Αναγέννηση του ήπατος μετά από ανοιχτή και λαπαροσκοπική αριστερά μερική ηπατεκτομή

Abstract

The project compares the impact of the Open Left Partial Hepatectomy(OLPH) and the Laparoscopic Left Partial Hepatectomy(LLPH), on the regenerative response of the liver. Twenty?nine pigs, weighing(21?32kg), were randomly allocated to two groups: the open(n=19) and the laparoscopic(n=10) and underwent OLPH or LLPH respectively, under general anesthesia. OLPH was performed by using a knife(sub?technique A) or a radiofrequency knife(subtecnhique B), while the laparoscopic ones were performed using a stapler(subtecnhique C), or the combination of a stapler and a sub?cutaneous RF knife(subtecnhique D), using a three port technique. All animals were sacrified on the 7th postoperative day(7thPD) and examined for abdominal adhesions, bile leaks, liver or intraabdominal abscesses. Blood samples were taken before, after, on the 1st and on the7thPD for counting Hematological, Biochemical, Hemostatic, Hormonal, Immunological parameters. Regarding the histologic factors implicated in liver regeneration process, resected liver lobes were weighed after operation, while the remnant livers were weighed and also volumetrized on the 7thPD after total resection.Microscopic histology οn pairs of histologic samples which had been taken from the remnant liver after resection and on the 7thPD, were stained by using histo?chemical and immunohisto? chemichal techniques. Using manually counting microscopic visualization well defined indexes, were estimated. By using statistical methods, comparisons were performed among parameters in each group(OLPH or LLPH), between the groups(OLPH vs LLPH) and and among the subgroups(A,B,C,D), according to the time of sampling(before, after, 1stPD, 7thPD). There were no statistical differences in the major postoperative complications between the groups and among the sub?groups, while the intraabdominal adhesions were statistically more in the open group. Regarding liver regeneration there is a statistically significant difference between OLPH and LLPH on the 7thPD, favouring OLPH, while there were no statistical differences in the accumulation of collagen III in the extracellular matrix, in the rate of apoptosis, in the rate of lobular inflammation οr necrosis. However, it noticed a higher initial cellular stress in the OLPH group, after operation and also higher concentration of amyloid in z1 of the remnant liver lobules in the OLPH group, on the 7thPD. The results may be explained on the basis of a delay in the promotion of the cellular’s cycle due to the observed initially high cellular injury on the remnant’s liver tissue and/or the expected extented immune?suppresion, in the remnant liver of the OLPH group. Regarding the impact of sub?techniques(A,B)vs(C,D) on liver regeneration, it noticed a statistically significant difference. This was attributed to the extended surgical trauma and to the use of RF knife in OLPH(A,B), which seems to have a greater impact on liver regeneration, compared with LLPH(C,D).

Η παρούσα μελέτη έχει σκοπό να συγκρίνει την αναγεννητική ανταπόκριση του ήπατος μετά από Ανοιχτή Αριστερά Μερική Ηπατεκτομή(ΑΑΜΗ) και Λαπαροσκοπική Αριστερά Μερική Ηπατεκτομή(ΛΑΜΗ). Εικοσι εννέα (29) θηλυκά οικόσιτα χοιρίδια (Large Landrace White) κατανεμηθήκαν με τυχαίο τρόπο σε δύο πειραματικές ομάδες, που αντιμετωπίσθηκαν με τον ίδιο ακριβώς τρόπο, προ?διε και μετεγχειρητικά, εκτός από το ότι στη μία ομάδα η χειρουργική επέμβαση έγινε με την κλασσική ανοιχτή μέθοδο, ενώ στην άλλη με τη λαπαροσκοπική, υπό γενική αναισθησία. Η ΑΑΜΗ πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας νυστέρι (υποτεχνική Α), ή νυστέρι ραδιοσυχνοτήτων (RF), (Υποτεχνική Β). H ΛΑΜΗ πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας, αυτόματο κοπτορράπτη (υποτεχνική Γ) ή διαδερμικό νυστέρι ραδιοσυχνοτήτων (RF), (Υποτεχνική Δ). Τα πειραματόζωα φροντίζονταν μέχρι την 7ηΜΗ οπότε υποβάλλονταν σε ολική ηπατεκτομή του εναπομείναντος ήπατος, υπό γενική αναισθησία. Ακολούθως, θυσιάζονταν σύμφωνα με το πρωτόκολλο. Δείγματα αίματος λαμβάνονταν πριν, μετά, την 1ηΜΗ και την 7ηΜΗ για τη μέτρηση αιματολογικών, βιοχημικών, ενδοκρινικών και ανοσολογικών παραμέτρων. Oι αφαιρούμενοι ηπατικοί λοβοί υποβάλλονταν σε ζύγιση και ογκομέτρηση, μετά τη χειρουργική επέμβαση, ενώ το εναπομένον ήπαρ μετά από ολική ηπατεκτομή, την 7ηΜΗ. Σε μικροσκοπικό επίπεδο ζεύγη ιστικών τομών από βιοψίες του εναπομένοντος ήπατος μετά τη χειρουργική επέμβαση και την 7ηΜΗ βάφηκαν με ειδικές ιστοχημικές και ανοσοϊστοχημικές τεχνικές. Με τη χρήση μικροσκοπίου υπολογίσθηκαν ορισμένοι κυτταρικοί δείκτες και πραγματοποιήθηκαν στατιστικές συγκρίσεις ανάμεσα στις προαναφερόμενες παραμέτρους σε κάθε πειραματική ομάδα (ΑΑΜΗ ή ΛΑΜΗ), μεταξύ των πειραματικών ομάδων (ΑΑΜΗ και ΛΑΜΗ) και ανά δύο υποομάδες (Α,Β,Γ,Δ), σύμφωνα με το χρόνο δειγματοληψίας(πριν, μετά, 1η ΜΗ, 7ηΜΗ). Η ΛΑΜΗ σε πειραματικό πρότυπο χοίρου είναι μία χειρουργική επέμβαση με δυνατότητα επιτυχούς εκτέλεσης ενώ δεν παρατηρήθηκαν στατιστικώς σημαντικές διαφορές στη συχνότητα των διεγχειρητικών και μετεγχειρητικών επιπλοκών, μεταξύ των δύο πειραματικών ομάδων. Οσον αφορά στις μετεγχειρητικές συμφύσεις, στα πειραματόζωα που υποβλήθηκαν σε ΛΑΜΗ παρατηρήθηκαν στατιστικώς σημαντικά λιγότερες συμφύσεις την 7ηΜΗ. Ο πολλαπλασιασμός των ηπατικών κυττάρων του εναπομείναντος ήπατος των πειραματόζωων που υποβλήθηκαν σε ΑΑΜΗ, διέφερε στατιστικά των αντίστοιχων που υποβλήθηκαν σε ΛΑΜΗ, την 7ηΜΗ καθ’ υπεροχήν των πρώτων. Δεν παρατηρήθηκαν στατιστικώς σημαντικές διαφορές, στους δείκτες εξωκυττάριας ίνωσης, απόπτωσης, περιπυλαίας φλεγμονής και νέκρωσης των ηπατοκυττάρων στα ίδια χρονικά σημεία, ενώ παρατηρήθηκε στατιστικώς σημαντική διαφορά στους δείκτες κυτταρικού stress μετά τη χειρουργική επέμβαση και της ενδολόβιας συγκέντρωσης αμυλοεϊδούς, καθ’ υπεροχήν του εναπομένοντος ήπατος των πειραματόζωων που υποβλήθηκαν σε ΑΑΜΗ. Ωστόσο, τα αποτελεσματα αυτά είναι δυνατόν να ερμηνευθούν και με βάση την καθυστερημένη εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου στην ομάδα των πειραματόζωων που υποβλήθηκαν σε ΑΑΜΗ. Σε επίπεδο υποτεχνικών, παρατηρήθηκαν, επίσης, στατιστικώς σημαντικές διαφορές, καθ’ υπεροχήν των υποτεχνικών της ανοιχτής προσπέλασης, όσον αφορά στην επίπτωσή τους στο φαινόμενο της ηπατικής αναγέννησης. Αυτές, φαίνεται να οφείλονται στο μεγαλύτερο τραύμα κοιλίας και στη χρήση του νυστεριού ραδιοσυχνοτήτων στην ανοιχτή (Υποτεχνικές Α και Β) συγκριτικά με τη λαπαροσκοπική προσπέλαση (Υποτεχνικές Γ και Δ).