Ανίχνευση του HPV DNA ως προγνωστικού παράγοντα στο περιφερικό αίμα ασθενών με καρκίνο τραχήλου της μήτρας που υποβλήθηκαν σε ακτινοθεραπεία και συσχέτιση με την πορεία της νόσου

Abstract

Purpose: The detection of the HPV DNA in peripheral blood of patients with cervical cancer from Greece and the investigation of the possibility to be used as predictive factor for disease free survival and overall survival. The method: The material of the study (samples) came from the Radiation Oncology Department and the 1st Obstetrics and Gynecology Department of Aristotle University of General Hospital Papageorgiou. The processing and the study of the samples were done in the Molecular Biology laboratory of Papageorgiou Hospital. Since December 2004 until December 2009 were received and investigated 48 samples of whole blood and plasma from the peripheral blood of patients with cervical cancer, stages Ib2 -IV. The DNA of HPV was isolated from whole blood and from plasma used PCR with a) the primer pairs MY09/MY11 located within the HPV L1 region and b) types HPV 16 and 18 specific E6 primers. In a second stage, tissue samples were collected from the cervix of 30 patients and the DNA of HPV 16 and 18 were isolated. Results: The virus was not detected in peripheral blood samples nor in the plasma and whole blood, but was detected in 75% of cervical samples. Conclusions: The detection of virus in peripheral blood is not possible, and for this reason it can not be a predictive factor.

Σκοπός: η ανίχνευση του HPV DNA στο περιφερικό αίμα ασθενών με καρκίνο του τραχήλου της μήτρας από την Ελλάδα και αφετέρου η διερεύνηση της πιθανότητας να χρησιμοποιηθεί αυτή ως προγνωστικός παράγοντας για το ελεύθερο νόσου διάστημα και για την συνολική επιβίωση των ασθενών. Μέθοδος: Το υλικό της μελέτης προήλθε από το Ακτινοθεραπευτικό τμήμα και από την Α’ Μαιευτική και Γυναικολογική κλινική του Αριστοτέλειου Πανεπιστημίου Θεσσαλονίκης στο Περιφερειακό Γενικό Νοσοκομείο Παπαγεωργίου. Η επεξεργασία των δειγμάτων έγινε στο Εργαστήριο Μοριακής Βιολογίας του Γ.Π.Ν. Παπαγεωργίου. Από τον Δεκέμβριο του 2004 έως και τον Δεκέμβριο του 2009 ελήφθησαν και μελετήθηκαν 48 δείγματα ολικού αίματος και πλάσματος από το περιφερικό αίμα ασθενών με καρκίνο του τραχήλου της μήτρας, σταδίων IB2 - IV. Έγινε απομόνωση του DNA του HPV τόσο από το ολικό αίμα όσο και από το πλάσμα με την μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης χρησιμοποιώντας τους εκκινητές α) MY09 και MY11 που στοχεύουν την L1 περιοχή του ιού και β) εκκινητές ειδικούς για τους HPV 16 και 18 που στοχεύουν την E6 περιοχή του ιού. Σε δεύτερο χρόνο έγινε συλλογή ιστολογικών δειγμάτων από τον τράχηλο 30 ασθενών και απομονώθηκε το DNA των HPV 16 και 18. Αποτελέσματα: Ο ιός δεν ανιχνεύθηκε στο περιφερικό αίμα σε κανένα δείγμα από το πλάσμα και το ολικό αίμα, αλλά ανιχνεύθηκε στο 75% περίπου των τραχηλικών δειγμάτων. Συμπεράσματα: Η ανίχνευση του ιού στο περιφερικό αίμα δεν κατέστη δυνατή, γι’ αυτό το λόγο δεν μπορεί να αποτελέσει προγνωστικό δείκτη.