Μέτρηση των κυτταροκινών IFNγ, IL-2, IL-4, IL-5 και αξιολόγησή τους σε παιδιά με έκζεμα, ρινίτιδα και άσθμα

Abstract

Introduction : Atopic Dermatitis is a chronic inflammatory disorder of the skin,which is associated with a TH2 skewed cytokine profile, usually elevated total serumIgE and can be combined with other atopic manifestations such as allergic bronchialasthma, allergic rhinitis, food allergy and eosiniphilic gastroenteropathy. The atopicskin is prone to bacterial colonization primarily with Staph. aureus and that can has aneffect in many immunological parameters. In the concept of immune disregulation,Atopic dermatitis has been correlated with IgG hypoglobulinaemia, low serum IgA anddownregulation of the CD8 lymphocytes in the peripheral blood.Scope: The aim of this study was the evaluation of TH1 and TH2 cytokines production(either intracellular or in serum) by CD3 T lymphocytes in children with AtopicDermatitis irrespectively of the co presence of other atopic diseases and their correlationwith other immunological parameters in the serum and the peripheral blood, regarding innateand adaptive immunity. Secondly, we aimed to evaluate the impact of the epidemiologicalcharacteristics of the patients, i.e. age, gender, bacterial skin colonization, diseaseseverity in correlation with the above mentioned immunological values.Patients- Methods : Peripheral blood samples were collected from children suffering from Atopic Dermatitis plus or minus the presence of other atopic manifestationslike bronchial asthma, allergic rhinitis or eosinophilic gastroenteropathy. Finally,37 children were enrolled in the study : 26 boys (70%) and 11 girls (30%), agedfrom 3 months- 16 years old (mean age=18months ). 17 of them (46%) were≤ 1 yearold, 13 (35%) were1-4 years old, and 7 (19%) were ≥ 5 years old. The percentage ofCD3 T cells expressing IL-2, IL-4, IFNγ and IL-5 was assessed upon phorbol 12-myrisate 13 acetate/ionomycin stimulation, in the presence of monensin by flow cytometry.The percentage of surface markers expression in main B and T cells subsetswas also assessed by flow cytometry. We simultaneously determined the concentrationof serum Immunoglobulins and IgG subclasses, as total serum IgE and RASTs aswell as serum concentrations of the above mentioned cytokines.Results: We noticed that the percentage of intracellular IL-5 expression wasanalogous to the atopy bargain of each patient, but also to the percentage of CD8 cytotoxiccells in the peripheral blood. Concerning the severity of the Atopic Dermatitis,this seemed to be inversely correlated to the clinical coexpression of other atopic diseases and directly to the small age the male gender and the bacterial skin infection. The serum cytokines didn’t seem to have similar correlations with their intracellularcounterparts. The total amount of IgE was above normal age limits in the most of ourpatients and had no relation with disease severity. There was also a significant correlationbetween intracellular IFNγ production and the female gender. The percentage ofintracellular expression of IFNγ and IL-5 by the stimulated T lymphocytes was positivelycorrelated with age.Synopsis : The TH2 mediated immune response seems to be pivotal in thepathogenesis of Atopic Dermatitis. There are though many other factors that affect theimmune response, like the gender, the age, the concomitant expression of other atopicphenotype or the bacterial coinfection. The TH1/TH2 concept seems to be intenselyaffected by the role of cytokine IL-5, which plays an important role to the disease dysregulationand the propensity to skin infections.

Εισαγωγή : Η Ατοπική Δερματίτιδα είναι μία χρόνια φλεγμονώδης νόσος τουδέρματος και η οποία σχετίζεται με ΤΗ2 κυτταρική ανοσιακή απάντηση, συχνά αυξη-μένη ολική IgE ορού και δυνατότητα ταυτόχρονης εκδήλωσης άλλων ατοπικών φαινο-τύπων, όπως βρογχικό άσθμα,αλλεργική ρινίτιδα και ηωσινοφιλική νόσο του πεπτι-κού. Το ατοπικό δέρμα είναι επιρρεπές στον αποικισμό κυρίως από StaphylococcusAureus, κάτι που μπορεί να έχει αντίκτυπο στην ανοσολογική απάντηση. Στα πλαίσιατης ανοσολογικής δυσλειτουργίας, η Ατοπική Δερματίτιδα έχει συσχετισθεί συχνά μευπογαμμασφαιριναιμία, χαμηλή IgA ορού καθώς και μειωμένο ποσοστό CD8 λεμφο-κυττάρων στο περιφερικό αίμα.Σκοπός : Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν η αξιολόγηση των ενδοκυττα-ρίων ΤΗ1 και ΤΗ2 κυτταροκινών που εκκρίνονταν από τα CD3 Τ λεμφοκύτταρα παι-διών με Ατοπική Δερματίτιδα με ή χωρίς την εκδήλωση άλλων ατοπικών νοσημάτωνκαι η συσχέτισή τους με ανοσολογικές παραμέτρους στον ορό και το περιφερικό αί-μα.Δευτερευόντως η μελέτη αυτή αποσκοπούσε στην διερεύνηση της επίδρασης επι-δημιολογικών χαρακτηριστικών των ασθενών όπως το φύλο, η ηλικία, η βακτηριακήεπιμόλυνση του δέρματος και η βαρύτητα της νόσου στις προαναφερθείσες ανοσολο-γικές παραμέτρους.Υλικό-Μέθοδοι : Μελετήθηκαν 37 παιδιά, 26 αγόρια (70%) και 11 κορίτσια(30%), ηλικίας από 3 μηνών έως 16 ετών. (διάμεση ηλικία =18 μήνες). Από αυτά, τα17 παιδιά (46%) ήταν ≤ 1 έτους, τα 13 (35%) ήταν 1-4 ετών και,τέλος, τα υπόλοιπα 7(19%) ήταν ≥ 5 ετών. Όλα τα παιδιά έπασχαν από Ατοπική Δερματίτιδα με ή χωρίς τηνπαρουσία άλλων ατοπικών νοσημάτων. Μετρήθηκε το ποσοστό των CD3 T λεμφο-κυττάρων που παρήγαγαν ενδοκυττάρια IL-2, ΙFNγ, IL-4 και IL-5, μετά από διέγερσήτους με PMA και Ιονομυκίνη, παρουσία Μονενσίνης, με την μέθοδο κυτταρομετρίαςροής.Παράλληλα, εκτιμήθηκε ο βασικός ανοσοφαινότυπος των Τ και Β λεμφοκυττά-ρων καθώς και οι ανοσοσφαιρίνες στον ορό,οι υποομάδες της IgG, η ολική IgE και οιειδικές IgE (RASTs), καθώς και οι αντίστοιχες κυτταροκίνες στον ορό.Αποτελέσματα :. Η ενδοκυττάρια παραγωγή της IL-5 ήταν ανάλογη με την εκ-δήλωση και άλλων ατοπικών νοσημάτων καθώς και με το ποσοστό των CD8 κυττα-ροτοξικών λεμφοκυττάρων. Όσον αφορά την βαρύτητα της Ατοπικής Δερματίτιδας,βρέθηκε ότι συνδέεται αντίστροφα με την παρουσία και άλλων ατοπικών νοσημάτων,ενώ σχετίζεται άμεσα με την μικρή ηλικία, το άρρεν φύλο και την βακτηριακή δερματι-κή επιμόλυνση. Οι κυτταροκίνες στον ορό δεν είχαν τις ίδιες συσχετίσεις με τις αντί-στοιχες ενδοκυττάριες. Βρέθηκε μία σημαντική στατιστικά σχέση στην παραγωγή εν-δοκυττάριας IFNγ και του θήλεος φύλου.Τόσο η ενδοκυττάρια παραγωγή IFNγ και IL-5, όσο και οι συγκεντρώσεις των ανοσοσφαιρινών IgA και IgG στον ορό σχετίζοντανπαράλληλα με την ηλικία των ασθενών. Η ολική IgE ορού βρέθηκε υψηλότερη των φυ-σιολογικών για την ηλικία ορίων στην πλειονότητα των ασθενών μας ενώ δεν φάνηκενα σχετίζεται με την βαρύτητα της νόσου.