του καμπτήρα και χρησιμοποιήθηκαν ως μοσχεύματα ελέγχου. Γινόταν η λήψη των καμπτήρων στην 1η, 3η, 5η, 7η, 14η, 28η, 42η και 84η ημέρα από την ημέρα της διατομής. Έτσι προκύψαν 8 χρονολογικές ομάδες λήψης μοσχευμάτων. Στην πρώτη ομάδα που γινόταν η εκτίμηση της μετανάστευσης των κυττάρων, τα παρασκευάσματα του τένοντα λήφθηκαν με κρυοτόμο και ελέγχθηκαν σε μικροσκόπιο υπέρυθρων. Προκειμένου να εκτιμηθούν τα αποτελέσματα χωρίσαμε τη μετανάστευση των κυττάρων σε τέσσερεις φάσεις: 1η φάση) καθόλου ή σποραδική μετανάστευση των κυττάρων στην επιφάνεια του τένοντα, 2η φάση) σημαντική μετανάστευση στην επιφάνεια του τένοντα, 3η φάση) μετανάστευση μόλις κάτω από την επιφάνεια του τένοντα και 4η φάση) μετανάστευση στον ενδοτένοντα. Στη συνέχεια καθορίστηκε το ποσοστό των φάσεων της μετανάστευσης που αναλογούσαν σε κάθε χρονολογική ομάδα μοσχευμάτων. Στη δεύτερη ομάδα ελέγχθηκαν οι μεταβολικές δραστηριότητες ανά χρονολογική ομάδα.Αποτελέσματα: Στην πρώτη ομάδα παρατηρήθηκε ότι το 85% βρισκόταν στη 2η φάση της μετανάστευσης την 3η μέρα, το 66% βρισκόταν στην 3η φάση την 7η μέρα και το 50% βρισκόταν στην 4η φάση την 14η μέρα από την συρραφή του τένοντα. Στη δεύτερη ομάδα διαπιστώθηκε ότι υπάρχει έντονη μεταβολική δραστηριότητα στο έλυτρο και τον επιτένοντα.