Μελέτη των δεικτών ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων στο πλάσμα στην αιμοπεταλιοαφαίρεση

Abstract

In this study the concentration of four platelet activation markers was measured. The activation markers were the following: β-thromboglobulin, platelet factor-4, sP- selectin and von Willebrand factor. They were measured in platelet concentrates (PC’S) obtained by the procedure of plateletpheresis. Also the same markers were measured in the donor’s plasma preapheresis and postapheresis. The participants were 102 healthy volunteer donors, 88 males and 14 women with a mean age of 35 years. For the plateletpheresis procedure two types of cell separators were used. The first one was the GAMBRO BCT Cobe Spectra LRS Turbo Version 7, single needle and continuous flow. The second one was the FENWAL/BAXTER Amicus REF 4R4580, also single needle and continuous flow but intermittent processing. ELISA was the method that was applied for the determination of β-TG, PF-4, and sP-Selectin. To determine the vWF, a coagulation analyzer (Dade Behring) was used which measures the change of optical density. From this study the following results were obtained: 1. The concentration of the four platelet activation markers was lower after plateletpheresis than before plateletpheresis. 2. The measurements of the donor’s biological parameters were lower after plateletpheresis, except for the WBC count and the MPV which were slightly higher 3. a) The concentration of β-TG, PF-4, sP-Selectin was much more higher in the platelet concentrates (platelets in the collection bag) than in the donor’s plasma pre- and postapheresis. The vWF concentration was not altered. b) The volume of the platelet concentrates (volume of platelets in the collection bag) ranged from 94 ml to 462ml (x̄ = 28 lml, SD = 70 ml). c) The platelet yield (the number of platelets in the collection bag) ranged from 120x10⁹ to 680x10⁹ (x̄ = 396x10⁹, SD= 99.9x10⁹). d) The duration of the apheresis procedure ranged from 42 min to 80 min (x̄ = 64.8min, SD=6.5min). e) During the apheresis, 27% of the donor’s platelets were removed. 4. A positive correlation was found between: a) the platelet yield and the difference in the platelet count of the donor, pre-and postapheresis (rs = 0,409, p<0,005). b) the platelet yield and the volume of the platelet concentrates (rs = 0,863, p<0,005). c) the difference in the donor's platelet count pre- and postapheresis and the platelet count preapheresis (rs = 0,65, p<0,005). d) the platelet yield and the platelet count preapheresis (rs = 0,50, p<0,005). 5. a) A positive correlation was also found between the platelet yield and the duration of the apheresis. b) No correlation was found between the difference in the donor’s platelet count pre-and postapheresis and the duration of the apheresis. 6. A positive correlation was found between the percentage of the platelets removed and the platelet count preapheresis. 7. a) The volume of the platelet concentrates was analogous to the duration of the apheresis. b) When the duration time of the apheresis remained unchanged, the volume of the platelet concentrates was irrelevant to the type of the cell separator. 8. There was a negative correlation between the MPV and the platelet count preapheresis (rs = -0,405, p<0,005) and postapheresis (rs = -0,369, p<0,005).

Στην παρούσα μελέτη προσδιορίστηκε η συγκέντρωση τεσσάρων δεικτών ενεργοποίησης των αιμοπεταλίων, της β-θρομβογλοβουλίνης (β-TG), του αιμοπεταλιακού παράγοντα-4 (PF-4), της sP-σελεκτίνης και του παράγοντα von Willebrand (vWF). Οι μετρήσεις έγιναν στον ασκό των συμπυκνωμένων αιμοπεταλίων των συλλεγέντων με τη διαδικασία της αιμοπεταλιοαφαίρεσης. Έγινε επίσης σύγκριση των δεικτών αυτών στο πλάσμα του δότη πριν και μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση. Συμμετείχαν 102 υγιείς εθελοντές δότες 88 άνδρες και 14 γυναίκες, ηλικίας 21 έως 55 ετών, με μέση ηλικία το 35 έτος. Χρησιμοποιήθηκαν δύο διαφορετικές συσκευές αιμοπεταλιοαφαίρεσης. Η συσκευή Cobe Spectra LRS Turbo Version 7, της εταιρείας GAMBRO BCT, μονής βελόνης και συνεχούς ροής και η συσκευή Amicus Separator REF 4R4580, της εταιρείας FENWAL/BAXTER, μονής βελόνης, συνεχούς ροής αλλά διακοπτόμενης επεξεργασίας. Η μέθοδος προσδιορισμού της β-TG, του PF-4, της sP-σελεκτίνης ήταν η ELISA. Για τον προσδιορισμό του vWF χρησιμοποιήθηκε ο αναλυτής πήξης της εταιρείας DADE BEHRING που μετρά τη μεταβολή της οπτικής πυκνότητας. Από τη μελέτη προέκυψαν τα εξής αποτελέσματα: 1. Διαπιστώθηκε μείωση της συγκέντρωσης των τεσσάρων δεικτών ενεργοποίησης στο πλάσμα του δότη μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση. 2. Διαπιστώθηκε μείωση των τιμών των βιολογικών παραμέτρων στον δότη μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση εκτός των λευκών και του MPV. 3. α) Στον ασκό συλλογής αιμοπεταλίων οι τιμές της β-TG, του PF-4 και της sP-σελεκτίνης ήταν πολύ υψηλότερες των αντιστοίχων τιμών στο πλάσμα του δότη τόσο πριν όσο και μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση. Δεν παρατηρήθηκε μεταβολή της τιμής του vWF. β) Ο όγκος των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό κυμαινόταν από 94ml-462ml (x̄ =28 lml, SD=70ml). γ) Ο αριθμός των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό κυμαινόταν από 120x10⁹ έως 680x10⁹ (x̄ = 396x10⁹, SD=99,9x10⁹). δ) Η διάρκεια αφαίρεσης ήταν από 42-80 λεπτά (x̄ = 64,8 λεπτά, SD=6,5 λεπτά). ε) Το ποσοστό των αφαιρεθέντων αιμοπεταλίων ήταν το 27% του αριθμού των αιμοπεταλίων πριν την αιμοπεταλιοαφαίρεση. 4. Διαπιστώθηκε θετική συσχέτιση μεταξύ: α) του αριθμού των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό και της διαφοράς του αριθμού των αιμοπεταλίων του δότη πριν και μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση (rs = 0,409, p<0,005). β) του αριθμού των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό και του όγκου των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό (rs = 0,863, p<0,005). γ) της διαφοράς του αριθμού των αιμοπεταλίων πριν και μετά την αιμοπεταλιοαφαίρεση και του αριθμού των αιμοπεταλίων πριν την αιμοπεταλιοαφαίρεση (rs = 0,65, p<0,005). δ) του αριθμού των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό και του αριθμού των αιμοπεταλίων πριν την αιμοπεταλιοαφαίρεση (rs = 0,50, p<0,005). 5. α) Διαπιστώθηκε ότι ο αριθμός των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό σχετίζεται θετικά με τη διάρκεια αφαίρεσης. β) Δεν διαπιστώθηκε σχέση μεταξύ της διαφοράς του αριθμού των αιμοπεταλίων (πριν και μετά) και της διάρκειας αφαίρεσης. 6. Διαπιστώθηκε θετική συσχέτιση μεταξύ του ποσοστού των αφαιρεθέντων αιμοπεταλίων και του αριθμού των αιμοπεταλίων πριν την αιμοπεταλιοαφαίρεση. 7. Διαπιστώθηκε: α) θετική συσχέτιση μεταξύ του όγκου των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό και της διάρκειας αφαίρεσης. β) ότι με σταθερά τη διάρκεια αφαίρεσης, το είδος της συσκευής δεν επηρεάζει τον όγκο των συλλεγέντων αιμοπεταλίων στον ασκό. 8. Διαπιστώθηκε αρνητική συσχέτιση μεταξύ του MPV και του αριθμού των αιμοπεταλίων τόσο πριν (rs = -0,405, p<0,005) όσο και μετά (rs = -0,369, p<0,005) την αιμοπεταλιοαφαίρεση.