ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΠΑΡΑΣΙΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΤΟΥ TRICHODERMA KONINGII ΕΠΙ ΤΟΥ RHIZOCTONIA SOLANI ΚΑΙ Η ΣΥΜΒΟΛΗ ΤΗΣ ΣΤΗ ΒΙΟΛΟΓΙΚΗ ΚΑΤΑΠΟΛΕΜΗΣΗ ΤΩΝ ΤΗΞΕΩΝ ΤΟΥ ΚΑΠΝΟΥ

Abstract

The parasitic ability of T. koningii against R. solani and its contribution to biological control of tobacco damping-off was studied. The parasitic ability was studied by in vitro and in vivo experiments. Hyperparasitism phenomena of T. koningii against R. solani were observed macroscopically as well as microscopically in dual cultures. The growth of R. solani was inhibited after hyphae attachment by T. koningii at the point of meeting of two colonies. An interaction zone was created. T. koningii overgrew R.solani and eventually the whole surface of the petri dish was covered by the hyphae and sporulation of T. koningii. R. solani microsclerotial formation was not observed. Phenomena such as: side by side growth, adhesion, coiling . around, hyphae invasion and penetration, protoplasm reduction, empty hyphae and chlamydospore formation inside the pathogen were observed. Inoculun transfered from the interaction zone of R. solani and T. koningii gave growth to cultures of Γ. koningii . Recovery of R. solani from dual cultures was impossible. Benomyl influenced the growth of T. koningii .The growth of T.koningii was retarded as the benomyl concentration was rised in the culture medium and it was inhibited at concentration above 6ug/ml of culture medium. A slight retardation of growth of R.solani was also noticed at the above benomyl concentration. Fungicide action of benomyl was selective against T. koningii. Cultures of T. koningii were growth when inoculum was taken from interaction zone of dual cultures on benomyl concentration that allowed T. koningii growth. Growth rate of T. koningii was similar to T. koningii raised alone on culture with same benomyl concentration. When the inoculum was taken from dual culture in 6ug/ml benomyl concentration, none of the two fungi was growth. Recovery of R. solani from dual cultures was impossible even after the selective action of benomyl against T. koningii. Inoculations were made at tobacco seedlings crown with inoculum taken from the interaction zone of dual cui ture. The intensity of the infection and the percentage of the infected plants were significantly lower compared with those inoculated by the pathogen alone. Culture medium made from compost, corn flour and water at proportion 1:1:1 v/v was a successful medium for fungus culture. Significantly more plants remained healthy in seedbeds when pathogen and hyperparasite were incorporated in soil mixture compared with plants in seedbed-pots treated with the pathogen. Besides the effectiveness was greater when the hyperparasite was pre-incorporated. When tobacco seedlings were transplanted in soil mixture where the pathogen and the hyperparasite were incorporated the extend and the intensity of the infection of R. solani was reduced. A year period was almost needed to establish R. solani into the soil mixture of wooden-frame-seedbends under field conditions. After this time the pathogen was able to cause infection.The pathogenicity of R. solani was not high and the reduction of the pathogen infection by the hyperparasite was not significant in all treatments, compared to the pathogen ability of R. solani. Experiments with combination of biological and chemical control under field conditions were carried out. The infection percentage of transplanted tobacco seedlings in artificially infested soil mixture wasn’t significant different when the hyperparasite was incorporated related to that of seedlings treated with Terraelor. The infection percentage was significant lower in combined action of the hyperparasite and the fungicide application compared to the action of each agent alone.

Μελετήθηκε η παρασιτική ικανότητα του Τ. koningii επί του R.solani και η συμβολή της στη βιολογική καταπολέμηση των τήξεων του καπνού. Η παρασιτική ικανότητα μελετήθηκε σε πειράματα in vitro και in vivo. Σε διπλές καλλιέργειες in vitro παρατηρήθηκαν μακροσκοπικά και μικροσκοπικά φαινόμενα υπερπαρασιτισμού του Τ. koningii επί του R. solani . Βρέθηκε ότι μετά τη συνάντηση των υφών των δύο μυκήτων σταματούσε η ανάπτυξη του R. solani ενώ ο Τ. koningii συνέχιζε να αναπτύσσεται επί της επιφάνειας που είχε καλύψει ο R. solani. Έτσι δημιουργούνταν ζώνη συνάντησης και στη συνέχεια καλύπτονταν ολόκληρη η επιφάνεια του τρυβλίου από υφές και καρποφορίες του Τ. koningii, χωρίς να παρατηρηθεί δημιουργία μικροσκληρωτίων του R. solani. Μικροσκοπικά παρατηρήθηκαν φαινόμενα αλληλεπίδρασης υφών του παθογόνου μύκητα με υφές τουυπερπαράσιτου, όπως παράλληλη ανάπτυξη, προσκόλληση και περιέλιξη υφών του δεύτερου γύρω από υφές του πρώτου, διάτρηση υφών του παθογόνου και είσοδος υφών του υπερπαράσιτου εντός των υφών του παθογόνου. Επίσης παρατηρήθηκε μείωση του πρωτοπλάσματος των υφών του παθογόνου μύκητα, πολλές άδειες υφές αυτού και δημιουργία χλαμυδοσπορίων του υπερπαράσιτου μύκητα εντός υφών του παθογόνου. Με τη μεταφορά εμβολίων από τη ζώνη συνάντησης του ζεύγους των μυκήτων R. solani-T. konigii αναπτύσσονταν καλλιέργειες που ανήκαν στο Τ. koningii. Η ανάκτηση του R. solani από διπλή καλλιέργεια δεν ήταν δυνατή. Το μυκητοκτόνο benomyl βρέθηκε ότι επηρεάζει την ανάπτυξη του Τ. koningii και για το λόγο αυτό χρησιμοποιήθηκε για την ανάκτηση του R. solani από εμβόλια της ζώνης συνάντησης των δύο μυκήτων. Η ανάπτυξη του Τ. koningii παρεμποδίζονταν με αύξηση της συγκέντρωσης του benomyl στο θρεπτικό μέσο και αναστέλλονταν στις συγκεντρώσεις από 6μς δ.ο./ml θρεπτικού μέσου και πάνω. Στις παραπάνω συγκεντρώσεις διαπιστώθηκε μικρή καθυστέρηση της ανάπτυξης του R. solani παρουσία benomyl στο θρεπτικό μέσο. Το benomyl ασκούσε εκλεκτική δράση σε βάρος του Τ. koningii. Με τη μεταφορά εμβολίων από τη ζώνη συνάντησης των μυκήτων σε διπλή καλλιέργεια στις συγκεντρώσεις benomyl που επέτρεπαν την ανάπτυξη του T. koningii σχηματίσθηκαν καλλιέργειες που είχαν για κάθε συγκέντρωση benomyl παρόμοια ταχύτητα ανάπτυξης με εκείνη του Τ. koningii και ανήκαν στο Τ. koningii. Στις συγκεντρώσεις benomyl που δεν επέτρεπαν την ανάπτυξη του Τ. koningii δεν αναπτύχθηκαν καλλιέργειες. Η ανάκτηση του R. solani από διπλή καλλιέργεια δεν ήταν δυνατή με την εκλεκτική δράση του benomyl. Σε μολύνσεις φυταρίων καπνού στο λαιμό στην επέμβαση με εμβόλια απο τη ζώνη συνάντησης, του ζεύγους των μυκήτων παθογόνου-υπερπαρασίτου σε διπλή καλλιέργεια, το ποσοστό προσβολής ήταν σημαντικά μικρότερο και μικρότερης έντασης σε σχέση με εκείνο της επέμβασης του παθογόνου. Για τη μελέτη της αλληλεπίδρασης των δύο μυκήτων στο έδαφος βρέθηκε ότι κατάλληλο θρεπτικό μέσο καλλιέργειας των μυκήτων γιατην ενσωμάτωση τους σε εδαφικό μείγμα ήταν η κομπόστα με καλαμποκάλευρο και νερό σε αναλογίες 1:1:1 κ.ο. Ο αριθμός των υγιών φυτών σε σπορεία-δοχεία ήταν σημαντικά μεγαλύτερος στην επέμβαση ενσωμάτωσης στο εδαφικό μείγμα των σπορείων του υπερπαράσιτου μύκητα μαζί με τον παθογόνο, ιδιαίτερα στις περιπτώσεις όπου ο υπερπαράσιτος μύκητας προϋπήρχε, σε σχέση με την επέμβαση του παθογόνου. Επίσης και επί μεταφυτευομένων φυταρίων καπνού παρουσία υπερπαρασίτου μειώθηκε σημαντικά η έκταση και η ένταση προσβολής από το παθογόνο. Σε εδαφικό μείγμα σπορείων-ξύλινων πλαισίων καπνού σε συνθήκες υπαίθρου απαιτήθηκε χρονικό διάστημα ενός περίπου έτους για την εγκατάσταση του R. solani και την πρόκληση μολύνσεων. Η παθογόνος ικανότητα του R. solani ήταν περιορισμένη και η μείωση της προσβολής από το παθογόνο, παρουσία υπερπαρασίτου στο εδαφικό μείγμα των σπορείων, δεν ήταν σημαντική σε όλες τις επεμβάσεις χρονικής σειράς ενσωμάτωσης παθογόνου-υπερπαρασίτου σε σχέση με την επέμβαση του παθογόνου. Έγιναν πειράματα συνδυασμού βιολογικής και χημικής καταπολέμησης σε συνθήκες υπαίθρου. Βρέθηκε ότι, σε τεχνητά μολυσμένο από το R. solani εδαφικό μείγμα, στην επέμβαση ενσωμάτωσης μόνο του υπερπαράσιτου το ποσοστό προσβολής από τον παθογόνο μύκητα μεταφυτευομένων φυταρίων καπνού σε δοχεία δεν διέφερε σημαντικά σε σχέση με εκείνο της επέμβασης εφαρμογής μόνο του μυκητοκτόνου Terraelor. Στην επέμβαση ενσωμάτωσης του υπερπαράσιτου μύκητα και εφαρμογής του μυκητοκτόνου το ποσοστό προσβολής ήταν σημαντικά μικρότερο απ' ότι στο καθένα χωριστά.