ΠΕΡΑΙΤΕΡΩ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΔΡΑΣΗΣ ΤΗΣ POLY(U), POLY(C) ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗΣ ΑΠΟ ΤΙΣ ΠΡΟΝΥΜΦΕΣ 6 ΗΜΕΡΩΝ ΤΟΥ ΕΝΤΟΜΟΥ CERATITIS CAPITATA ΚΑΙ ΜΕΤΑΦΡΑΣΗ ΤΗΣ ΣΕ IN VITRO ΣΥΣΤΗΜΑ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗΣ

Abstract

THE SUBJECT OF THIS THESIS IS "STUDY OF A POLY(U), POLY(C) RIBONUCLEASE FROM THE INSECT CERATITIS CAPITATA AND THE DETECTION OF MRNA SPECIFIC FOR THIS RIBONUCLEASE IN THE IN VITRO PROTEIN-SYNTHESIS SYSTEM". RESULTS: 1. THE RIBONUCLEASE IS A CYTOPLASMIC ENZYME. 2. AL3+ AND ZN2+ INHIBIT THE ENZYME ACTIVITYAND CA2+ AND BA2+ STIMULATE THIS ACTIVITY. 3. CA2+ IS AN ION THAT EXISTS INTHE STRUCTURE OF ENZYME. 4. THE RIBONUCLEASE MOLECULE HAS S.H GROUPS. 5. THERIBONUCLEASE DEGRADES THE POLYSOMAL MRNA IN POSITIONS WHICH ARE FREE OF RIBOSOMES BUT DOES NOT DEGRADE THE RRNA WHEN IT IS PROTECTED BY THE RIBOSOMAL PROTEINS. IN ORDER TO DETECT THE MRNA WHICH PARTICIPATE IN SYNTHESIS OF POLY(U), POLY(C) RIBONUCLEASE WE PROCEEDED IN THE ANALYSIS OF PROTEIN-SYNTHESIS PRODUCTS AND THE SPECIFIC ANTIRIBONUCLEASE ANTIBODY WAS USED. PAGE ELECTROPHORESIS OF THE IMMUNOPRECIPITATION PELLET RESULTED IN THE APPEARANCE OF A 34.000 DALTONS MOLECULAR WEIGHT BAND A FACT THAT LEADS TO THE CONCLUSION THAT THE DETECTED PROTEIN IS THE POLY(U), POLY(C) RIBONUCLEASE.

Η ΔΙΑΤΡΙΒΗ ΑΥΤΗ ΕΧΕΙ ΣΑΝ ΘΕΜΑ ΤΗΝ ΜΕΛΕΤΗ ΜΙΑΣ POLY(U), POLY(C) ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗΣ ΑΠΟ ΤΙΣ ΠΡΟΝΥΜΦΕΣ ΤΟΥ ΕΝΤΟΜΟΥ CERATITIS CAPITATA ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΟΥ MRNA ΠΟΥ ΕΥΘΥΝΕΤΑΙ ΓΙΑ ΤΗΝ ΒΙΟΣΥΝΘΕΣΗ ΤΗΣ ΣΕ ΕΝΑ IN VITRO ΣΥΣΤΗΜΑ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗΣ. ΤΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΕΔΕΙΞΑΝ ΟΤΙ: Α) ΕΙΝΑΙ ΕΝΑ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΟ ΕΝΖΥΜΟ, Β) Η ΔΡΑΣΗ ΤΟΥ ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟ ZN2+ ΚΑΙ ΑL3+ ΚΑΙ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΕΙΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟ CA2+ ΚΑΙ BA2+, Γ) ΣΤΗΝ ΔΟΜΗ ΤΟΥ ΥΠΑΡΧΕΙ CA2+ ΤΟ ΟΠΟΙΟ ΕΠΙΡΡΕΑΖΕΙ ΤΗΝ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΤΟΥ, Δ) ΤΟ ΜΟΡΙΟ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΔΙΑΘΕΤΕΙ ΣΟΥΛΦΙΔΙΚΕΣ ΟΜΑΔΕΣ, Ε) Η ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗΑΠΟΙΚΟΔΟΜΕΙ ΤΟ MRNA ΟΠΟΥ ΤΟ ΒΡΙΣΚΕΙ ΓΥΜΝΟ ΑΠΟ ΡΙΒΟΣΩΜΑΤΑ ΕΝΩ ΔΕΝ ΑΠΟΙΚΟΔΟΜΕΙΤΟ RRNA ΟΤΑΝ ΠΡΟΣΤΑΤΕΥΕΤΑΙ ΑΠΟ ΡΙΒΟΣΩΜΙΚΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ. Η ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΟΥ MRNA ΤΗΣ ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗΣ ΕΓΙΝΕ ΜΕΣΩ ΤΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ ΤΩΝ ΠΡΟΙΟΝΤΩΝ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗΣ ΚΑΙ ΜΕ ΤΗΝ ΧΡΗΣΗ ΕΙΔΙΚΟΥ ΠΟΛΥΚΛΩΝΙΚΟΥ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ ΕΝΑΝΤΙ ΤΗΣ ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗΣ.ΜΕΣΑ ΣΤΟ ΜΙΓΜΑ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ-ΠΡΟΙΟΝΤΩΝ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΟΣΥΝΘΕΣΗΣ ΕΝΤΟΠΙΖΕΤΑΙ ΜΙΑ ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΜΕ ΜΟΡΙΑΚΟ ΒΑΡΟΣ 34.000 DALTONS Η ΟΠΟΙΑ ΕΙΝΑΙ ΠΙΘΑΝΟΝ Η ΡΙΒΟΝΟΥΚΛΕΑΣΗ ΤΗΣ ΟΠΟΙΑΣ ΤΙΣ ΙΔΙΟΤΗΤΕΣ ΜΕΛΕΤΗΣΑΜΕ ΑΝΩΤΕΡΩ.