ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΩΝ ΜΗΧΑΝΙΣΜΩΝ ΤΗΣ ΜΕΤΑ-ΜΕΤΑΓΡΑΦΙΚΗΣ ΡΥΘΜΙΣΗΣ ΤΟΥ ΠΡΩΤΟ-ΟΓΚΟΝΙΔΙΟΥ C-MYC

Abstract

OUR GOAL WAS TO ELUCIDATE THE IFN-A INDUCED ALTERATIONS ON THE DEGRADATION PROCESS OF C-MYC MRNA. INTERMEDIATE DEGRADATION PRODUCTS WERE DETECTED IN TRANSFECTED CELLS OVEREXPRESSING STRUCTURALLY IDENTICAL TO NORMAL C-MYC MRNA. IT WASDEMONSTRATED THAT C-MYC MRNA DEGRADATION FOLLOWS TWO PATHWAYS. RAPID DEADENYLATION RESULTS IN THE ACCUMULATION OF OLIGOADENYLATED C-MYC MRNA DUE TO A ENDONUCLEOLYTIC CLEAVAGE WITHOUT PRIOR DEADENYLATION. EXPOSURE TO INF-A ENHANCESTHIS MECHANISM. INHIBITION OF PROTEIN SYNTHESIS DOES NOT PREVENT THE FORMATION OF PRODUCTS OF ENDONUCLEOLYTIC CLEAVAGE. THE TRANSLATABILITY OF THE OLIGOADENYLATED C-MYC MRNA GENERATED IN VIVO, IN THE PRESENCE OF CORDYCEPIN (3'DA) WAS DETERMINED. OUR DATA INDICATE THAT OLIGOADENYLATED C-MYC MRNA SYNTHESIZED IN THE PRESENCE OF CORDICEPIN IS MORE EFFICIENT AS A TEMPLATE FOR PROTEIN SYNTHESIS COMPARED TO ITS COUNTERPART WITH HETEROGENEOUS DISTRIBUTION OF POLY(A) TAILS C-MYC MRNA OF CONTROL CELLS. THE DATA SUGGEST THAT THE NATURALLY GENERATED OLIGOADENYL C-MYC MRNA THROUGH THE DEADADENYLATION PROCESS POSSIBLY REPRESENTS THE TRANSLATIONALLY ACTIVE FORM OF C-MYC MRNA.

ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΑΥΤΗΣ ΗΤΑΝ ΝΑ ΕΝΤΟΠΙΣΘΟΥΝ ΟΙ ΑΛΛΑΓΕΣ ΣΤΗΝ ΠΟΡΕΙΑ ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΗΣΗΣ ΤΟΥ C-MYC MRNA ΠΟΥ ΠΡΟΚΑΛΟΥΝΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ IFN-Α. ΕΝΔΙΑΜΕΣΑ ΠΡΟΙΟΝΤΑ ΤΗΣ ΠΟΡΕΙΑΣ ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΗΣΗΣ ΑΝΙΧΝΕΥΘΗΚΑΝ ΣΕ ΕΠΙΜΟΛΥΣΜΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΠΟΥ ΥΠΕΡΕΚΦΡΑΖΑΝ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΗΣ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗΣ C-MYC MRNA. ΔΕΙΧΔΗΚΕ ΟΤΙ ΤΟ C-MYC MRNA ΚΑΤΑΒΟΛΙΖΕΤΑΙ ΜΕΣΩ ΔΥΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΩΝ: Η ΓΡΗΓΟΡΗ ΑΠΟΑΔΕΝΥΛΙΩΣΗ ΤΟΥ ΜΗΝΥΜΑΤΟΣ ΟΔΗΓΕΙ ΣΤΗ ΣΥΣΣΩΡΕΥΣΗΟΛΙΓΟΑΔΕΝΥΛΙΩΜΕΝΟΥ C-MYC MRNA ΛΟΓΩ ΕΠΙΒΡΑΔΥΝΣΗΣ ΣΤΟ ΡΥΘΜΟ ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΗΣΗΣ ΤΟΥ ΤΕΛΕΥΤΑΙΟΥ. ΕΠΙΠΡΟΣΘΕΤΑ ΤΗΣ ΠΟΡΕΙΑΣ ΑΥΤΗΣ ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ ΟΤΙ ΤΟ C-MYC MRNA ΜΠΟΡΕΙ ΝΑ ΥΠΟΚΕΙΤΑΙ ΣΕ ΕΝΔΟΝΟΥΚΛΕΟΛΥΤΙΚΗ ΠΕΨΗ ΧΩΡΙΣ ΠΡΟΗΓΟΥΜΕΝΗ ΑΠΟΑΔΕΝΥΛΙΩΣΗ ΤΟΥ. Η ΕΚΘΕΣΗ ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΣΤΗΝ IFN-Α ΕΝΙΣΧΥΕΙ ΤΗΝ ΔΡΑΣΗ ΤΟΥ ΕΝΔΟΝΟΥΚΛΕΟΛΥΤΙΚΟΥ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΥ. ΟΙ ΔΥΟ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΙ ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΗΣΗΣ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΟΥΝΤΑΙ ΟΣΟΝ ΑΦΟΡΑ ΤΗΝ ΕΥΑΙΣΘΗΣΙΑ ΤΟΥΣ ΣΤΗΝ ΑΝΑΣΤΟΛΗ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗΣ. ΜΕΛΕΤΗΣΑΜΕ ΤΗΝ ΜΕΤΑΦΡΑΣΙΜΟΤΗΤΑ ΤΟΥ ΟΛΙΓΟΑΔΕΝΥΛΙΩΜΕΝΟΥ C-MYC MRNA ΠΟΥ ΣΧΗΜΑΤΙΖΕΤΑΙ IN VIVO ΠΑΡΟΥΣΙΑ CORDYCEPIN (3'DA). ΤΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΕΔΕΙΞΑΝ ΟΤΙ ΤΟ ΜΗΝΥΜΑ ΑΥΤΟ ΕΙΝΑΙ ΠΙΟ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΟ ΕΚΜΑΓΕΙΟ ΓΙΑ ΤΗΝ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗ ΑΠΟ ΤΟ ΟΜΟΛΟΓΟ ΤΟΥ, ΕΤΕΡΟΓΕΝΕΣ ΩΣ ΠΡΟΣ ΤΟ ΜΗΚΟΣ ΤΗΣ ΠΟΛΥΑΔΕΝΥΛΙΚΗΣ ΟΥΡΑΣ, C-MYC MRNA ΣΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΜΑΡΤΥΡΕΣ. ΤΑ ΔΕΔΟΜΕΝΑ ΥΠΟΔΗΛΩΝΟΥΝ ΟΤΙ ΤΟ ΟΛΙΓΟΑΔΕΝΥΛΙΩΜΕΝΟ C-MYC MRNA ΠΟΥ ΣΧΗΜΑΤΙΖΕΤΑΙ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΑΜΕΣΩ ΤΗΣ ΑΠΟΑΔΕΝΥΛΙΩΣΗΣ ΑΠΟΤΕΛΕΙ ΕΝΔΕΧΟΜΕΝΑ ΤΗΝ ΜΕΤΑΦΡΑΣΤΙΚΑ ΕΝΕΡΓΗ ΜΟΡΦΗ ΤΟΥ C-MYC MRNA.