Καρωτιδική νόσος: μελέτη της αξίας μοριακών δεικτών φλεγμονής στον προσδιορισμό της ευάλωτης πλάκας

Abstract

Carotid disease is one of the many forms of cardiovascular disease, which may lead to chronic disability and death. It is a multifactorial inflammatory disease, greatly affected by an individual’s habits like smoking, lack of exercise, and a diet high in fats. MicroRNAs (miRs) are known to be involved in vascular inflammation. We aimed to analyse in a case-control study the expression profile of selected miRs from patients with symptomatic carotid disease and to examine their involvement in the disease pathogenesis. Samples from 38 symptomatic patients who underwent carotid endarterectomy were collected and adjacent healthy regions from 15 patients were used as control samples. Fold change in the expression of miR21, miR122, miR146a and miR196α was measured using reverse transcription-real time PCR. Western blot was used to quantify the levels of MMP2 protein whose gene is a target of miR21. Compared to control samples, all patients showed upregulation of miR21, miR122, miR146a and miR196a. No statistical significance was found to exist from patients with high or low miRs expression and clinical/laboratory parameters. The levels of MMP2 were found to be decreased in patients when compared to control samples. Our results revealed miRs which showed different expression in endarterectomy specimens from patients with symptomatic carotid disease, suggesting that these miRs correlated with vascular inflammation. Furthermore, mir21 seems an appealing pharmaceutical target since by targeting MMP2 can favour a stable plaque since low levels of the protein of its gene MMP2 target prevent the fibrous cap of the atheroma from getting thinner. Thus, miR21 seems to prevent rupture but further research is required.

Η καρωτιδική νόσος είναι μία ασθένεια του καρδιαγγειακού η οποία μπορεί να οδηγήσει σε χρόνια αναπηρία και θάνατο. Πρόκειται για μία πολυπαραγοντική φλεγμονώδη νόσο η οποία επηρεάζεται σε μεγάλο βαθμό από τις συνήθειες του ατόμου όπως το κάπνισμα, η έλλειψη άσκησης και η διατροφή πλούσια σε λίπη. Τα micro-RNAs (miRs) είναι γνωστό πως εμπλέκονται στην αγγειακή φλεγμονή. Στόχος μας ήταν να μελετήσουμε το προφίλ έκφρασης ορισμένων miRs σε ασθενείς με συμπτωματική νόσο και να εξετάσουμε τη συμμετοχή τους στην παθογένεια της νόσου. Συλλέχθηκαν δείγματα από 38 συμπτωματικούς ασθενείς που υποβλήθηκαν σε καρωτιδική ενδαρτηρεκτομή και παρακείμενες υγιείς περιοχές από 15 ασθενείς χρησιμοποιήθηκαν ως δείγματα ελέγχου. Η διαφορά έκφρασης των miR21, miR122, miR146a και miR196a μετρήθηκε με τη χρήση της PCR αντίστροφης μεταγραφάσης πραγματικού χρόνου. Το στύπωμα Western χρησιμοποιήθηκε για την ποσοτικοποίηση των επιπέδων της πρωτεΐνης MMP2, το γονίδιο της οποίας είναι στόχος του miR21. Σε σύγκριση με τα δείγματα ελέγχου, όλοι οι ασθενείς εμφάνισαν αυξημένη έκφραση των miR21, miR122, miR146a και miR196a. Δεν βρέθηκε στατιστική σημαντικότητα μεταξύ των ασθενών με υψηλή ή χαμηλή έκφραση miRs και τις κλινικές/ εργαστηριακές παραμέτρους. Τα επίπεδα της ΜΜΡ2 βρέθηκαν να είναι μειωμένα στους ασθενείς σε σύγκριση με τα δείγματα ελέγχου. Τα αποτελέσματα αποκάλυψαν miRs τα οποία εμφάνισαν διαφορετική έκφραση στα δείγματα ενδαρτηρεκτομής από ασθενείς με συμπτωματική καρωτιδική νόσο, υποδηλώνοντας ότι τα εν λόγω miRs σχετίζονται με αγγειακή φλεγμονή. Περαιτέρω, το miR21 φαίνεται να αποτελεί έναν ελκυστικό φαρμακευτικό στόχο δεδομένου ότι με τη στόχευση του ΜΜΡ2 μπορεί να ευνοηθεί μια σταθερή πλάκα αφού τα χαμηλά επίπεδα της πρωτεΐνης ΜΜΡ2 εμποδίζουν το ινώδες κάλυμμα του αθηρώματος από τη λέπτυνση. Συνεπώς, το miR21 φαίνεται να αποτρέπει τη ρήξη, αλλά απαιτείται περαιτέρω έρευνα.