Η απόπτωση των κυττάρων του βρογχοκυψελιδικού επιθηλίου σε ασθενείς πάσχοντες από πνευμονία

Abstract

Introduction: Apoptosis is an essential process in which cells are deleted in a controlled manner to limit excessive damage to the surrounding tissue. Dysregulation of immune cell apoptosis, however, could also be detrimental to the host. In chronic inflammatory diseases, such as bronchial asthma, prolonged survival of polymorphonuclear neutrophils (PMN) is associated with tissue injury leading to organ dysfunction and failure, yet in humans, little is known about the survival of alveolar neutrophils and macrophages in the acutely inflamed lung. The aim of this study was to evaluate the rate of apoptotic cell death of alveolar neutrophils and macrophages from patients with community-acquired (CAP), nosocomial and/or ventilator-associated (VAP) pneumonia.Methods: Twenty-two (22) consecutive patients with pneumonia were enrolled in this study, while the control group consisted of nine (9) healthy volunteers with no concomitant lung disease. Bronchoalveolar Lavage (BAL) was obtained from the above participants and apoptosis of alveolar macrophages (AM) and polymorphonuclear neutrophils (PMN) was evaluated using Annexin V-FITC, 7-Amino-Actinomycin D (7AAD) and Flow Cytometry (FCM).Results: Apoptotic cell death of alveolar macrophages and neutrophils was significantly reduced in patients with pneumonia compared to that of the control group. Apoptosis of AMs in survivors was significantly lower than in non-survivors.Conclusions: We have demonstrated that alveolar neutrophils and macrophages from patients with bacterial pneumonia have decreased apoptosis compared to the control group. On the contrary, the increased alveolar macrophage apoptosis correlated with increased mortality, postulating an early and important role of AM apoptosis in the inflammatory process.

Εισαγωγή: Όπως αναφέρθηκε στο γενικό μέρος η Απόπτωση είναι μια απαραίτητη βιολογική διαδικασία με την οποία εξαλείφονται κύτταρα, σε μια συντονισμένη προσπάθεια που σκοπό έχει την αποφυγή εκδήλωσης φλεγμονής στους περιβάλλοντες ιστούς. Απορρύθμιση της απόπτωσης των ανοσοκυττάρων θα μπορούσε να είναι επιβλαβής για τον ξενιστή. Σε χρόνιες φλεγμονώδεις καταστάσεις όπως το βρογχικό άσθμα, η παρατεταμένη επιβίωση των πολυμορφοπύρηνων ουδετερόφιλων (PMN), συνοδεύεται από ιστική βλάβη που οδηγεί σε δυσλειτουργία και έκπτωση του οργάνου. Στον άνθρωπο όμως λίγα είναι γνωστά για την επιβίωση των κυψελιδικών ουδετερόφιλων και μακροφάγων στην οξεία φλεγμονή του πνευμονικού παρεγχύματος.Σκοπός: αυτής της μελέτης είναι να ερευνήσει το βαθμό της απόπτωσης των ουδετερόφιλων κα των μακροφάγων σε ασθενείς πάσχοντες από πνευμονία της κοινότητας (CAP), ενδονοσοκομειακή και πνευμονία στον αναπνευστήρα (VAP).Μέθοδος: Είκοσι δύο (22) ασθενείς με πνευμονία περιελήφθησαν στη μελέτη, ενώ την ομάδα ελέγχου (control group) αποτέλεσαν εννέα (9) υγιείς εθελοντές χωρίς υποκείμενη πνευμονική νόσο. Στο βρογχοκυψελιδικό έκπλυμα (BAL) που ελήφθη από αυτούς τους ασθενείς μελετήθηκε η απόπτωση των ουδετερόφιλων και των μακροφάγων με τις μεθόδους της Annexin V-FITC, της 7-Amino-Actinomycin D (7AAD) και της κυτταρομετρίας ροής (FCM).Αποτέλεσμα: Η Απόπτωση των κυψελιδικών ουδετεροφίλων και των μακροφάγων βρέθηκε σημαντικά μειωμένη στους ασθενείς με πνευμονία σε σύγκριση με τους υγιείς εθελοντές. Επίσης η απόπτωση των μακροφάγων ήταν σημαντικά πιο μειωμένη στους ασθενείς που επέζησαν σε σύγκριση με αυτούς που κατέληξαν από τη νόσο. Συμπεράσματα: Η μελέτη αυτή κατέδειξε ότι τα κυψελιδικά ουδετερόφιλα και τα μακροφάγα στους ασθενείς με βακτηριακή πνευμονία παρουσίασαν σημαντικά ελαττωμένη απόπτωση σε σύγκριση με την ομάδα των υγιών εθελοντών. Εν αντιθέσει η αυξημένη απόπτωση των κυψελιδικών μακροφάγων συνοδεύτηκε από αύξηση της θνητότητας των συγκεκριμένων ασθενών γεγονός που φανερώνει τον πρώιμο και σημαντικό ρόλο της απόπτωσης των μακροφάγων στη διαδικασία της φλεγμονής