Μοριακή και βιοχημική ανάλυση του γονιδίου β-γλυκοσιδάση της ολευρωπαΐνης στην ανάπτυξη και άμυνα της ελιάς

Περίληψη

Η ολευρωπαΐνη, το επικρατέστερο σεκοϊριδοειδές στην ελιά (Olea europaea), εμπλέκεται σε ένα δυαδικό σύστημα άμυνας που αποτελείται από μια β-γλυκοσιδάση η οποία απογλυκοζυλιώνει την ολευρωπαΐνη παράγοντας ένα τοξικό άγλυκο μόριο με δομή παρόμοια με την γλουταραλδεΰδη. Παρότι ο μηχανισμός άμυνας έχει μελετηθεί αρκετά, δεν έχει χαρακτηριστεί ακόμα κάποια β-γλυκοσιδάση εξειδικευμένη για την ολευρωπαΐνη. Στην παρούσα μελέτη περιγράφεται ο μοριακός χαρακτηρισμός του cDNA του OeGLU που κωδικοποιεί για μια αμυντική β-γλυκοσιδάση εξειδικευμένη για τα τερπενοειδή. Ετερόλογη έκφραση του OeGLU σε E. coli δεν οδήγησε σε ενεργό ένζυμο αλλά μέσω in planta παροδικής έκφρασης αποδείχθηκε ότι το OeGLU μπορεί να απογλυκοζυλιώσει και να ενεργοποιήσει την ολευρωπαΐνη σε έναν μεταβολίτη με ισχυρή δυνατότητα μαζικής συμπλοκοποίησης και διασύνδεσης πρωτεϊνών. Η in silico πρόβλεψη της τριτοταγούς δομής του ενζύμου και ανάλυση μοριακής προσκόλλησης της ολευρωπαΐνης σε αυτήν έδειξε ότι το OeGLU έχει την χαρακτη ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

Oleuropein, the major secoiridoid compound in olive (Olea europaea), is involved in a sophisticated two-component defense system comprising a β-glucosidase enzyme that activates oleuropein into a toxic glutaraldehyde-like structure. Although oleuropein deglycosylation studies have been monitored extensively, an oleuropein β-glucosidase gene has not been characterized as yet. In the present study is reported the molecular characterization of OeGLU cDNA from olive encoding a β-glucosidase belonging to the defence-related group of terpenoid-specific glucosidases. Heterologous expression of OeGLU in E. coli failed to produce an active enzyme but in planta recombinant protein expression assays showed that OeGLU deglycosylated and activated oleuropein into a strong protein cross-linker. Homology and docking modelling predicted that OeGLU has a characteristic (β/α)8 TIM barrel conformation and a typical construction of a pocket-shaped substrate recognition domain composed of conserved amino a ...
περισσότερα
Πρέπει να είστε εγγεγραμένος χρήστης για έχετε πρόσβαση σε όλες τις υπηρεσίες του ΕΑΔΔ  Είσοδος /Εγγραφή

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/39226
ND
39226
Εναλλακτικός τίτλος
Molecular and biochemical analysis of the oleuropein β-glucosidase gene during the development and defense of olive
Συγγραφέας
Κουδουνάς, Κωνσταντίνος Άγγελος
Ημερομηνία
2016
Ίδρυμα
Γεωπονικό Πανεπιστήμιο Αθηνών. Τμήμα Βιοτεχνολογίας. Εργαστήριο Μοριακής Βιολογίας
Εξεταστική επιτροπή
Χατζόπουλος Πολυδεύκης
Κοτζάμπασης Κυριάκος
Κούρτη Ιωάννα
Παπαδοπούλου Καλλιόπη
Μαγιάτης Προκόπης
Μηλιώνη Δήμητρα
Ρήγας Σταμάτης
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές Επιστήμες
Βιολογικές Επιστήμες
Γεωργικές Επιστήμες
Γεωργική Βιοτεχνολογία
Λέξεις-κλειδιά
Β-ΓΛΥΚΟΣΙΔΑΣΗ; Ετερόλογη έκφραση; Ολευρωπαΐνη; Άμυνα φυτών
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
121 σ., εικ., πιν., σχημ., γραφ.