Ανοσοφαινοτυπική μελέτη της επιθηλιακής κυτταρικής διαφοροποίησης του θύμου

Abstract

We analyzed by paraffin-section immunohistochemistry the topographical distribution of human thymic cells expressing major neural/neuroendocrine markers and neural growth factor (NGF) receptors (TrKA and p75), in combination with the expression patterns of markers of epithelial cells (cytokeratins), markers of dendritic cells (S100, CD1α, CD207, CD123, CD11c) and markers of macrophages (CD68, CD163). Additionally, since some beta-tubulin isotypes are preferentially expressed in neuronal cells, the immunotopographical distribution of thymic cells expressing β-tubulin II, III and IV was also analyzed. Thymic epithelial cells (TECs) expressed protein gene product 9.5 (PGP 9.5), chromogranin A (CHRA), synaptophysin (SYN), neuronspecific enolase (NSE), tyrosine hydroxylase (TH), CD56, CD57, neurofilaments (NF) (140-160 kDa), NGF receptors (TrKA and p75), β-tubulin II and IV isotypes and cytokeratin 7, 8, 10, 13, 14, 18 and 19. PGP 9.5 was preferentially expressed in cortical TEC whereas SYN, CHRA, NSE, TH, CD56 and NF 140-160 kDa were preferentially expressed in medullary TECs and Hassal corpuscles. CD57 was detected in all TEC. Cytokeratin 19 was detected in all subtypes of TEC. Cytokeratins 7, 8, 13, 14, 16, 17 and 18 were detected in various subtypes of TEC whereas cytokeratins 1, 10 and 4 were detected only in Hassal corpuscles and cytokeratin 20 was undetectable in TEC. Variable levels of expression of β-tubulin II and IV were observed in all TEC subtypes whereas β-tubulin III was undetectable in TECs. Subcapsular and cortical TECs display higher expression of β-tubulin IV and lower expression of β-tubulin II in comparison to those observed in medullary TEC and Hassall corpuscles. Vimentin was detected in all TEC and Desmin in medullary TEC and Hassall corpuscles. Smooth muscle actin, GFAP, Peripherin and Basic myelin protein were undetectable in TEC.

Aναλύσαμε με ανοσοιστοχημεία την κατανομή των κυττάρων του άνθρωπινου θύμου αδένα που εκφράζουν νευρικούς/νευροενδοκρινείς δείκτες και τους υποδοχείς του αυξητικού παράγοντα νεύρων (NGF) σε συνδυασμό με την έκφραση κυτοκερατινών, την έκφραση πρωτεινών που εκφράζονται από δενδριτικά κύτταρα (S100, CD1α, CD207, CD123, CD11c) και πρωτεινών που εκφράζονται από μακροφάγα (CD68, CD163). Ο στόχος αυτής της συνδυασμένης ανοσοιστοχημικής μελέτης ήταν η ακριβής αναγνώριση και ταυτοποίηση των κυτταρικών πληθυσμών που εκφράζουν τους δείκτες νευρικής/νευροενδοκρινικής διαφοροποίησης. Επιπλέον, επειδή ορισμένοι ισότυποι της β-τουμπουλίνης εκφράζονται κυρίως σε νευρικά κύτταρα, αναλύσαμε την ανοσοτοπογραφική κατανομή των κυττάρων του θύμου που εκφράζουν β-τουμπουλίνη ΙΙ, ΙΙΙ και IV. Τα επιθηλιακά κύτταρα του θύμου (TEC) εξέφρασαν πρωτεΐνη PGP 9.5 (PGP 9.5), χρωμογρανίνη-Α (CHRA), συναπτοφυσίνη (SYN), νευροειδική ενολάση (NSE), τυροσίνη υδροξυλάση (TH), CD56, CD 57, νευροινίδια (NF) (140-160 kDa), τους υποδοχείς του NGF (TrΚA και p75), τους ισοτύπους της β-τουμπουλίνης ΙΙ και IV και τις κυτοκερατίνες 1, 4, 7, 8, 10, 13, 14, 18 και 19. Η πρωτεΐνη PGP 9.5 εκφράσθηκε κυρίως στα θυμικά επιθηλιακά κύτταρα του φλοιού ενώ οι πρωτείνες συναπτοφυσίνη, χρωμογρανίνη, νευροειδική ενολάση, τυροσινική υδροξυλάση, CD56 και νευροινίδια NF 140-160 kDa εκφράσθηκαν κυρίως στα θυμικά επιθηλιακά κύτταρα του μυελού και στα σωμάτια Hassall. Κερατίνη 19 ανιχνεύθηκε σε όλους τους υπότυπους των θυμικών επιθηλιακών κυττάρων. Κερατίνες 7, 8, 13, 14, 16, 17 και 18 ανιχνεύθηκαν σε ποικίλους υποτύπους των θυμικών επιθηλιακών κυττάρων, ενώ κερατίνες 1, 10 και 4 ανιχνεύθηκαν μόνο στα σωμάτια Hassall. Τέλος κερατίνη 20 δεν ανιχνεύθηκε στα θυμικά επιθηλιακά κύτταρα.