Παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων για λεμφοκυτταρικά αντίγονα.: φαινοτυπικός, βιοχημικός και λειτουργικός χαρακτηρισμός του ΔΙΚ17 αντιγόνου.

Abstract

ΥΒΡΙΔΟΠΟΙΗΣΗ ΣΠΛΗΝΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΠΟΝΤΙΚΙΩΝ ΤΗΣ ΣΕΙΡΑΣ BALBIC ,ΠΟΥ ΑΠΑΝΤΗΣΑΝ ΘΕΤΙΚΑ ΣΤΟ ΑΝΟΣΟΓΟΝΟ(ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΑ ΑΝΘΡΩΠΙΝΑ ΘΥΜΟΚΥΤΤΑΡΑ),ΜΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΜΥΕΛΩΜΑΤΟΣ ΤΗΣ ΣΕΙΡΑΣ SP2/0/AG14 ΟΔΗΓΗΣΕ ΣΤΗΝ ΠΑΤΑΓΩΓΗ 18 ΚΛΩΝΩΝ, ΕΚ ΤΩΝ ΟΠΟΙΩΝ 4 ΗΤΑΝ ΕΝΑΝΤΙΟΝ ΓΝΩΣΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΙΚΩΝ ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ(CD1,CD3,CD8,HLA CLASSI) ΚΑΙ 14 ΕΝΑΝΤΙΟΝ ΑΓΝΩΣΤΩΝ ΕΠΙΤΟΠΩΝ.ΜΕΤΑΞΥ ΤΩΝ ΑΓΝΩΣΤΩΝ ΗΤΑΝ ΚΑΙ ΤΟ ΔΙΚ17, ΠΟΥ ΕΠΙΛΕΧΘΗΚΕ ΓΙΑ ΠΕΡΑΙΤΕΡΩ ΜΕΛΕΤΗ.ΕΙΝΑΙ ΕΝΑ ΜΟΡΙΟ 44KD(WESTERN BLOT-ΜΗ ΑΝΑΓΩΓΙΚΕΣ ΣΥΝΘΗΚΕΣ) ΠΟΥ ΕΚΦΡΑΖΕΤΑΙ ΣΤΟ 32% ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΤΗΣ ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑΣ ΤΟΥ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΟΥ ΠΛΗΘΥΣΜΟΥ ΚΑΙ ΕΜΦΑΝΙΣΗ ΣΤΑ Τ(ΒΟΗΘΗΤΙΚΑ-ΚΥΤΤΑΡΟΤΟΞΙΚΑ/ΚΑΤΑΣΤΑΛΤΙΚΑ) ΚΑΙ Β ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΑ ,ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΤΑ ΝΚ, ΤΟΣΟ ΣΤΙΣ ΑΝΩΡΙΜΕΣ, ΩΡΙΜΕΣ Ή /ΚΑΙ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΜΕΝΕΣ ΜΟΡΦΕΣ ΤΟΥΣ.Ο Τ+ΔΙΚ17+ ΑΠΑΝΤΑ ΣΑΦΩΣ ΛΙΓΟΤΕΡΟ ΣΤΟ ΦΟΡΒΟΛΙΚΟ ΕΣΤΕΡΑ, ΣΕ ΣΧΕΗ ΜΕ ΤΟΥ Τ+ΔΙΚ17- ΥΠΟΠΛΗΘΥΣΜΟ ΚΑΙ ΠΑΡΕΧΕΙ ΚΑΛΥΤΕΡΗ ΒΟΗΘΕΙΑ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΠΑΡΑΓΩΓΗ 1GΜ ΑΠΟ ΤΑ Β ΚΥΤΤΑΡΑ, ΠΑΡΟΥΣΙΑ PWM.ΤΟ ΔΕΣΜΕΥΜΕΝΟ ΣΕ ΣΤΕΡΕΑ ΦΑΣΗ ΜΟΝΟΚΛΩΝΙΚΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ ΑΔΙΚ17 ΚΑΙ Η ΔΙΑΛΥΤΗ ΤΟΥ ΜΟΡΦΗ ΕΠΗΡΕΑΖΟΥΝ ΤΗ ΣΥΝΘΕΣΗ DNA ΠΑΡΟΥΣΙΑ ΤΡΑ ΚΑΙ ΚΑΤΑ ΤΗ ΜΙΚΤΗ ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ.ΧΑΜΗΛΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΤΩΝ ΔΙΚ17+ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΣΥΝΔΕΟΝΤΑΙ ΜΕ ΑΡΧΙΚΑ ΣΤΑΔΙΑ ΚΑΚΟΗΘΕΙΑΣ ΚΑΙ ΚΑΛΗ ΠΡΟΓΝΩΣΗ ,ΕΝΩ ΥΨΗΛΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΔΙΚ17+ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΜΕ ΠΡΟΧΩΡΗΜΕΝΟ ΣΤΑΔΙΟ ΚΑΙ ΚΑΚΗ ΠΡΟΓΝΩΣΗ.

18 MONOCLONAL ANTIBODIES WERE PRODUCED AFTER FUSING SP2/0/AG14 MYELOMA WITH SPLEEN CELLS OF BALB/C MOUSE IMMUNISED WITH NORMAL THYMOCYTES.4 OF THESE ANTIBODIES DETERMINE ALREADY KNOWN CELLULAR ANTIGENS, WHEREAS 14 OF THEM RECOGNIZE UNKNOWN EPITOPES.ΔΙΚ17 WAS ONE OF THE MOLECULES DETECTED AND IT WAS THE ONE THAT WAS FURTHER STUDIED FOR ITS PHENOTYPICAL, BIOCHEMICAL AND FUNCTIONAL PROPERTIES AΔΙΚ17 RECOGNIZES A 44KD CELL SURFACE PROTEIN EXPRESSED ON HUMAN CD4+ AND CD8+ SUBPOPULATIONS OF T,B AND NK CELLS.THE ANTIGEN IS EXPRESSED IN THE EARLY, INTERMEDIATE AND LATE STAGES OF DIFFERENTIATION OF LYMPHOCYTES.POSSIBILITY OF STRUCTUAL ASSOCIATION OF ΔΙΚ17 ANTIGEN WITH CD38 MOLECULE WAS DETECTED.T+ΔΙΚ17+ SUBPOPULATION RESPONDED POORLY TO TPA STIMULATION AND IT PROVIDED BETTER HELPER SIGUAL FOR PWM-INDUCED 1GM SYNTHESIS,THAN THE T+ΔΙΚ17- SUBSET.PRESENCE OF Α ΔΙΚ17(SOLUBLE OR BOUND) WAS FOUND TO AFTER THE TPA INDUCED PROLIFERATIVE RESPONSE OF PBL AND ORDBLOOD CELLS AND ALSO THE RESPONSES DURING THE MIXED LYMPHOCYTE REACTION.LOW PERCENTAGE OF ΔΙΚ17+CELLS WAS RELATED WITH THE OUSET OF BREAST CANCER AND GOOD PROGNOSIS, WHEREAS HIGH PERCENTAGE OF ΔΙΚ17+CELLS WAS DETECTED IN LATE STAGES AND POOR PROGNOSIS.