ΣΧΕΣΕΙΣ ΚΑΙ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΤΟΥ ΑΥΞΗΤΙΚΟΥ ΠΑΡΑΓΟΝΤΟΣ ΑΠΟ ΑΙΜΟΠΕΤΑΛΙΑ (PDGF) ΚΑΙΤΟΥ ΜΕΤΑΣΧΗΜΑΤΙΖΟΝΤΟΣ ΑΥΞΗΤΙΚΟΥ ΠΑΡΑΓΟΝΤΟΣ-Β (TGF-B) ΣΤΟΝ ΠΟΛΛ...

Abstract

ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ ΟΙ ΣΧΕΣΕΙΣ ΚΑΙ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΤΟΥ PDGF ΚΑΙ ΤΟΥ TGF-Β ΣΤΟΝ ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟ ΤΩΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΩΝ ΙΝΟΒΛΑΣΤΩΝ. ΣΕ ΕΝΑ ΟΜΟΛΟΓΟ ΚΥΤΤΑΡΙΚΟ ΣΥΣΤΗΜΑ, ΠΟΥ ΜΙΜΕΙΤΑΙ ΤΙΣ ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΤΗΣ ΕΠΟΥΛΩΣΗΣ ΤΗΣ ΑΝΘΡΩΠΙΝΗΣ ΠΛΗΓΗΣ, ΔΕΙΧΘΗΚΕ ΟΤΙ Ο TGF-Β ΕΙΝΑΙ ΙΣΧΥΡΟ ΜΙΤΟΓΟΝΟ ΓΙΑ ΤΙΣ ΑΡΑΙΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ. Η ΔΡΑΣΗ ΤΟΥ TGF-Β ΕΞΑΡΤΑΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΠΥΚΝΟΤΗΤΑ ΣΕ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ ΕΝΔΙΑΜΕΣΗΣ ΠΥΚΝΟΤΗΤΑΣ ΔΕΝ ΔΡΑ, ΕΝΩ ΣΕ ΠΥΚΝΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΙ ΤΗΝ ΣΥΝΘΕΣΗ DNA. ΑΝΤΙΘΕΤΑ, Ο PDGF ΕΙΝΑΙ ΙΣΧΥΡΟ ΜΙΤΟΓΟΝΟ, ΑΝΕΞΑΡΤΗΤΩΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗΣ ΠΥΚΝΟΤΗΤΑΣ. ΟΙ ΔΥΟ ΠΑΡΑΓΟΝΤΕΣ ΔΡΟΥΝ ΣΥΝΕΡΓΙΣΤΙΚΑ Η ΑΛΛΗΛΟΕΝΙΣΧΥΟΝΤΑΙ ΣΤΙΣ ΑΡΑΙΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ, ΕΝΩ ΣΤΙΣ ΠΥΚΝΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ, Ο TGF-Β ΑΝΑΣΤΕΛΛΕΙ ΤΗΝ ΔΡΑΣΗ ΤΟΥ PDGF. Η ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΠΡΟΣΔΕΣΗΣ ΤΟΥ 125 1-PDGF-BB ΣΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ ΕΚΦΡΑΖΟΝΤΑΙ ΠΕΡΙΠΟΥ 2Χ10 5 ΥΠΟΔΟΧΕΙΣ ΤΟΥ PDGF ΑΝΑΚΥΤΤΑΡΟ, 20% ΤΩΝ ΟΠΟΙΩΝ ΕΙΝΑΙ ΤΥΠΟΥ Α. ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΔΙΑΡΚΕΙΑ ΤΗΣ IN VITRO ΗΛΙΚΙΩΣΗΣ Ο ΑΡΙΘΜΟΣ ΤΩΝ ΥΠΟΔΟΧΕΩΝ ΑΥΞΑΝΕΤΑΙ, ΧΩΡΙΣ ΜΕΤΑΒΟΛΗ ΤΗΣ KD. ΠΑΡΟΜΟΙΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΑΝ ΚΑΙ ΚΑΤΑ ΤΟΝ ΕΦΗΣΥΧΑΣΜΟ ΤΩΝ ΙΝΟΒΛΑΣΤΩΝ. ΜΕΤΑ ΤΗΝ ΜΕΙΟΡΡΥΘΜΙΣΗ ΤΩΝ ΥΠΟΔΟΧΕΩΝ ΤΟΥ PDGF, ΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΔΕΝ ΑΠΟΚΑΘΙΣΤΟΥΝ ΤΗΝ ΠΡΟΣΔΕΣΗ ΤΟΥ PDGF, ΟΥΤΕ ΜΕΤΑ ΑΠΟ 72 ΩΡΕΣ. Η ΑΠΟΚΑΤΑΣΤΑΣΗ ΕΠΑΓΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟΝ TGF-Β ΚΑΙ, ΣΤΑ ΓΗΡΑΙΑ ΚΥΤΤΑΡΑ, ΠΟΥ ΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΜΕΓΑΛΥΤΕΡΗ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΑΠΟΚΑΤΑΣΤΑΣΗΣ, ΕΙΝΑΙ ΠΛΗΡΗΣ ΜΕΤΑ ΑΠΟ 24 ΩΡΕΣ. Η ΠΡΟΣΔΕΣΗ ΤΟΥ PDGF ΕΠΗΡΕΑΖΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΠΡΟΕΠΩΑΣΗ ΜΕ TGF-Β, ΜΕ ΤΡΟΠΟ ΠΟΥ ΕΞΑΡΤΑΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟΝ ΧΡΟΝΟ: ΜΕΙΩΝΕΤΑΙ ΚΑΤΑ 30-40% ΜΕΤΑ ΑΠΟ 12 ΩΡΕΣ ΚΑΙ ΕΠΑΝΕΡΧΕΤΑΙ ΣΤΑΔΙΑΚΑ ΣΤΑ ΑΡΧΙΚΑ ΕΠΙΠΕΔΑ, ΤΑ ΟΠΟΙΑ ΚΑΙ ΥΠΕΡΒΑΙΝΕΙ, ΜΕΤΑ ΤΙΣ 24 ΩΡΕΣ. (ΠΕΡΙΚΟΠΗ ΠΕΡΙΛΗΨΗΣ)

THE CONCERTED ACTION OF PLATELET-DERIVED GROWTH FACTOR (PDGF) AND TRANSFORMING GROWTH FACTOR-BETA (TGF-Β) ON THE PROLIFERATION OF HUMAN FIBROBLASTS WAS INVESTIGATED. USING A HOMOLOGOUS CELL ASSAY SYSTEM, ROUGHLY APPROXIMATING THE CONDITIONS PREVAILING IN THE HUMAN WOUND, THE ACTION OF TGF-Β WAS FOUND TO BE CELL DENSITY-DEPENDENT: IN SPARSE CULTURES TGF-Β IS MITOGENIC, IT CEASES TO ACT IN SUBCONFLUENT ONES, WHEREAS IT ACTS AS A GROWTH INHIBITOR AT CONFLUENCY. TGF-Β ACTS IN SYNERGISM WITH OR ENHANCES PDGF AT SPARCITY, WHEREAS IT INHIBITS THE MITOGENIC ACTION OF THE LATTER AT CONFLUENCY. THE BINDING STUDIES OF 125 1-PDGF-BB REVEALED THAT THE CELLS POSSESS 2X10 5 PDGF RECEPTORS/CELL, 20% OF WHICH ARE OF THE TYPE A. THE NUMBER OF PDGF RECEPTORS INCREASED BY 40% IN AGED CELLS, WITH NO CHANGE IN KD. SIMILAR RESULTS WERE OBSERVED DURING PROLONGED QUIESCENCE OF THE CULTURE. PREINCUBATION OF TGF-Β WITH THE FIBROBLASTS FOR UP TO 12 HOURS, TRANSIENTLY REDUCES THE SUBSEQUENT PDGF BINDING BY 30-40%. HOWEVER, PROLONGED PREINCUBATION, RESTORES PDGF BINDING TO LEVELS HIGHER THAN THAT OF THE CONTROL, SUGGESTING A MODEL FOR TGF-Β ACTION IN HUMAN EMBRYONIC FIBROBLASTS. TGF-Β SIGNIFICANTLY INDUCES RESTORATION OF PDGF RECEPTORS AFTER THEIR DOWN-REGULATION. HOWEVER, WHEREAS YOUNG CELLS CANNOT FULLY RESTORE THEIR RECEPTORS, EVEN IN THE PRESENCE OF TGF-Β AT 48 HOURS, AGED CELLS ACHIEVE A COMPLETE RECOVERY WITHIN 24 HOURS IN THE PRESENCE OF TGF-Β. (ABSTRACT TRUNCATED)