Ο ρόλος των IGF(s) στην ενδομητρίωση

Abstract

Introduction: Pathogenesis of endometriosis involves immunological and growth factors that are synthesized locally in the peritoneal cavity and enhance the establishment and development of endometriotic lesions. It has been shown that IGF-I prevents apoptosis and has mitogenic action to endometrial cells. The gene of IGF-I contains 6 exons and undergoes alternative splicing to give rise to three isoforms (IGF-IEa, IGF-IEb and IGF-IEc or MGF). Aim of study: To evaluate the expression of IGF-I isoforms in eutopic and ectopic endometrium of women with endometriosis and analyze comparatively the mRNA expression in those tissue biopsies. Materials and methods: Tissue biopsies of eutopic endometrium, endometriotic lesions and endometriotic cysts were obtained from 35 women with laparoscopic findings of endometriosis. We analyzed the mRNA expression with the relative semi-quantitative PCR and the protein expression with immunohistochemistry and Western blotting. Results: We have shown for the first time, that all three IGF-I isoforms are expressed in eutopic and ectopic endometrium in mRNA and protein level. There was statistically significant reduction in the mRNA expression of all three IGF-I isoforms in endometriotic cysts compared to eutopic endometrium. In contrast, there was increased mRNA expression in endometriotic lesions but that was not statistically significant. In endometriotic lesions there was positive expression of the IGF-I and MGF protein in stroma cells and glandular epithelium, whereas in eutopic endometrium and endometriotic cysts there was positive expression only in stroma cells. Conclusion: IGF-I isoform expression correlates with the presence of active endometriotic tissue as it is documented by the increased expression in endometriotic lesions and the reduction in endometriotic cysts. As this is the first time that MGF is shown to be expressed in endometrium, further research will be needed to document the role and the molecular mechanisms of its action in endometrial cells.

Εισαγωγή: Η παθογένεια της ενδομητρίωσης περιλαμβάνει τη σύνθεση ανοσολογικών και αυξητικών παραγόντων οι οποίοι δρουν τοπικά στην περιτοναϊκή κοιλότητα και συμβάλλουν στην ανάπτυξη και εξέλιξη των ενδομητριωσικών βλαβών. Ο IGF-I έχει βρεθεί ότι αναστέλλει την κυτταρική απόπτωση και έχει μιτογόνο δράση στα ενδομητρικά κύτταρα. Το γονίδιο του IGF-I περιέχει 6 εξόνια τα οποία υφίστανται εναλλακτικό μάτισμα και καταλήγουν σε τρεις ισομορφές (IGF-IEa, IGF-IEb και IGF-IEc ή MGF). Σκοπός της μελέτης: Να εξετάσουμε την έκφραση των ισομορφών του IGF-I σε έντοπο και έκτοπο ενδομήτριο γυναικών με ενδομητρίωση και να αναλύσουμε συγκριτικά την έκφραση του mRNA στους παραπάνω ιστούς. Υλικό και μέθοδοι: Από 35 γυναίκες με λαπαροσκοπικά ευρήματα ενδομητρίωσης ελήφθησαν βιοψίες φυσιολογικού (εντόπου) ενδομητρίου, ενδομητριωσικών εστιών και ενδομητριωσικών κύστεων. Η ανάλυση της έκφρασης του mRNA έγινε με τη μέθοδο της σχετικής ημιποσοτικής PCR ενώ της έκφρασης σε πρωτεϊνικό επίπεδο με ανοσοϊστοχημεία και ανοσοαποτύπωση κατά Western. Αποτελέσματα: Δείξαμε για πρώτη φορά ότι και οι τρεις ισομορφές του IGF-I εκφράζονται στο έντοπο και έκτοπο ενδομήτριο τόσο σε πρωτεϊνικό επίπεδο όσο και σε επίπεδο mRNA. Βρήκαμε στατιστικά σημαντική μείωση στην έκφραση του mRNA και των τριών ισομορφών στις ενδομητριωσικές κύστεις συγκριτικά με το φυσιολογικό ενδομήτριο, ενώ αντίθετα στις ενδομητριωσικές εστίες η έκφραση ήταν μεν αυξημένη αλλά όχι στατιστικά σημαντική. Στις ενδομητριωσικές εστίες υπήρχε θετική έκφραση της πρωτεΐνης του IGF-I και του MGF εκτός από τα στρωματικά κύτταρα, και στο αδενικό επιθήλιο, ενώ στο φυσιολογικό ενδομήτριο και στις ενδομητριωσικές κύστεις υπήρχε θετική έκφραση μόνο στα στρωματικά κύτταρα. Συμπέρασμα: Η έκφραση του IGF-I και των ισομορφών του σχετίζεται με τη παρουσία ενεργού ιστού στην ενδομητρίωση όπως φαίνεται από την οριακά αυξημένη έκφραση στις ενδομητριωσικές εστίες και τη μειωμένη έκφραση στις ενδομητριωσικές κύστεις. Το γεγονός ότι ο MGF για πρώτη φόρα ανιχνεύεται στο ενδομήτριο θα αποτελέσει αντικείμενο έρευνας στο μέλλον προκειμένου να διαλευκανθεί ο ρόλος του και οι μηχανισμοί δράσης του στα ενδομητρικά κύτταρα.