ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥ ΦΑΚΕΛΟΥ ΜΕ ΤΗ ΧΡΩΜΑΤΙΝΗ: ΒΙΟΧΗΜΙΚΟΣ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΠΑΡΑΓΟΝΤΩΝ ΠΟΥ ΣΥΝΔΕΟΥΝ ΤΗΝ ΕΣΩ ΠΥΡΗΝΙΚΗ ΜΕΜΒΡΑΝΗ ΜΕ ΤΗ ΧΡΩΜΑΤΙΝΗ

Abstract

MORPHOLOGICAL STUDIES HAVE ESTABLISHED A CLOSE ASSOCIATION OF PERIPHERAL HETEROCHROMATIN WITH THE NUCLEAR ENVELOPE, WHICH HAS BEEN ATTRIBUTED BOTH TO NUCLEAR LAMIN AND LAMIN - ASSOCIATED PROTEINS. IT REMAINS TO BE DETERMINED WHICH OF THESE ELEMENTS ARE ESSENTIAL AND WHICH PLAY AN AUXILIARY ROLE IN NUCLEAR ENVELOPE - CHROMATIN INTERACTIONS. TO ADDRESS THIS QUESTION, WE USED IN VITRO RECONSTITUTED VESICLES ASSEMBLED FROM OCTYL GLUCOSIDE SOLUBILIZED NUCLEARENVELOPES AS A MODEL SYSTEM. COMPARISON OF THE CHROMOSOME - BINDING PROPERTIES OF NORMAL, IMMUNODEPLETED AND CHEMICALLY EXTRACTED VESICLES LED TO THE CONCLUSION THAT THE PRINCIPAL CHROMATIN ANCHORAGE SITE AT THE NUCLEAR ENVELOPE ISLBR, A UBIQUITOUS INTEGRAL PROTEIN OF THE INNER NUCLEAR MEMBRANE. CONSISTENTWITH THIS INTERPRETATION, PURIFIED LBR BINDS DIRECTLY TO CHROMATIN FRAGMENTSAND DECORATES THE SURFACE OF CHROMOSOMES IN A PATTERN HIGHLY REMINISCENT OF Q - BANDING.

ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΚΕΣ ΜΕΛΕΤΕΣ ΔΕΙΧΝΟΥΝ ΜΙΑ ΣΤΕΝΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΠΕΡΙΦΕΡΙΚΗΣ ΕΤΕΡΟΧΡΩΜΑΤΙΝΗΣ ΜΕ ΤΟΝ ΠΥΡΗΝΙΚΟ ΦΑΚΕΛΟ, Η ΟΠΟΙΑ ΑΠΟΔΙΔΟΤΑΝ ΩΣ ΤΩΡΑ ΤΟΣΟ ΣΤΙΣ ΠΥΡΗΝΙΚΕΣ ΛΑΜΙΝΕΣ ΟΣΟ ΚΑΙ ΣΕ ΔΙΑΜΕΜΒΡΑΝΙΚΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ, ΥΠΟΔΟΧΕΙΣ ΤΩΝ ΛΑΜΙΝΩΝ. ΑΠΟΜΕΝΕΙ ΝΑ ΚΑΘΟΡΙΣΤΕΙ ΠΟΙΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΕΙΝΑΙ ΟΝΤΩΣ ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΕΣ ΚΑΙ ΠΟΙΕΣ ΠΑΙΖΟΥΝ ΑΠΛΩΣ ΒΟΗΘΗΤΙΚΟ ΡΟΛΟ ΣΤΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥ ΦΑΚΕΛΟΥ ΜΕ ΤΗ ΧΡΩΜΑΤΙΝΗ. ΓΙΑ ΝΑ ΑΠΑΝΤΗΣΟΥΜΕΑΥΤΟ ΤΟ ΕΡΩΤΗΜΑ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΑΜΕ ΕΠΑΝΑΣΧΗΜΑΤΙΣΜΕΝΑ ΚΥΣΤΙΔΙΑ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΕΝΑ ΑΠΟ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥΣ ΦΑΚΕΛΟΥΣ, ΠΟΥ ΕΙΧΑΝ ΔΙΑΛΥΤΟΠΟΙΗΘΕΙ ΜΕ ΟΚΤΥΛΓΛΥΚΟΖΙΔΙΟ. ΣΥΓΚΡΙΣΗ ΤΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΣΥΝΔΕΣΗΣ "ΑΚΕΡΑΙΩΝ" ΚΥΣΤΙΔΙΩΝ, ΚΥΣΤΙΔΙΩΝ ΑΠΟ ΤΑ ΟΠΟΙΑ ΕΙΧΑΝ ΑΝΟΣΟΑΦΑΙΡΕΘΕΙ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΚΑΙ ΧΗΜΙΚΑ ΕΚΧΥΛΙΣΜΕΝΩΝ ΜΕΜΒΡΑΝΩΝ ΟΔΗΓΗΣΕ ΣΤΟ ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ ΟΤΙ Ο ΠΥΡΗΝΙΚΟΣ ΣΥΝΔΕΕΤΑΙ ΜΕ ΤΗ ΧΡΩΜΑΤΙΝΗ ΜΕΣΩ ΤΟΥ LBR (LAMIN B RECEPTOR), ΜΙΑΣ ΔΙΑΜΕΜΒΡΑΝΙΚΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΗΣ ΤΗΣ ΕΣΩ ΠΥΡΗΝΙΚΗΣ ΜΕΜΒΡΑΝΗΣ. ΑΠΟΜΟΝΩΜΕΝΟΣ LBR ΣΥΝΔΕΕΤΑΙ ΑΜΕΣΑ ΜΕ ΚΟΜΜΑΤΙΑ ΧΡΩΜΑΤΙΝΗΣ, ΤΑ ΟΠΟΙΑ ΔΙΑΚΟΣΜΕΙ ΚΑΤΑΤΡΟΠΟ ΠΟΥ ΘΥΜΙΖΕΙ ΖΩΝΕΣ Q.