Βιολογικές ιδιότητες πολυανθεκτικών στελεχών Pseudomonas Aeruginosa

Abstract

The aim of the present study was the evaluation of the commercially available selective media for the isolation and cultivation of Pseudomonas aeruginosa.Five commercial media Mac Conkey Agar No 3 (OXOID), Bacto Pseudomonas Isolation Agar Dehydrated (Difco), Cetrimide Agar Base (Difco), Pseudomonas Agar Base with Supplement SR 102 (OXOID), Isolation Medium for Pseudomonas Aeruginosa (Pasteur), as well as a medium prepared in the context of this work have been used.The evaluation included, the viability and the growth rates of 131 P. aeruginosa clinical strains isolated recently from 14 Athens hospitals.It was found that among the commercial media the Cetrimide Agar Base (Difco) gave the better results concerning viability and growth rates of most isolates examined.The remaining media displayed high inhibitory effects on the same strains. By analysing the results it was observed than a) the growth rate of P. aeruginosa strains was related to the peptone concetration, b) among the antibacterials included in the selective media Cetrimide Acid was the less inhibitory for P. aeruginosaBased in these abservations, a new selective medium containing peptone at concentration 30 gr / lit and Cetrimide Acid 0,3 gr / lit was prepared. This medium gave higher recovery and growth rates for most of the P. aeruginosa strains.Interestingly, the more vulnerable P. aeruginosa strains to the inhibitory activity of the antimicrobials included in the selective media were the ones isolated from infections or colonization of the respiratory tract. Analysis of these strains showed that they possess truncated LPS molecules. It could be suggested that the higher lipophilicity of the outer membrane render those strains more susceptible to the action of the antimicrobials used.In conclusion, the available selective media for P. aeruginosa exert considerable inhibitor activity against clinical isolations of this species.

Ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν η εκτίμηση των εμπορικά διαθεσίμων εκλεκτικών υλικών για την απομόνωση και την καλλιέργεια της Pseudomonas aeruginosa.Χρησιμοποιήθηκαν πέντε (5) εμπορικά υλικά: Mac Conkey Agar No 3 (OXOID), Bacio Pseudomonas Isolation Agar Dehydrated (Difco), Cetrimide Agar Base (Difco), Pseudomonas Agar Base με προσθήκη Supplement SR 102 (OXOID), Isolation Medium for Pseudomonas Aeruginosa (Pasteur), καθώς και ένα υλικό που παρασκευάστηκε στο γενικό πλαίσιο αυτής της εργασίας.Η εκτίμηση περιελάμβανε την βιωσιμότητα και τους ρυθμούς ανάπτυξης των κλινικών καλλιεργειών 131 στελεχών Ρ. aeruginosa, που έχουν πρόσφατα απομονωθεί από δεκατέσσερα (14) νοσοκομεία της Αθήνας. Προέκυψε ότι ανάμεσα από τα εμπορικά υλικά, το υλικό Cetrimide Agar Base (Difco) έδινε τα καλύτερα αποτελέσματα αναφορικά με τη βιωσιμότητα και τους ρυθμούς ανάπτυξης των πιο πολλών απομονωμένων καλλιεργειών που εξετάσθηκαν. Τα υπόλοιπα υλικά έδειξαν ανασταλτικά αποτελέσματα σε υψηλό βαθμό στις ίδιες καλλιέργειες. Με την ανάλυση των αποτελεσμάτων παρατηρήθηκε ότι α) ο ρυθμός ανάπτυξης των καλλιεργειών της Ρ. aeruginosa σχετιζόταν με τη συγκέντρωση πεπτόνης, β) ανάμεσα στους αντιμικροβιακούς παράγοντες που περιλαμβάνονται στα εκλεκτικά υλικά το Cetrimide (κετριμίδιο) ήταν το λιγότερο ανασταλτικό για την Ρ, aeruginosa.Με βάση αυτές τις παρατηρήσεις παρασκευάστηκε ένα νέο εκλεκτικό υλικό που περιέχει πεπτόνη σε συγκέντρωση 30 gr / lit και Cetrimide Acid 0,3 gr / lit. Αυτό το υλικό έδωσε υψηλότερες αναλογίες ανάπτυξης για τις περισσότερες καλλιέργειες της Ρ. aeruginosa.Κατά ενδιαφέροντα τρόπο οι καλλιέργειες Ρ. aeruginosa που ήταν πιο ευπαθείς στην ανασταλτική δραστηριότητα των αντιμικροβιακών παραγόντων, που περιέχονται στα εκλεκτικά υλικά, ήταν αυτές που είχαν απομονωθεί από τις μολύνσεις ή τους αποικισμούς στην αναπνευστική οδό.Η ανάλυση αυτών των καλλιεργειών απέδειξε ότι έχουν ελλειμματικό LPS. Θα μπορούσε να ειπωθεί ότι η υψηλότερη λιποφιλία της εξωτερικής μεμβράνης καθιστά αυτές τις καλλιέργειες πιο επιρρεπείς στη δράση των αντιμικροβιακών παραγόντων που χρησιμοποιούνται.Συμπερασματικά, τα διαθέσιμα εκλεκτικά υλικά για την Ρ. aeruginosa ασκούν αξιόλογη ανασταλτική δράση ενάντια στις απομονωμένες κλινικές καλλιέργειες αυτού του είδους.77