Χαρακτηρισμός και μελέτη της κινάσης πρωτεϊνών που φωσφορυλιώνει τις επαναλαμβανόμενες αλληλουχίες αργινίνης / σερίνης του αμινοτελικού άκρου του υποδοχέα της λαμίνης Β

Περίληψη

Στην παρούσα εργασία καθαρίστηκε και χαρακτηρίστηκε από κυτταρόπλασμα όρχεων αρουραίου η δραστικότητα RS κινάσης πρωτεϊνών, η οποία είναι υπεύθυνη για τη φωσφορυλίωση της αλληλουχίας διπεπτιδίων αργινίνης/σερίνης του αμινο-τελικού άκρου του υποδοχέα της λαμίνης Β. Επίσης μελετήθηκε ο ρόλος της φωσφορυλίωσης στη ρύθμιση της αλληλεπίδρασης μεταξύ της πρωτεΐνης p32 και της RS ακολουθίας του LBR αλλά και αντίστροφα πως η αλληλεπίδραση αυτή επιτρέπει ή μη, τη φωσφορυλίωση του υποδοχέα. Δεδομένου ότι η SRPK1 εκφράζεται κατά κύριο λόγο στους όρχεις αλλά και τα επίπεδα των LBR και p32 στο συγκεκριμένο ιστό είναι σχετικά υψηλά έγιναν μελέτες της κατανομής των πρωτεϊνών αυτών σε ιστούς όρχεων, σε μία πρώτη προσέγγιση για την αποσαφήνιση του ρόλου τους κατά τη διάρκεια της σπερματογένεσης. Τέλος ένας άλλος σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η ρύθμιση της δραστικότητας της SRPK1 μέσω μετα-μεταφραστικών τροποποιήσεων και συγκεκριμένα της φωσφορυλίωσης της από άλλες κινάσες πρωτεϊνών. Για τον καθαρισμ ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

In the present thesis, we purified and characterized a serine/arginine protein kinase activity from rat testis cytosolic extracts, that is responsible for the phosphorylation of the Nterminal domain of LBR. The phosphorylating activity was purified using two column chromatography steps, consisting of the ion exchanger P-cellulose and an Affigel-10 column containing a synthetic peptide with the RS region of LBR. As substrates we used the Nterminal domain of LBR expressed in bacteria as a GST fusion protein (GST-wtNt) and a similar fusion protein lacking the RS dipeptides (GST-ΔRS). The purified activity was characterized and identified as SRPK1, using western blotting analysis, GST pull down assays, phosphopeptide mapping and in vitro phosphorylation of RS domain containing substrates. In a following step, we showed that the N-terminal domain of LBR binds to p32, whereas a mutated domain lacking the RS region does not. Phosphorylation of LBR by SRPK1 completely abolishes binding of p32, ...
περισσότερα
Πρέπει να είστε εγγεγραμένος χρήστης για έχετε πρόσβαση σε όλες τις υπηρεσίες του ΕΑΔΔ  Είσοδος /Εγγραφή

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/15229
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/15229
Εναλλακτικός τίτλος
Characterization of a protein kinase that phosphorylates the serine / arginine repeats of the n-terminal domain of LBR
Συγγραφέας
Μυλωνής, Ηλίας Αντώνιος
Ημερομηνία
2003
Ίδρυμα
Αριστοτέλειο Πανεπιστήμιο Θεσσαλονίκης (ΑΠΘ). Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας. Τομέας Οργανικής Χημείας και Βιοχημείας. Εργαστήριο Βιοχημείας
Εξεταστική επιτροπή
Γιαννακούρος Θωμάς
Κυριακίδης Δημήτριος
Σκούρας Ζαχαρίας
Γεωργάτος Σπύρος
Γιουψάνης Τραϊανός
Αρζόγλου Παντελής
Χόλη-Παπαδοπούλου Θεοδώρα
Γιαννακούρος Θωμάς
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές Επιστήμες
Χημεία
Λέξεις-κλειδιά
Φωσφορυλίωση
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
206 σ., εικ.