Η συμβολή της εργαστηριακής διερεύνησης βιοχημικών παραμέτρων στην επιτυχία της εξωσωματικής γονιμοποίησης

Abstract

The aim of the present thesis was to investigate the role of several biochemical parameters (Vascular Endothelial Growth Factor – V.E.G.F, Leukemia Inhibitory Factor – L.I.F, Interleukin 1β – IL 1β, Interleukin 4 - IL 4, Interleukin 10 - IL 10) in the pre-implantation phase and ovarian response, embryonic development and pregnancy outcome in women undergoing in vitro fertilization (I.V.F). Furthermore, the prognostic utility of these biomarkers regarding pregnancy outcome is explored.Fifty-three women suffering from infertility of diverse etiology and undergoing IVF at an academic tertiary hospital were recruited for a prospective study. Medical records were reviewed and information related to demographic characteristics, reproductive variables, and medical history was obtained. Anthropometric characteristics such as height and weight were measured. Furthermore, the ovarian stimulation protocol used in IVF, the administration dose of rF.S.H, the number of oocytes retrieved, the number of follicles above > 17mm in diameter, the number of good quality embryos and the pregnancy outcome were recorded. Serum concentrations of F.S.H, estradiol, total testosterone and free testosterone were measured using electrochemiluminescence (ECLIA) and cytokines V.E.G.F, L.I.F, IL – 1β, IL – 4 and IL- 10 using enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) in serum and follicular fluid.Statistical analysis of the data was performed using SPSS® version 17 for Windows.The main significant results of the study are summarized as follows: 1) A significant correlation exists between concentrations of V.E.G.F and L.I.F in serum and follicular fluid; 2) V.E.G.F and L.I.F in both follicular fluid and serum are significant predictors of pregnancy outcome, exhibiting a statistically significant negative correlation; 3) Lower circulating levels of L.I.F and elevated circulating levels of V.E.G.F may predict a higher pregnancy rate in women undergoing I.V.F. Further studies are needed to better define their potential use as biomarkers and predictors of pregnancy outcome.

Σκοπός της μελέτης ήταν η διερεύνηση, σε γυναίκες που ακολουθούν πρόγραμμα εξωσωματικής γονιμοποίησης, του ρόλου που ενδεχομένως διαδραματίζουν οι βιοχημικοί παράγοντες Αγγειακός Ενδοθηλιακός Αυξητικός Παράγοντας (V.E.G.F), Ανασταλτικός Παράγοντας της Λευχαιμίας (L.I.F), Ιντερλευκίνη 1β (IL – 1β), Ιντερλευκίνη 4 (IL – 4) και Ιντερλευκίνη 10 (IL- 10), στο περιβάλλον του γυναικείου αναπαραγωγικού συστήματος, στην προεμφυτευτική φάση και στην διαδικασία της εμφύτευσης της βλαστοκύστης, καθώς και η διερεύνηση της ενδεχόμενης δυνατότητας χρησιμοποίησης των παραγόντων αυτών ως προγνωστικών εργαστηριακών δεικτών για την επίτευξη ή μη κύησης.Το υλικό της μελέτης αποτέλεσαν 53 γυναίκες, με υπογονιμότητα ποικίλης αιτιολογίας που ακολούθησαν πρόγραμμα εξωσωματικής γονιμοποίησης.Στο σύνολο των γυναικών αυτών καταγράφηκαν με λεπτομέρεια τα στοιχεία του ιστορικού τους, τα σωματομετρικά τους χαρακτηριστικά και όλα τα στοιχεία που αφορούσαν το εφαρμοσθέν πρόγραμμα I.V.F όπως το πρωτόκολλο διέγερσης, η συνολική χορηγηθείσα δόση rF.S.H, τα ωοθυλάκια διαμέτρου > 17mm, ο αριθμός των ληφθέντων ωαρίων, ο αριθμός των γονιμοποιηθέντων ωαρίων και ο αριθμός των καλής ποιότητας εμβρύων καθώς και η θετική ή αρνητική έκβαση του προγράμματος (κύηση ή μη κύηση). Μετρήθηκαν με ηλεκτροχημειοφωταύγεια οι ορμονικοί βιοχημικοί δείκτες Θυλακιοτρόπος ορμόνη (F.S.H), Οιστραδιόλη (E2), Ολική Τεστοστερόνη (T. Testo) και Ελεύθερη Τεστοστερόνη (F.Testo) και με ανοσοενζυμική μέθοδο ( ELISA) οι κυτταροκίνες V.E.G.F, L.I.F, IL – 1β, IL – 4 και IL- 10.Η στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων της μελέτης πραγματοποιήθηκε με το στατιστικό πρόγραμμα SPSS v. 17.Τα σημαντικότερα αποτελέσματα της μελέτης έδειξαν: α) ότι υπάρχει πλήρης αντιστοιχία των συγκεντρώσεων του V.E.G.F και του L.I.F ανάμεσα στο αίμα και στο ωοθυλακικό υγρό, β) ότι ο V.E.G.F και ο L.I.F που προσδιορίζονται στο αίμα και στο ωοθυλακικό υγρό είναι προγνωστικοί εργαστηριακοί δείκτες για την επίτευξη ή μη κύησης εμφανίζοντας μεταξύ τους αρνητική συσχέτιση στατιστικά σημαντική και γ) ότι όσο χαμηλότερα είναι τα επίπεδα του L.I.F στον ορό του αίματος και ταυτόχρονα όσο υψηλότερα είναι τα επίπεδα του V.E.G.F στον ορό του αίματος τόσο αυξάνεται η πιθανότητα να επιτευχθεί τελικά κύηση στο πέρας του προγράμματος I.V.F.