Μελέτη της μοριακής έκφρασης της θυμιδιλικής συνθάσης και θυμιδιλικής φωσφορυλάσης σε ασθενείς με εξαιρέσιμο ορθοκολικό καρκίνο

Abstract

In our study we assessed the prognostic significance and predictive value of the expression patterns of, TYMS and TYMP, at mRNA and protein level in a cohort of 98 colorectal cancer patients received 5-FU-based adjuvant chemotherapy. Any association of those expression findings with age, gender, primary site, positive regional lymph nodes and tumor cell differentiation grade has also been investigated. Fifty-nine patients received adjuvant chemotherapy. In total, 5-FU/Leucovorin chemotherapy was given to 25 patients (25.5%), 18 (18.4%) patients were treated with FOLFOX and 13 patients (13.3%) received FOLFIRI. One patient was given FOLFOXIRI and another one received capecitabine monotherapy. Archival formalin-fixed, paraffin-embedded tumor specimens were retrieved from 98 patients. Protein expression patterns of TYMS and TYMP were assessed by immunohistochemistry and patterns of relative mRNA expression were evaluated by quantitative reverse transcriptase real-time PCR for TYMS and TYMP. Gene expression profiling was performed on tumor samples by using cDNA microarrays. The majority (39.8%) was on stage IIA while 30 tumors (30.6%) were on stage IIIB according to AJCC. With a median follow-up of 62.6 months (range 60.8-64.5), 15 relapses (15.3%) and 20 deaths (20.4%) were recorded. Immunohistochemical analysis revealed high protein expression levels for TYMS and of the tumors respectively, while low expression levels was found in 75.6% of the tumors for TYMP. The 3-year overall survival (OS) rate was 84.3%, while the 3-year disease-free survival (DFS) rate was 78.1%. Our results show that immunohistochemically assessed TYMS and TYMP protein expression levels as well as mRNA expression levels have no independent prognostic significance for OS and DFS in the colorectal cancer patients’ cohort studied. No statistically significant association was also found for age, gender, primary site, lymph nodes status and tumor grade correlated with TYMS and TYMP mRNA and protein expression levels (p>0.05 for all markers). The goal of identifying potential prognostic and predictive biomarkers in colorectal cancer patients is the application and incorporation of these markers in the clinical practice by offering the opportunity to individualize cancer treatment. Although there are reports from 94 several studies on the prognostic and predictive role of TS and TP, it still remains controversial and additional clinical studies are required to finally establish their relationship with clinical response and potential benefit to adjuvant 5-FU based chemotherapy.

Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνηθεί η προγνωστική και προβλεπτική σημασία της θυμιδιλικής συνθάσης (TS) και θυμιδιλικής φωσφορυλάσης (TP) σε ασθενείς με εξαιρέσιμο ορθοκολικό καρκίνο, οι οποίοι υποβλήθηκαν σε θεραπευτική χειρουργική επέμβαση και στη συνέχεια σε συμπληρωματική χημειοθεραπεία. Στη μελέτη συμπεριλήφθηκαν 98 ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο, από τους οποίους μετά την επέμβαση χορηγήθηκε χημειοθεραπεία σε 59 ασθενείς, με τα σχήματα 5-FU/LV 25,5%), FOLFOX (18,4%), FOLFIRI (13,3%) και FOLFOXIRI σε έναν ασθενή και σε έναν ακόμη μονοθεραπεία με καπεσιταμπίνη. Στους παραπάνω ασθενείς, έγινε μελέτη της μεταβολής της έκφρασης των γονιδίων TYMS και ΤΥΜΡ με ανοσοϊστοχημική εξέταση των ιστικών μικροσυστοιχιών με χρήση μονοκλωνικών αντισωμάτων καθώς και διερεύνηση της γονιδιακής έκφρασης με ποσοτική real-time PCR (QRT-PCR). Από τους 98 ασθενείς, η πλειοψηφία ήταν σταδίου IIA (39,8%) και σταδίου IIIB (30,6%) κατά AJCC και από αυτούς οι 59 έλαβαν συμπληρωματική) χημειοθεραπεία (60,2%). Μετά από παρακολούθηση 62,6 μηνών, παρατηρήθηκαν 15 περιπτώσεις υποτροπής της νόσου (15,3%) και 20 θάνατοι (20,4%), ωστόσο, σε σχέση με τους δείκτες TS και TP, δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά ως προς το διάστημα ελεύθερο νόσου (DFS) και τη συνολική επιβίωση (OS) (wald p>0,05 και για τους δύο δείκτες). Το 74,7% των ασθενών της μελέτης είχαν υψηλή έκφραση της TS και το 75,6% χαμηλή έκφραση της TP, χωρίς όμως στατιστικά σημαντική διαφορά ως προς το DFS, OS (p>0,05 και για τους δύο δείκτες), ούτε συσχέτιση με την ηλικία, το φύλο, την πρωτοπαθή εστία και τον αριθμό των διηθημένων λεμφαδένων. Η 3ετής συνολική επιβίωση ήταν 84,3% με 3ετές DFS 78,1%. Σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο, στους οποίους μετά τη θεραπευτική εκτομή χορηγήθηκε συμπληρωματική χημειοθεραπεία έχουν γίνει διάφορες μελέτες, στις οποίες συσχετίσθηκε η έκφρασης της TS και TP και της συνολικής επιβίωσης και πολλές από αυτές είχαν αντικρουόμενα αποτελέσματα, γενικότερα όμως η αυξημένη έκφραση TS συσχετίσθηκε με μικρή απάντηση στη χημειοθεραπεία και χειρότερη επιβίωση. Πολλές μελέτες κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι οι δείκτες αυτοί δεν έχουν καμία ιδιαίτερη προγνωστική αξία. Από την παρούσα μελέτη προέκυψε ότι δεν υπάρχει στατιστικά σημαντική συσχέτιση των επιπέδων mRNA και TS, TP με τη συνολική επιβίωση και το ελεύθερο νόσου διάστημα. Ο σκοπός της αναζήτησης πιθανών προγνωστικών και προβλεπτικών μοριακών δεικτών στον ορθοκολικό καρκίνο είναι η ενσωμάτωση και ευρεία χρησιμοποίησή τους στην κλινική πράξη, προσφέροντας τη δυνατότητα εξατομικευμένης-στοχευμένης θεραπείας. Αν και υπάρχουν αναφορές από μελέτες για τον πιθανό προγνωστικό και προβλεπτικό ρόλο των TS και TP, αυτός παραμένει αμφιλεγόμενος και απαιτούνται περισσότερες κλινικές μελέτες προκειμένου να αποδειχθεί συσχέτιση των δεικτών αυτών με το κλινικό αποτέλεσμα και το πιθανό όφελος από τη χορηγούμενη 5-FU χημειοθεραπεία.