Ταχεία ανίχνευση των στρεπτοκόκκων ομάδας Β σε επίτοκες γυναίκες με νεότερες μοριακές τεχνικές

Abstract

Introduction: Group B streptococcus (GBS) is an important cause of neonatal infections and one of the leading causes of aggressive infectious disease in neonates. Maternal colonization screening tests combined with administration of chemoprophylaxis have substantially reduced the incidence of Early Onset Disease (EOD) in neonates from GBS. However, although antimicrobial susceptibility of GBS is almost 100%, EOD incidence has reached a plateau which suggests that current screening tests have reached their efficiency limit. The last decade, a series of rapid and accurate diagnostic tests have been developed for the detection of GBS, the use of which as screening methods could eliminate EOD from GBS in neonates.Aim of the study: Aim of the study is to evaluate the prevalence of maternal GBS colonization in each trimester and compare cfbPCR results to the ones from traditional culture.Materials and methods: Vaginal and rectal samples collected from 857 pregnant (205 at 1st trimester, 200 at the 2nd trimester and 452 at the 3rd trimester) and 370 non-pregnant women were examined using traditional culture. Samples collected from the 452 pregnant women between the 35th and 37th week of gestation were also assayed by culture and PCR method targeting the cfb gene. CfbPCR sensitivity, specificity, positive and negative predictive value, were calculated using the culture as the golden standard. Statistical analysis was performed using IBM SPSS 22.0 statistical software package.Results: GBS colonization frequency was calculated at 14,3% for non-pregnant women of reproductive age, 13,7% for pregnant women at the 1st trimester, 16,5% for women at the 2nd trimester, and 18,1% for pregnant women at the 3rd trimester respectively. The measured frequencies are with accordance with large systematic European and International studies. No statistically significant difference in GBS colonization was observed between different ages and gestation trimesters. Rectal samples yielded slightly higher positive rates for the majority of the groups apart from the large group of women pregnant at the 3rd trimester. No statistically significant discrepancy was observed between results from the two sampling methods though. cfbPCR presented high sensitivity and specificity values 100% (95% CI: 95.65% -- 100.00) and 96,74 (95% CI: 94.37% -- 98.30%) respectively and consequently high positive and negative predictive value 87.23% (95% CI: 79,66% -- 92,26%) and 100% (95% CI: 100%-) respectively.Conclusions: Maternal GBS colonization during the last weeks of pregnancy as shown by large systematic European and International studies and confirmed by our results nears frequencies of 1 in 5 pregnant women. Taking in to account that GBS infection is one of the leading causes of neonatal sepsis in developed countries, the need for accurate and rapid screening methods becomes apparent. Our results suggest that cfbPCR is a rapid, highly specific and sensitive GBS colonization detection method. Due to the fact that GBS EOD incidence in neonates is relatively low (0.3 – 1/1000 births), further reduction or elimination of EOD frequencies requires an extremely consistent and accurate screening method. Our conclusion is that cfbPCR appears to exhibit the key attributes to become a worthy alternative or perhaps the next gold standard method for antepartum and intrapartum GBS colonization detection.

Εισαγωγή: Ο Στρεπτόκοκκος της ομάδας Β, αποτελεί ένα από τα σημαντικότερα παθογόνα αίτια για την πρόκληση επιθετικής λοιμώδους νόσου σε νεογνά. Οι έλεγχοι διαλογής και η χορήγηση χημειοπροφύλαξης στη μητέρα έχουν μειώσει σημαντικά τη συχνότητα εμφάνισης της νεογνικής νόσου από GBS όμως η σταθεροποίηση της επίπτωσης υποθέτει ότι οι τρέχουσες μέθοδοι έχουν φτάσει στα όρια της ακρίβειάς τους. Κατά την τελευταία δεκαετία έχουν αναπτυχθεί ταχείες διαγνωστικές μέθοδοι οι οποίες σε σύγκριση με την παραδοσιακή μέθοδο της καλλιέργειας θα μπορούσαν σε συνδυασμό με την έγκαιρη χορήγηση χημειοπροφύλαξης να εξαλείψουν τη νεογνική νόσο από GBS.Σκοπός: Σκοπός της μελέτης είναι η εκτίμηση της συχνότητας αποικισμού εγκύων γυναικών από GBS καθώς και η εκτίμηση της θετικής και αρνητικής προγνωστικής αξίας κατά την 35η – 37η εβδομάδα νεότερης τεχνικής ταχείας PCR με στόχο το γονίδιο cfb σε σχέση με την παραδοσιακή καλλιέργεια.Υλικά και μέθοδοι: Μελετήθηκαν συνολικά 1227 γυναίκες, 370 μη έγκυοι, 205 έγκυοι 1ου τριμήνου, 200 έγκυοι 2ου τριμήνου και 452 3ου τριμήνου. Για κάθε γυναίκα ελήφθησαν 2 δείγματα, ένα από το ορθό και ένα από τον κόλπο τα οποία εξετάστηκαν ξεχωριστά με τη μέθοδο της παραδοσιακής καλλιέργειας και επιβεβαιώθηκαν με δοκιμασία συγκολλητινοαντίδρασης και αυτοματοποιημένου συστήματος VITEK2. Τα δείγματα από τις 452 εγκύους 3ου τριμήνου εξετάστηκαν εκτός από την παραδοσιακή καλλιέργεια και με τη μέθοδο PCR με στόχο το γονίδιο cfb. Ο υπολογισμός των στατιστικών χαρακτηριστικών της PCR έγινε λαμβάνοντας ως ενδεδειγμένη μέθοδο εκείνη της παραδοσιακής καλλιέργειας. Τα αποτελέσματα αναλύθηκαν με τη χρήση του στατιστικού πακέτου SPSS 22.0.Αποτελέσματα: Η συχνότητα αποικισμού των εγκύων και μη γυναικών που παρατηρήθηκε στη μελέτη συμφωνεί με τις τρέχουσες συστηματικές μελέτες για τις Χώρες του Δυτικού κόσμου και υπολογίστηκε σε 14,3% για τις μη εγκύους, 13,7% για τις εγκύους 1ου τριμήνου, 16,5% για τις εγκύους 2ου τριμήνου και 18,1% για τις εγκύους 3ου τριμήνου. Μεταξύ των εγκύων δεν παρατηρήθηκε στατιστικώς σημαντική διαφορά όσον αφορά το τρίμηνο κύησης και την ηλικία. Η λήψη δείγματος από τον πρωκτό απέδωσε ελαφρώς μεγαλύτερο αριθμό θετικών αποτελεσμάτων για την πλειοψηφία των δειγμάτων που εξετάστηκαν με εξαίρεση τις γυναίκες 3ου τριμήνου, χωρίς όμως να παρουσιάζεται στατιστικώς σημαντική ασυμφωνία. Η μέθοδος cfbPCR χαρακτηρίστηκε από υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα 100% (95% CI: 95.65% -- 100.00) και 96,74 (95% CI: 94.37% -- 98.30%) με θετική προγνωστική αξία 87.23% (95% CI: 79,66% -- 92,26%) και αρνητική προγνωστική αξία 100% (95% CI: 100%-).Συμπεράσματα: Ο αποικισμός των εγκύων κατά τις τελευταίες εβδομάδες της κύησης από GBS όπως αποδεικνύεται από συστηματικές αλλά και την παρούσα μελέτη εμφανίζεται σε συχνότητες που αγγίζουν την μία στις πέντε εγκύους. Δεδομένου ότι ο GBS αποτελεί την κυριότερη αιτία νεογνικής σήψης στο Δυτικό κόσμο, είναι κρίσιμης σημασίας όλες οι επίτοκες να έχουν περάσει έναν ακριβή έλεγχο διαλογής ώστε να έχει εκτιμηθεί ο κίνδυνος μετάδοσης στο νεογνό και να χορηγηθεί έγκαιρα χημειοπροφύλαξη. Η μέθοδος της cfbPCR χαρακτηρίζεται από υψηλή διαγνωστική ακρίβεια, ταχεία λήψη και συνέπεια αποτελεσμάτων. Δεδομένου ότι η συχνότητα εμφάνισης νεογνικής νόσου κυμαίνεται σε αρκετά χαμηλά επίπεδα (0,3-1/1000 γεννήσεις), περαιτέρω μείωση της επίπτωσης απαιτεί εξαιρετικά ακριβείς, συνεπείς και ταχείες διαγνωστικές μεθόδους. Το συμπέρασμα της μελέτης είναι ότι η cfbPCR έχει τα χαρακτηριστικά να αποτελέσει είτε εναλλακτική είτε μία εκ των νεότερων μεθόδων εκλογής για την ανίχνευση του GBS στις επίτοκες γυναίκες.