Μελέτη αλλοανοσοποίησης ασθενών από μετάγγιση και κύηση

Abstract

Red blood cell (RBC) alloantibody titration is a quasi-quantitative method to assess antibody concentration and is considered a useful means of estimating maternal alloimmunization during pregnancy. Traditionally titration is performed using conventional tube test (CTT). Gel microcolumn agglutination based method (GMA) has been proven reliable for many immunohematology tests. Our study compared CTT with GMA of two different commercial available GMA systems for RBC alloantibody titration. Serum samples with significant RBC-alloantibodies, were evaluated in our study. Each sample was titrated concurrently with CTT, with ID-DiaMed-GmbH, Cressier, Switzerland (GMA1) and with DG Gel Coombs Diagnostic Grifols, Passeig Fluvial, Spain (GMA2). One hundred thirty seven titrations tests concerning 50 anti-D, 25 anti-Kell, 10 anti-E, 9 anti-Jka, 8 anti-c, 5 anti-Cw, 5 anti-Fya, 7 anti-M, 6 anti-Kpa, 3 anti-Lua, 1 anti-e, 3 anti-G, and 2 anti-Cha were performed and evaluated. Samples tested by CTT versus GMA1 and GMA2 generated mostly equal or higher titers by GMAs. The results of both comparisons were in good agreement (W=0.91, p<0.0001, and W=0.92, p<0.0001 respectively). For all antibodies specificities the mean absolute difference in titers ranged from 1-3 for both GMA1 and GMA2 versus CTT. Samples tested by GMA1 vs GMA2 were in almost perfect agreement (W=0.95, p<0.0001). Conclusion: Although both GMAs were found slightly more sensitive than CTT for alloantibody titration, the differences were not significant and the agreement between all methods was very good, possibly indicating GMA as a suitable alternative to CTT in RBC antibody titration.

Τα αντιερυθροκυτταρικά αντισώματα παράγονται μετά από ευαισθητοποίηση έναντι των αντίστοιχων ερυθροκυτταρικών αντιγόνων συνήθως μέσω μετάγγισης ή κύησης. Η τιτλοποίηση των ερυθροκυτταρικών αντισωμάτων είναι μια ημι- ποσοτική μέθοδος για την αξιολόγηση της συγκέντρωσής τους και θεωρείται χρήσιμο μέσο εκτίμησης της αλλοανοσοποίησης της μητέρας κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Παραδοσιακά, η τιτλοποίηση πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας την κλασική μέθοδο σωληναρίου (Conventional Tube Test- CTT). Η μέθοδος που βασίζεται στη συγκόλληση με χρήση καρτών γέλης (micro column agglutination based method - GMA) έχει αποδειχθεί αξιόπιστη για πολλές δοκιμασίες στην ανοσοαιματολογία. Η μελέτη μας συνέκρινε τις μεθόδους CTT και GMA από δύο διαφορετικούς κατασκευαστές για τιτλοποίηση ερυθροκυτταρικών αντισωμάτων. Αξιολογήθηκαν δείγματα ορού με κλινικά σημαντικά ερυθροκυτταρικά αλλοαντισώματα. Κάθε δείγμα τιτλοποιήθηκε συγχρόνως με κλασική μέθοδο CTT, κάρτες γέλης ID-DiaMed-GmbH, Cressier, Switzerland (GMA1) και επίσης με κάρτες γέλης DG Gel Coombs Diagnostic Grifols, Passeig Fluvial, Spain (GMA2).Πραγματοποιήθηκαν και αξιολογήθηκαν 137 (εκατόν τριάντα επτά) τιτλοποιήσεις που αφορούσαν 50 αντισώματα αντι-D, 25 αντί-Kell, 10 anti-E, 9 anti-Jka, 8 anti-c, 5 αντι-Cw, 5 αντι-Fya, 7 αντι-Μ, 6 αντι-Kpa, 3 anti-Lua, 1 αντι-e, 3 αντι-G και 2 αντι-Cha. Τα δείγματα που ελέγχθηκαν με CTT σε σύγκριση με GMA1 και GMA2 εμφάνισαν στις περισσότερες περιπτώσεις ίσους ή υψηλότερους τίτλους με τη μέθοδο γέλης και των δύο κατασκευαστών. Στην σύγκριση τόσο CTT με GMA1 όσο και CTT με GMA2 υπήρξε καλή συμφωνία των αποτελεσμάτων (W = 0.91, p <0.0001 και W = 0.92, p <0.0001 αντίστοιχα). Για όλες τις ειδικότητες αντισωμάτων η μέση απόλυτη διαφορά κυμάνθηκε από 1 έως 3 τίτλους για αμφότερες τις μεθόδους γέλης (GMA1 και GMA2) έναντι της κλασικής μεθόδου CTT. Τα αποτελέσματα της τιτλοποίησης GMA1 σε σύγκριση με της GMA2 συμφωνούσαν σχεδόν απόλυτα (W = 0.95, p <0.0001). Συμπερασματικά παρόλο που η μέθοδος γέλης GMA και από τους δύο διαφορετικούς κατασκευαστές βρέθηκε να παρουσιάζει μεγαλύτερη ευαισθησία από την κλασική μέθοδο CTT στην τιτλοποίηση αλλοαντισωμάτων, οι διαφορές δεν ήταν σημαντικές και η συμφωνία μεταξύ όλων των μεθόδων ήταν πολύ καλή, υποδεικνύοντας ενδεχομένως την σύγχρονη μέθοδο γέλης GMA (με αποδεδειγμένη υψηλή ευαισθησία, ειδικότητα, επαναληψιμότητα και δυνατότητα αυτοματοποίησης) ως κατάλληλη εναλλακτική που θα μπορούσε να αντικαταστήσει την κλασική μέθοδο σωληναρίου CTT σε τιτλοποιήσεις αντιερυθροκυτταρικών αντισωμάτων.