Μελέτη μυκήτων του στόματος σε ανοσοκατασταλμένα άτομα

Abstract

This study was designed in order to determine the oral yeast carriage related to CD4+ T cells count and viral load and their resistance rates to several antifungal drugs. For that purpose we studied C.albicans and other Candida isolated from cultures of oropharyngeal samples obtained from human immunodeficiency virus –infected and healthy persons in Thessaloniki, Greece. We examined samples from 225 HIV positive patients and 39 HIV negative patients. Isolates were thawed and sub cultured onto CHROMagar Candida. Identification was confirmed by the use of commercially available kit API 20CAUX and when needed we used API ID32C. Susceptibility testing for the antifungal drugs amphotericin B, fluconazole, intraconazole, voriconazole was performed by the E-TEST. From the 291 isolates the 284 were C.albicans (97, 6%) and the rest 2.04% from other species such as C. krusei and C. tropicalis. According to the results we conclude that: 1) Oral carriage of Candida (candidosis is the first manifestation) in HIV-positive patients is common but not significantly more common than in healthy people. 2) C. albicans is the most common Candida isolated from the oropharynx of HIV-positive patients. 3) The presence of fungi and fungal lesions in the oropharynx is a reliable index of the HIV positive status in association with the viral load and the patient’s immune system. The appearance of fungal oral lesions means an increase of the viral load and a possible decrease of the CD4+ T lymphocytes. 4) The total number of the CD4+ T lymphocytes is not the most reliable index for the prognosis of candidosis of the oropharynx and the appearance of opportunistic infections in the HAART era. 5) The viral load is in inverse ratio with the appearance of fungal lesions of the oropharynx and it is considered the most reliable and sensitive index when it comes to oropharyngeal candidiasis. 6) HAART is associated with oropharyngeal candidiasis specially in patients with viral load more than 10000 cop/ml. 7) The tolerance to antifungal drugs is still in a good level with the exception of C. krusei which needs to be treated with either Voriconazole or amphotericine B. 8) Prophylactic antifungal chemotherapy didn’t prevent the occurrence of oropharyngeal candidiasis. 9) We need to be careful in administrating antifungal drugs which belong to the group of azoles as a precaution because of the increase in resistance in these drugs but also in the prevalence of species of Candida other than C. albicans.

Ο σκοπός της μελέτης αυτής ήταν να διερευνηθεί ο επιπολασμός των μυκήτων στη στοματική κοιλότητα HIV οροθετικών ατόμων και να συσχετισθεί με παραμέτρους της νόσου. Στα πλαίσια αυτά αναζητήθηκε η ταυτοποίηση σε επίπεδο είδους, ο συσχετισμός με το ιικό φορτίο, τα CD4+ Τ λεμφοκύτταρα, τη λήψη ή όχι αντιρετροικής και HAART αγωγής, την ύπαρξη ή όχι βλαβών στη στοματική κοιλότητα και ο έλεγχος ευαισθησίας των απομονωθέντων μυκήτων σε διάφορα αντιμυκητιασικά φάρμακα. Στην παρούσα έρευνα συλλέχθηκαν 900 δείγματα από 225 HIV οροθετικά άτομα καθώς και 156 δείγματα που ελήφθησαν από 39 HIV οροαρνητικά άτομα τα οποία αποτέλεσαν την ομάδα ελέγχου. Η ταυτοποίηση των στελεχών έγινε με τα αυξανογράμματα API 20CAUX και API ID32C. Στα πλαίσια της καλύτερης και πιο τεκμηριωμένης αναγνώρισης των προς ταυτοποίηση μυκήτων, υλικό από τις καλλιέργειες στρώνονταν σε τυποποιημένα τρυβλία Petri με το εμπορικό όνομα CHROMagar Candida. Ο έλεγχος ανθεκτικότητας των μυκήτων διενεργήθηκε με τη χρήση του τυποποιημένου συστήματος ETEST. Μελετήθηκαν τέσσερα αντιμυκητιασικά φάρμακα, η ιτρακοναζόλη, η φλουκοναζόλη, η βορικοναζόλη και η αμφοτερικίνη Β. Από την τυποποίηση των 291 απομονωθέντων στελεχών μυκήτων οι 284 ανήκαν στο είδος C.albicans (97,6%) και το υπόλοιπο (2,04%) σε άλλα είδη όπως C. krusei (6 στελέχη), C. tropicalis (1 στέλεχος). Με βάση τα αποτελέσματα συνήχθησαν τα εξής συμπεράσματα: 1. Ο αποικισμός της στοματοφαρυγγικής κοιλότητας από μύκητες στα HIV οροθετικά άτομα είναι συχνός αλλά όχι σημαντικά συχνότερος από ότι στο γενικό πληθυσμό. 2. Το επικρατέστερο είδος Candida που απομονώνεται από τον στοματοφάρυγγα τόσο HIV οροθετικών ατόμων όσο και υγιών μαρτύρων είναι η C. Albicans. Στα HIV οροθετικά άτομα ακολουθούν η C. krusei και η C. Tropicalis. 3. Ο απόλυτος αριθμός των CD4+ Τ λεμφοκυττάρων δεν αποτελεί τον πλέον αξιόπιστο δείκτη για την πρόγνωση της εμφάνισης στη στοματοφαρυγγικής καντιντίασης. 4. Το ιικό φορτίο φαίνεται να σχετίζεται με την εμφάνιση μυκητιασικών βλαβών στα HIV οροθετικά άτομα με αποικισμό της στοματικής κοιλότητας από μύκητες. Το ιικό φορτίο είναι ευθέως ανάλογο της εμφάνισης μυκητιασικών βλαβών και αποτελεί τον πιο ευαίσθητο προγνωστικό παράγοντα τόσο για την εμφάνιση στοματοφαρυγγικής καντιντίασης όσο και για την πρόγνωση της εξέλιξης της HIV λοίμωξης. 5. Η εμφάνιση μυκητιασικών βλαβών υποδηλώνει αύξηση του ιικού φορτίου και πιθανή μείωση του απόλυτου αριθμού των CD4+ T λεμφοκυττάρων. 6. Η παρουσία μυκητιασικών βλαβών στην στοματική κοιλότητα αποτελεί έναν πολύ αξιόπιστο δείκτη της κατάστασης των HIV οροθετικών ατόμων τόσο από την άποψη του ιικού φορτίου όσο και της ανοσιακής του κατάστασης. 7. Η ευαισθησία στα αντιμυκητιασικά φάρμακα βρίσκεται σε ικανοποιητικά επίπεδα, αν και θα πρέπει να σημειωθεί ότι για την αντιμετώπιση της C. krusei αποτελεσματικά είναι μόνο η αμφοτερικίνη Β και η βορικοναζόλη. 8. Η προληπτική αντιμυκητιασική αγωγή δεν απέτρεψε την εμφάνιση μυκητιασικών λοιμώξεων, όπως η ερυθηματώδης και η ψευδομεμβρανώδης στοματομυκητίαση. 9. Χρειάζεται προσοχή στην προληπτική αγωγή με τα αντιμυκητιασικά φάρμακα που ανήκουν στην κατηγορία των αζολών, διότι η συχνή χρήση τους έχει ως αποτέλεσμα την αύξηση της ανθεκτικότητας των στελεχών της Candida και την εμφάνιση αποικισμού των HIV οροθετικών ατόμων με άλλα στελέχη της Candida εκτός της C. albicans. 10. Η HAART αγωγή φαίνεται να αποτρέπει την εμφάνιση μυκητιασικών βλαβών στη στοματική κοιλότητα στα HIV οροθετικά άτομα με υψηλές τιμές ιικού φορτίου (>10.000 αντίγραφα/ml).