Κινάση της φωσφορυλάσης.: μεταγωγή σήματος και αλληλεπιδράσεις με κυτταρικά συστατικά.

Abstract

ΥΠΟΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΚΛΑΣΜΑΤΩΣΗ ΣΕ ΣΥΚΩΤΙ ΑΡΟΥΡΑΙΟΥ ΑΠΟΚΑΛΥΨΕ ΠΩΣ Η ΚΥΡΙΑ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑ ΚΙΝΑΣΗΣ ΤΗΣ ΦΩΣΦΟΡΥΛΑΣΗΣ ΕΝΤΟΠΙΖΕΤΑΙ ΣΤΟ ΔΙΑΛΥΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑ ΕΝΩ ΕΝΑ ΜΙΚΡΟ ΑΛΛΑ ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΒΡΕΘΗΚΕ ΣΥΝΔΕΔΕΜΕΝΟ ΜΕ ΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΤΟΥ ΛΕΔ.ΔΕΝ ΑΝΙΧΝΕΥΘΗΚΕ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΣΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΤΟΥ ΑΕΔ,ΣΤΙΣ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΕΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ,ΣΤΟΥΣ ΠΥΡΗΝΕΣ ΚΑΙ ΣΤΑ ΜΙΤΟΧΟΝΔΡΙΑ.Η ΜΕΜΒΡΑΝΙΚΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΗΣ ΚΙΝΑΣΗΣ ΤΗΣ ΦΩΣΦΟΡΥΛΑΣΗΣ ΗΤΑΝ ΑΣΘΕΝΗΣ ΚΑΙ ΤΟ ΜΕΓΑΛΥΤΕΡΟ ΜΕΡΟΣ ΤΗΣ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑΣ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΑΠΕΛΕΥΘΕΡΩΘΗΚΕ ΣΤΟ ΥΠΕΡΚΕΙΜΕΝΟ ΕΚΠΛΕΝΟΝΤΑΣ ΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΣΕ ΟΥΔΕΤΕΡΟ ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ.ΤΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΠΟΥ ΕΚΧΥΛΙΣΘΗΚΕ ΑΠΟ ΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΑΥΞΗΘΗΚΕ ΠΑΡΟΥΣΙΑ ΥΨΗΛΗΣ ΙΟΝΤΙΚΗΣ ΙΣΧΥΟΣ ΣΤΟ ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΟ ΔΙΑΛΥΜΑ ΑΡΑΙΩΣΗΣ,ΑΛΛΑ ΚΑΙ ΣΤΗΝ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΑΥΤΗ ΜΙΚΡΗ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑ ΠΑΡΕΜΕΙΝΕ ΣΤΟ ΤΕΛΙΚΟ ΜΕΜΒΡΑΝΙΚΟ ΙΖΗΜΑ.ΤΑ ΜΟΡΙΑ ΤΗΣ ΚΙΝΑΣΗΣ ΤΗΣ ΦΩΣΦΟΡΥΛΑΣΗΣ ΠΟΥ ΠΑΡΕΜΕΙΝΑΝ ΣΥΝΔΕΔΕΜΕΝΑ ΣΤΗΝ ΜΕΜΒΡΑΝΗ ΠΙΘΑΝΩΣ ΑΝΤΙΠΡΟΣΩΠΕΥΟΥΝ ΕΝΑ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟ ΠΛΗΘΥΣΜΟ ΜΕ ΥΔΡΟΦΟΒΑ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ.Η ΙΣΧΥΡΗ ΑΥΤΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΕΠΙΒΕΒΑΙΩΘΗΚΕ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΚΑΤΕΡΓΑΣΙΑ ΤΩΝ ΜΕΜΒΡΑΝΩΝ ΜΕ ΕΠΙΦΑΝΕΙΟΕΝΕΡΓΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ ΟΠΩΣ TRITON X-100,TRITON X-114,ΔΕΟΞΥΧΟΛΙΚΟ ΝΑΤΡΙΟ.ΜΕ ΤΗΝ ΜΕΘΟΔΟ ΑΥΤΗ ΜΙΚΡΟ ΜΟΝΟ ΜΕΡΟΣ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΕΚΧΥΛΙΣΘΗΚΕ.Η ΣΥΝΘΕΣΗ ΤΗΣ ΚΙΝΑΣΗΣ ΜΕ ΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΗΤΑΝ ΑΜΕΣΗ ΚΑΙ ΟΧΙ ΕΜΜΕΣΗ ΜΕΣΩ ΣΩΜΑΤΙΔΙΩΝ ΓΛΥΚΟΓΟΝΟΥ ΠΟΥ ΣΥΝΥΠΑΡΧΟΥΝ ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ.ΑΥΤΟ ΑΠΟΔΕΙΧΘΗΚΕ ΣΥΓΚΡΙΝΟΝΤΑΣ Α)ΤΗ ΔΡΑΣΤΙΚΟΤΗΤΑ ΤΟΥ ΕΝΖΥΜΟΥ ΣΕ ΚΑΝΟΝΙΚΟΥΣ ΚΑΙ ΣΕ 48H ΧΩΡΙΣ ΤΡΟΦΗ ΑΡΟΥΡΑΙΟΥΣ (ΟΠΟΥ ΤΟ ΓΛΥΚΟΓΟΝΟ ΕΙΧΕ ΠΛΗΡΩΣ ΑΠΟΜΑΚΡΥΝΘΕΙ).ΤΟ ΠΟΣΟΣΤΟ ΤΗΣ ΚΙΝΑΣΗΣ ΤΗΣ ΦΩΣΦΟΡΥΛΑΣΗΣ ΣΤΙΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΤΟΥ ΛΕΔ ΣΤΙΣ ΔΥΟ ΑΥΤΕΣ ΠΕΡΙΠΤΩΣΕΙΣ ΗΤΑΝ ΠΑΡΟΜΟΙΟ.Β)ΕΠΩΑΣΗ ΤΩΝ ΜΕΜΒΡΑΝΩΝ ΜΕ Α-ΑΜΥΛΑΣΗ (ΑΜΥΛΟΛΥΣΗ) ΔΕΝ ΜΕΤΕΒΑΛΛΕ ΣΗΜΑΝΤΙΚΑ ΤΟ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ.ΟΡΙΣΜΕΝΕΣ