Γενετικά και φαινοτυπικά χαρακτηριστικά στελεχών β-αιμολυτικού στρεπτόκοκκου της ομάδας Α από παιδιά με διεισδυτικές και μη διεισδυτικές λομώξεις

Abstract

Streptococcus pyogenes is an important human pathogen. The aims of the study were to investigate streptococcal infections in children (epidemiology, prevalence and diversity of emm-types, antibiotic susceptibility, macrolide resistant genes and pyrogenic exotoxins-SPE genes). This prospective study conducted 2007-2013, in children ≤14 years old. Identification of S.pyogenes was confirmed by standard techniques, emm typing by PCR and sequencing, and sensitivity to antibiotics by Kirby-Bauer and Etest. Macrolide resistant-genes and pyrogenic exotoxins genes detected by "multiplex" PCR. Analysis performed with SPSS, XLSTAT, x2 tests, Fisher and Pearson. A total of 1324 children (51.8% boys) were included in the study, median age 65 months. Pharyngitis occurred in 84.4%, invasive infections in 5.7% and otitis, pyoderma or vaginitis in 9.9%. Infections occurred in 67.8% of cases from November to May. Frequent were invasive infections in children ≤3 years old and pharyngeal 4-6 years old. Thirty-five different emm-types, including 15-subtypes, were identified. The most prevalent emm-types identified were 1(16.7%), 12(13.6%), 77(10.9%), 4(10.8%) and 28(10.4%). The 30-valent vaccine encompasses 97.3% of emm-types identified in the study. Classification of emm-types to emm-clusters indicated that 35 emm-types belonged to 13 emm-clusters. Antibiotic resistance found: macrolides 20.4%, clindamycin 13.8% (iMLSB 10.5%, cMLSB 3.3%), tetracycline 18.7% levofloxacin 5.4% and chloramphenicol 2.8%. Macrolide resistance genes were detected: erm(A) 50,4%, mef(A) 32.2% and erm(B) 16.3%. No correlation was observed in macrolide consumption and resistance. The speB genes or speA and speB, were often found in invasive isolates. Continuous surveillance of emm types is needed in order to evaluate the possible benefits of an M-protein-based S.pyogenes vaccine.

Ο Streptococcus pyogenes παραμένει σημαντικό παθογόνο για τον άνθρωπο. Στόχοι της μελέτης ήταν να διερευνηθούν οι στρεπτοκοκκικές λοιμώξεις στα παιδιά (επιδημιολογία, επιπολασμός και ποικιλομορφία emm-τύπων, συσχέτιση με 30-δύναμο εμβόλιο, ευαισθησία στα αντιβιοτικά, γονίδια αντοχής στις μακρολίδες και γονίδια πυρετογόνων εξωτοξινών-SPE). Πρόκειται για προοπτική μελέτη που πραγματοποιήθηκε, 2007-2013, σε παιδιά ≤14 ετών. Ταυτοποίηση του S.pyogenes έγινε με κλασικές μεθόδους, τυποποίηση emm-τύπων με PCR και αλληλούχιση και ευαισθησία στα αντιβιοτικά με Kirby-Bauer και Etest. Τα γονίδια αντοχής μακρολιδών και πυρετογόνων εξωτοξινών ανιχνεύτηκαν με “multiplex” PCR. Ανάλυση έγινε με το SPSS, XLSTAT, δοκιμασίες χ2, Fisher και Pearson. Εξετάσθηκαν 1324 παιδιά (51,8% αγόρια) με διάμεση ηλικία 65 μήνες. Φαρυγγίτιδα εμφάνισαν 84,4%, διεισδυτική λοίμωξη 5,7% και ωτίτιδα, πυοδερμία ή κολπίτιδα 9,9%. Το 67,8% των λοιμώξεων σημειώθηκε Νοέμβριο-Μάιο. Συχνές ήταν οι διεισδυτικές λοιμώξεις σε παιδιά ≤3 ετών και οι φαρυγγικές 4-6 ετών. Διαπιστώθηκαν 35 emm-τύποι και 15 υπότυποι με επικρατέστερους: 1(16,7%), 12(13,6%), 77(10,9%), 4(10,9%), και 28(10,4%). Το 97,3% των emm-τύπων περιλαμβάνονται στο 30-δύναμο εμβόλιο. Οι ρευματογόνοι emm-τύποι αποτέλεσαν το 16,3%. Οι emm-τύποι ανήκαν σε 13 emm-συμπλέγματα. Αντοχή διαπιστώθηκε: μακρολίδες 20,4%, κλινδαμυκίνη 13,8% (iMLSB10,5%, cMLSB3,3%), τετρακυκλίνη 18,7%, λεβοφλοξασίνη 5,4% και χλωραμφενικόλη 2,8%. Υπεύθυνα γονίδια αντοχής στις μακρολίδες ήταν: erm(A) 50,4%, mef(A) 32,2% και erm(B) 16,3%. Δεν παρατηρήθηκε συσχέτιση κατανάλωσης μακρολιδών και αντοχής. Τα γονίδια speB ή speA και speB, ήταν συχνά στα διεισδυτικά στελέχη. Επιτήρηση των στρεπτοκοκκικών λοιμώξεων και προσδιορισμός των emm-τύπων είναι επιβεβλημένα προκειμένου να αξιολογηθούν τα οφέλη ενός εμβολίου για τον S. pyogenes, που βασίζεται στην Μ πρωτεΐνη.