Μελέτη της επίδρασης της ροσουβαστατίνης στο αθηροσκληρωτικό προφίλ ΑροΕ-/- μυών

Abstract

Background: Apolipoprotein E-deficient (Apoe−/−) mice develop atherosclerotic lesions that closely resemble metabolic syndrome in humans. We sought to investigate how rosuvastatin mitigates the atherosclerotic profile of Apoe−/− mice over time and its effects on certain inflammatory chemokines. Methods: Eighteen Apoe−/− mice were allocated into three groups of six mice each receiving: standard chow diet (SCD; control group); high-fat diet (HFD); and HFD and rosuvastatin at 5 mg/kg/d via intragastric administration for 20 weeks. Analysis of aortic plaques and lipid deposition was conducted by means of en face Sudan IV staining and Oil Red O staining. Serum cholesterol, low-density lipoprotein, high-density lipoprotein, plasma glucose and triglyceride levels were determined at baseline and after 20 weeks of treatment. Serum interleukin 6 (IL6), C-C motif chemokine ligand 2 (CCL2) and tumor necrosis factor-α (TNFα) levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay at the time of euthanasia. Results: The lipidemic profile of Apoe−/− mice on HFD deteriorated over time. Apoe−/− mice on HFD developed atherosclerotic lesions over time. Sudan IV and Oil Red O-stained sections of the aorta revealed increased plaque formation and plaque lipid deposition in HFD-fed mice compared with SCD-fed mice and reduced plaque development in HFD-fed mice treated with rosuvastatin compared with mice not receiving statin treatment. Serum analysis revealed reduced metabolic parameters in HFD-fed mice on rosuvastatin compared with non-statin, HFD-fed mice. At the time of euthanasia, HFD-fed mice treated with rosuvastatin had significantly lower IL6 as well as CCL2 levels when compared with HFD-fed mice not receiving rosuvastatin. TNFα levels were comparable among all groups of mice, irrespective of treatment. IL6 and CCL2 positively correlated with the extent of atherosclerotic lesions and lipid deposition in atherosclerotic plaques. Conclusion: Rosuvastatin reduced progression of atherosclerotic lesions in HFD-fed Apoe−/− mice and reduced serum IL6 and CCL2 levels after 20 weeks of treatment. Serum IL6 and CCL2 levels correlated with the extent of atherosclerotic lesion. Serum IL6 and CCL2 levels might potentially be used as clinical markers of progression of atherosclerosis during statin treatment for hypercholesterolemia.

Εισαγωγή: Tα ποντίκια που στερούνται απολιποπρωτεΐνης Ε (ApoE-/-) αναπτύσσουν αθηροσκληρωτικές πλάκες που μοιάζουν στενά με το μεταβολικό σύνδρομο στους ανθρώπους. Διερευνήσαμε πως η ροσουβαστατίνη αμβλύνει το αθηροσκληρωτικό προφίλ των ApoE-/- ποντικών κατά τη διάρκεια του χρόνου και τις επιδράσεις της σε σχέση με συγκεκριμένες φλεγμονώδεις χημειοκίνες. Μέθοδοι: Δεκαοκτώ ApoE-/- μύες μοιράστηκαν σε τρεις ομάδες των έξι ποντικών η κάθε μία από τις οποίες λάμβαναν: κανονική δίαιτα (SCD; ομάδα ελέγχου), υψηλής περιεκτικότητας σε λίπος δίαιτα (HFD) και HFD με ροσουβαστατίνη σε δοσολογία 5 mg/kg/ημέρα από στόματος για 20 εβδομάδες. Η ανάλυση των αορτικών πλακών και της εναπόθεσης λιπιδίων πραγματοποιήθηκε με χρώσεις Sudan IV και Oil Red O. Οι συγκεντρώσεις χοληστερόλης, χαμηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνης (LDL), υψηλής πυκνότητας λιποπρωτεΐνης (HDL), γλυκόζης και τριγλυκεριδίων στο πλάσμα καθορίστηκαν στην αρχή και μετά από 20 εβδομάδες αγωγής. Οι συγκεντρώσεις της ιντερλευκίνης 6 (IL6), C-C motif chemokine ligand 2 (CCL2) και του παράγοντα νέκρωσης όγκων-α (TNFα) στο πλάσμα μετρήθηκαν με τη μέθοδο ELISA κατά τη διάρκεια της ευθανασίας. Αποτελέσματα: Το λιπιδαιμικό προφίλ των ApoE-/- ποντικών που τρέφονταν με HFD χειροτέρευσε με την πάροδο του χρόνου. Οι ApoE-/- ποντικοί που κατανάλωναν HFD ανέπτυξαν αθηροσκληρωτικές πλάκες με την πάροδο του χρόνου. Με τις χρώσεις Sudan IV και Oil Red O στην αορτή παρατηρήθηκε αυξημένη ανάπτυξη πλακών και εναπόθεση λιπιδίων στις πλάκες στους μύες που τρέφονταν με HFD σε σχέση με αυτούς που τρέφονταν με SCD και μειωμένη ανάπτυξη πλακών στους ποντικούς που τρέφονταν με HFD και υποβλήθηκαν σε αγωγή με ροσουβαστατίνη σε σχέση με τους ποντικούς που δεν λάμβαναν ροσουβαστατίνη. Η ανάλυση του ορού αποκάλυψε μειωμένες μεταβολικές παραμέτρους στους ποντικούς που κατανάλωναν HFD και λάμβαναν ροσουβαστατίνη σε σύγκριση με τους ποντικούς που δεν λάμβαναν στατίνη. Την ώρα της ευθανασίας, οι ποντικοί που τρέφονταν με HFD και υποβλήθηκαν σε αγωγή με ροσουβαστατίνη είχαν σημαντικά χαμηλότερα επίπεδα IL6 και CCL2 σε σύγκριση με τους ποντικούς που τρέφονταν με HFD και δεν λάμβαναν ροσουβαστατίνη. Τα επίπεδα TNFα ήταν συγκρίσιμα μεταξύ όλων των ομάδων των ανεξαρτήτως αγωγής. Τα επίπεδα IL6 και CCL2 συσχετίστηκαν θετικά με την έκταση των αθηροσκληρωτικών πλακών και την εναπόθεση λιπιδίων στις αθηροσκληρωτικές πλάκες. Συμπεράσματα: Η ροσουβαστατίνη μείωσε την πρόοδο των αθηροσκληρωτικών πλακών σε ApoE-/- μύες που κατανάλωναν HFD και μείωσε τα επίπεδα IL6 και CCL2 στον ορό μετά από 20 εβδομάδες αγωγής. Τα επίπεδα IL6 και CCL2 συσχετίστηκαν με την έκταση των αθηροσκληρωτικών πλακών. Τα επίπεδα IL6 και CCL2 στον ορό μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως κλινικοί δείκτες προόδου της αθηροσκλήρωσης κατά τη διάρκεια της αγωγής με στατίνες για την υπερχοληστερολαιμία.