ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΚΩΝ ΠΕΡΙΟΧΩΝ ΤΗΣ Β-ΑΛΥΣΙΔΑΣ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΤΗΣ ΙΝΤΕΡΛΕΥΚΙΝΗΣ-2 ΜΕ ΤΗ ΧΡΗΣΗ ΣΥΝΘΕΤΙΚΩΝ ΠΕΠΤΙΔΙΩΝ

Abstract

THE HIGH-AFFINITY INTERLEUKIN-2 RECEPTOR (IL-2R), WHICH IS EXPRESSED ON THE SURFACE OF HUMAN ACTIVATED T-CELLS, IS CONSISTED OF AT LEAST THREE DISTINCT POLYPEPTIDE CHAINS (A, Β AND Γ). THE Β-CHAIN (IL-2RΒ) PLAYS THE PIVOTAL ROLE FOR SIGNAL TRANSDUCTION AND IL-2 MEDIATED T-CELL PROLIFERATION. THE AIM OF THIS DISSERTATION IS THE DETERMINATION OF DOMAINS FROM THE EXTRACELLULAR REGION OF IL-RΒ WHICH PARTICIPATE IN IL-2 BINDING. FROM THE HIGHLY HYDROPHILIC SEQUENCE (30-54) WE SELECTED AND SYNTHESIGED 14 PEPTIDES OF 7-25 RESIDUES ACCORDING TO THE SOLID-PHASE PEPTIDES SYNTHESIS (MERRIFIELD). THE BIOLOGICAL ACTIVITY OF THE PEPTIDES WAS EXAMINED BY PERFORMING IL-2 EQUILIBRIUM BINDING ASSAYS TO VARIOUS T-CELLS. OUR RESULTS DEMONSTRATED THAT TWO SYNTHETIC PEPTIDES IL-2RΒ(35-54) AND (30-42) ARE CAPABLE TO INTERACT WITH THE IL-2 MOLECULE AND AFFECT ITS BINDING BY DECREASING THE AFFINITY OF IL-2 FOR ITS RECEPTORS. MOREOVER, THIS INTERACTION RESULTS TO IL-2 BINDING ON MEMBRANE CHAINS WHICH ARE NO REVEALED UNDER HE USUAL EXPERIMENTAL CONDITIONS.

O ΥΠΟΔΟΧΕΑΣ ΥΨΗΛΗΣ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑΣ ΤΗΣ ΙΝΤΕΡΛΕΥΚΙΝΗΣ-2 (IL-2), Ο ΟΠΟΙΟΣ ΕΚΦΡΑΖΕΤΑΙΣΤΗΝ ΕΠΙΦΑΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΩΝ, ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ Τ-ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΕΙΝΑΙ ΕΝΑ ΠΡΩΤΕΙΝΙΚΟ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑ ΤΡΙΩΝ ΤΟΥΛΑΧΙΣΤΟΝ ΑΛΥΣΙΔΩΝ (Α, Β, Γ). Η IL-2 ΦΑΙΝΕΤΑΙ ΝΑ ΜΕΤΑΦΕΡΕΙ ΤΟ ΜΗΝΥΜΑ ΓΙΑ ΤΟΝ ΠΟΛ/ΣΜΟ ΚΑΙ ΤΗ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ Τ-ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΩΝΤΑΣ ΚΥΡΙΩΣ ΜΕ ΤΗ Β-ΑΛΥΣΙΔΑ.ΣΤΟΧΟΣ ΤΗΣ ΔΙΑΤΡΙΒΗΣ ΕΙΝΑΙ Ο ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΜΗΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΕΞΩΚΥΤΤΑΡΙΚΗΣ ΑΛΛΗΛΟΥΧΙΑΣ ΤΗΣ IL-2RΒ ΠΟΥ ΣΥΜΜΕΤΕΧΟΥΝ ΣΤΗ ΔΕΣΜΕΥΣΗ ΤΗΣ IL-2. ΑΠΟ ΤΗΝ ΥΔΡΟΦΙΛΗ ΠΕΡΙΟΧΗ (30-54) ΤΗΣ IL-2RΒ ΣΥΝΘΕΤΟΝΤΑΣ ΠΕΠΤΙΔΙΑ ΜΗΚΟΥΣ 7-25 ΑΜΙΝΟΞΕΩΝ ΣΥΜΦΩΝΑ ΜΕ ΤΗ ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΙΑ ΠΕΠΤΙΔΙΚΗΣ ΣΥΝΘΕΣΗΣ ΣΕ ΣΤΕΡΕΗ ΦΑΣΗ. ΤΑ ΠΡΟΙΟΝΤΑ ΕΛΕΓΧΟΝΤΑΙ ΩΣ ΠΡΟΣ ΤΗΝ ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΟΥΣ ΣΤΗ ΔΕΣΜΕΥΣΗ ΤΗΣIL-2 ΑΠΟ ΤΟΥΣ ΥΠΟΔΟΧΕΙΣ ΤΗΣ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΟΥΣ Τ-ΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥΣ ΠΛΗΘΥΣΜΟΥΣ. ΤΑ ΑΠΟΛΕΣΜΑΤΑ ΕΔΕΙΞΑΝ ΟΤΙ ΔΥΟ ΠΕΠΤΙΔΙΑ ΜΕ ΑΛΛΗΛΟΥΧΙΕΣ 35-54 ΚΑΙ 30-42 ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΟΥΝ ΜΕ ΤΟ ΜΟΡΙΟ ΤΗΣ IL-2 ΚΑΙ ΕΠΗΡΕΑΖΟΥΝ ΤΗ ΔΕΣΜΕΥΣΗ ΤΗΣ ΣΤΟΥΣ ΥΠΟΔΟΧΕΙΣ ΜΕΙΩΝΟΝΤΑΣ ΤΗ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑ ΤΗΣ. ΠΑΡΑΛΛΗΛΑ ΟΜΩΣ ΠΑΡΟΥΣΙΑ ΤΩΝ ΠΑΡΑΠΑΝΩ ΠΕΠΤΙΔΙΩΝ ΕΜΦΑΝΙΖΟΝΤΑΙ "ΝΕΕΣ" ΘΕΣΕΙΣ ΠΡΟΣΔΕΣΗΣ ΤΗΣ IL-2 ΣΕ ΑΛΛΑ, ΠΙΘΑΝΟΝ, ΜΟΡΙΑ ΠΟΥ ΣΥΜΜΕΤΕΧΟΥΝ ΣΤΟ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ.