Η συμβολή της ραδιοανοσολογικής μεθόδου στη μελέτη της φαρμακοκινητικής της ιντερφερόνης σε ασθενείς με νεοπλάσματα

Abstract

The use of interferon alpha is currently established for the treatment of certain neoplastic diseases and among them for the management of malignant melanoma. Considering the extremely high cost of this product and the existing relationship between the therapeutical results and the levels of the drug in the serum, the individualization of dose becomes a necessity. The pharmacokinetics of interferon alpha was studied in ten consecutive patients suffering from malignant melanoma who were hospitalized at the First Chemotherapy Clinic of "Theagenion" Cancer Institute. Two methods for identifying the levels of the substance in the serum were used: The inhibition of the enzyme 2’5 oligo (A) synthetase and the radioimmunoassay (RIA). The aim of this study was to check if the RIA, due to its simplicity and rapidness can be used as a routine substituting the well known and widely used for year’s enzymatic method. All the patients were included for the first time in an interferon protocol with 5 to 10 X10⁶ International Units of interferon alpha (Intron A), administered by intramuscular injection. Blood samples were drawn before and then in specific time intervals six, twelve and twenty four hours after the administration of the drug. A wide distribution of the values between the different patients was observed, even when they received the same dose. The coefficient of variance was excellent (R²=0.98) when the mean values of the estimations in the different time intervals were compared. Concerning the RIA, the observed by previous investigators luck of sensitivity in the low interferon levels was not evident in this study. As a conclusion it can be stated that RIA can be utilized for the estimation of the interferon's levels in the sera of the patients suffering from malignant melanoma who receive therapeutic doses of this medicine. The quite good sensitivity which is obvious either at the low titers, combined with the other unequivocal advantages such as the simplicity, rapidness and the specificity make the RIA the method of choice. Additionally it identifies only the interferon alpha and is not influenced by the other kinds of interferons. It is a method that can be used in any Nuclear Medicine Department with elementary instrumentation for in vitro exams and can provide results only in few hours after the withdraw of the blood sample. On the other hand, the clinician is interested mainly in the maximal level of the drug and when this is achieved, because these factors will specify the therapeutic result. These parameters can be easily and accurately be identified by RIA, because high titers as such are obviously among the limits of the method.

Η χρήση της ιντερφερόνης άλφα έχει σήμερα καθιερωθεί για την αντιμετώπιση ορισμένων νεοπλασματικών νόσων, μεταξύ των οποίων συγκαταλέγεται και το κακόηθες μελάνωμα. Λόγω του ιδιαίτερα μεγάλου κόστους του φαρμάκου και της εξάρτησης του θεραπευτικού αποτελέσματος από το επίπεδο της ιντερφερόνης στον ορό, υπάρχει επιτακτική ανάγκη εξατομίκευσης της δόσης, που επιτυγχάνεται μόνο μετά από μελέτη της φαρμακοκινητικής του φαρμάκου σε κάθε ασθενή ξεχωριστά. Η φαρμακοκινητική της ιντερφερόνης άλφα μελετήθηκε σε δέκα ασθενείς με κακόηθες μελάνωμα, που νοσηλεύτηκαν στην Α' χημειοθεραπευτική κλινική του Θεαγένειου Αντικαρκινικού Νοσοκομείου. Χρησιμοποιήθηκαν δύο μέθοδοι ανίχνευσης της ουσίας στον ορό: η μέθοδος της αναστολής του ενζύμου 2'5όλιγο (Α) συνθετάση και η ραδιοανοσολογική μέθοδος (RIA). Σκοπός της εργασίας ήταν να ελεγχθεί εάν και κατά πόσο η RIA με τα γνωστά πλεονεκτήματα της συντομίας και απλότητάς της θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως μέθοδος ρουτίνας, αντικαθιστώντας την ήδη γνωστή και από χρόνια χρησιμοποιούμενη μέθοδο της αναστολής του ενζύμου. Στη μελέτη αυτή επιλέχτηκαν αποκλειστικά και μόνο ασθενείς με κακόηθες μελάνωμα με σκοπό τη διατήρηση όσο το δυνατόν μεγαλύτερης ομοιογένειας στο υλικό, επειδή αναφέρεται στη βιβλιογραφία ότι υπάρχει μεγάλη διακύμανση στις βασικές τιμές της ενδογενούς ιντερφερόνης στα διάφορα νεοπλάσματα και η φαρμακοκινητική της χορηγούμενης ιντερφερόνης άλφα σ’ αυτά ποικίλλει. Όλοι οι ασθενείς έλαβαν για πρώτη φορά ιντερφερόνη άλφα (Intron Α) σε δόση που κυμάνθηκε από 5 έως 10 Χ 10⁶ Διεθνείς Μονάδες σε βαθιά ενδομυϊκή χορήγηση. Δείγματα αίματος πάρθηκαν σε χρονικά διαστήματα που τηρήθηκαν με ακρίβεια και ήταν πριν από τη χορήγηση του φαρμάκου και ακολούθως μετά από έξι, δώδεκα και είκοσι τέσσερις ώρες μετά απ' αυτήν. Παρατηρήθηκε σημαντικά μεγάλη διακύμανση στις τιμές μεταξύ των διάφορων ασθενών, ακόμη και μεταξύ αυτών που έλαβαν την ίδια δόοη. Ο συντελεστής συσχέτισης των δύο μεθόδων για το μέσο όρο των μετρήσεων πριν από τη χορήγηση και στα διαστήματα μετά από αυτήν ήταν πολύ ικανοποιητικός (R²=0,98). Παρατηρήθηκε ότι η RIA δεν εμφανίζει την έλλειψη ευαισθησίας στις χαμηλές τιμές που είχε αναγερθεί από προηγούμενους ερευνητές πιθανόν λόγω των βελτιωμένων αντιδραστηρίων και της μεθόδου του διαδοχικού κορεσμού που χρησιμοποιήθηκε. Συμπερασματικά θα μπορούσε να λεχθεί ότι η ραδιοανοσολογική μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί ασφαλώς για τη μέτρηση των επιπέδων της ιντερφερόνης άλφα στον ορό των ασθενών με κακόηθες μελάνωμα που λαμβάνουν θεραπευτικά το φάρμακο αυτό. Η ικανοποιητική ευαισθησία που παρουσιάζει ακόμη και στους χαμηλούς τίτλους σε συνδυασμό με τα άλλα σαφή πλεονεκτήματα, όπως η συντομία, η ευκολία και η ειδικότητα, την καθιστούν σήμερα μέθοδο εκλογής. Επιπρόσθετα η RIA ανιχνεύει αποκλειστικά και μόνο την ιντερφερόνη άλφα και δεν επηρεάζεται από τις άλλες μορφές ιντερφερονών. Είναι μέθοδος που μπορεί να υιοθετηθεί από κάθε εργαστήριο Πυρηνικής Ιατρικής που διαθέτει στοιχειώδη εξοπλισμό για in vitro εξετάσεις και να παρέχει τα αποτελέσματα των μετρήσεων λίγες ώρες μετά την αιμοληψία απευθείας σε Διεθνείς Μονάδες. Άλλωστε, όσον αφορά το θεραπευτικό αποτέλεσμα, αυτό που ενδιαφέρει άμεσα τον κλινικό γιατρό είναι το ύφος και ο χρόνος της μέγιστης επιτυγχανόμενης στάθμης. Αυτές τις δύο παραμέτρους μπορεί να καθορίσει με ακρίβεια, συντομία και ευκολία η ραδιοανοσολογική μέθοδος, επειδή οι τιμές αυτές είναι ευχερώς μέσα στα όρια της ευαισθησίας της.