ΜΕΛΕΤΗ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΠΡΩΤΕΑΣΩΝ ΣΕΡΙΝΗΣ ΤΟΥ ANOPHELES GAMBIAE

Abstract

ΣΤΟΧΟΣ ΤΗΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΑΥΤΗΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΕ Η ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΚΑΙ Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΤΟΥ ANOPHELES GAMBIAE ΠΟΥ ΚΩΔΙΚΟΠΟΙΟΥΝ ΠΡΩΤΕΑΣΕΣ ΣΕΡΙΝΗΣ ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ Η ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝΥΠΟΚΙΝΗΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΠΡΩΤΕΑΣΩΝ ΣΕΡΙΝΗΣ, ΤΩΝ ΟΠΟΙΩΝ Η ΜΕΤΑΓΡΑΦΗ ΠΕΡΙΟΡΙΖΕΤΑΙ ΣΤΟ ΕΝΤΕΡΟ ΤΟΥ ΖΩΟΥ. ΤΑ ΚΟΥΝΟΥΠΙΑ ΤΟΥ ΓΕΝΟΥΣ ΑΥΤΟΥ ΕΙΝΑΙ ΟΙ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΟΤΕΡΟΙ ΦΟΡΕΙΣ ΤΩΝ ΠΛΑΣΜΩΔΙΩΝ ΠΟΥ ΠΡΟΚΑΛΟΥΝ ΕΛΟΝΟΣΙΑ ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΟ. ΔΕΔΟΜΕΝΟΥ ΟΤΙ ΕΝΑ ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ ΤΜΗΜΑ ΤΟΥ ΚΥΚΛΟΥ ΖΩΗΣ ΤΟΥ ΠΛΑΣΜΩΔΙΟΥ ΛΑΜΒΑΝΕΙ ΧΩΡΑ ΣΤΟ ΕΝΤΕΡΟ ΤΟΥΚΟΥΝΟΥΠΙΟΥ ΚΑΙ ΜΑΛΙΣΤΑ ΕΞΑΡΤΑΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗ ΔΡΑΣΗ ΟΡΙΣΜΕΝΩΝ ΠΡΩΤΕΑΣΩΝ ΣΕΡΙΝΗΣ ΤΟΥ ΖΩΟΥ, Η ΜΕΛΕΤΗ ΑΥΤΗ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΠΙΘΑΝΩΣ ΘΑ ΣΥΜΒΑΛΛΕΙ ΣΤΗΝ ΠΡΟΣΠΑΘΕΙΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΤΙΜΕΤΩΠΙΣΗ ΤΟΥ ΠΡΟΒΛΗΜΑΤΟΣ ΤΗΣ ΕΛΟΝΟΣΙΑΣ ΠΟΥ ΜΑΣΤΙΖΕΙ ΠΟΛΛΕΣ ΤΡΟΠΙΚΕΣ ΠΕΡΙΟΧΕΣ ΤΟΥ ΚΟΣΜΟΥ. ΑΡΧΙΚΑ ΚΛΩΝΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ ΤΡΙΑ ΓΟΝΙΔΙΑ ΠΡΩΤΕΑΣΩΝ ΣΕΡΙΝΗΣ ΠΟΥ ΟΝΟΜΑΣΤΗΚΑΝ SP6A, SP6T ΚΑΙ SP8T. H ΑΝΑΛΥΣΗ ΤΗΣ ΠΡΩΤΟΔΙΑΤΑΞΗΣ ΤΟΥΣ ΚΑΙ Η ΜΕΛΕΤΗΤΗΣ ΜΕΤΑΓΡΑΦΙΚΗΣ ΤΟΥΣ ΔΡΑΣΤΗΡΙΟΤΗΤΑΣ, ΥΠΕΔΕΙΞΑΝ ΠΩΣ ΠΙΘΑΝΩΣ ΤΑ ΠΡΟΙΟΝΤΑ ΤΟΥΣΠΑΙΖΟΥΝ ΚΑΠΟΙΟ ΡΟΛΟ ΣΤΗ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΤΗΣ ΑΝΑΠΤΥΞΗΣ ΤΟΥ ΖΩΟΥ. ΕΠΙΣΗΣ ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ ΠΩΣ ΚΑΝΕΝΑ ΑΠΟ ΤΑ ΤΡΙΑ ΑΥΤΑ ΓΟΝΙΔΙΑ ΔΕΝ ΜΕΤΑΓΡΑΦΟΝΤΑΝ ΜΕ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΣΤΟ ΕΝΤΕΡΟ ΤΟΥ ΚΟΥΝΟΥΠΙΟΥ. ΣΕ ΜΙΑ ΔΕΥΤΕΡΗ ΦΑΣΗ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ ΟΙ ΥΠΟΚΙΝΗΤΕΣ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ANTRYP1 ΚΑΙ ANTRYP2, ΓΙΑ ΤΟ ΟΠΟΙΑ ΗΤΑΝ ΓΝΩΣΤΟ ΠΩΣ Η ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥΣ ΠΕΡΙΟΡΙΖΕΤΑΙ ΣΤΟ ΕΝΤΕΡΟ ΤΟΥ ΖΩΟΥ. (ΠΕΡΙΚΟΠΗ ΠΕΡΙΛΗΨΗΣ)

THE AIM OF THIS WORK WAS THE ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF SERINE PROTEASESAS WELL AS THE STUDY OF MIDGUT-SPECIFIC PROMOTES OF THE MOSQUITO ANOPHELES GAMBIAE. THE MOSQUITOES OF THE GENUS ANOPHELES ARE THE MOST POWERFUL VECTORS OF MALARIA PARASITES. IT IS KNOWN THAT IN THE MOSQUITO MIDGUT, CRUCIAL PARTS OF THE MALARIA LIFE CYCLE TAKE PLACE. FURTHERMORE THE DEVELOPMENT OF THE PARASITE IN THE MIDGUT DEPENDS ON SOME MOSQUITO SERINE PROTEASES. THE CHARACTERIZATION OF SERINE PROTEASES AND MIDGUT-SPECIFIC PROMOTERS COULD BE POTENTIALLY USEFUL IN THE CONSTRUCTION OF TRANSGENIC MOSQUITOES THAT WOULD BE REFRACTORY TO THE PARASITE. THIS COULD HELP THE CONTROL OF MALARIA IN TROPICAL REGIONS. AS A FIRST STEP, USING THE PCR TECHNOLOGY, THREE GENES WERE CLONED (SP6A, SP6TAND SP8T) THAT CODE FOR SERINE PROTEASES. THE SEQUENCE OF THESE GENES AS WELL AS THE FACT THAT THEY ARE TRANSCRIPTIONALLY ACTIVE IN EARLY DEVELOPMENTAL STAGES, INDICATED THAT MOST PROBABLY THEY ARE INVOLVED IN MOSQUITO DEVELOPMENT.FURTHERMORE THE PROMOTERS OF TWO OTHER SERINE PROTEASES GENES-ANTRYP1 AND ANTRYP2 WERE ANALYZED USING THE P-ELEMENT MEDIATED TRANSFORMATION SYSTEM OF DROSOPHILA MELANOGASTER. TRANSFORMATION EXPERIMENTS USING ANTRYP1 AND ANTRYP2 GENES ALONG WITH THEIR FLANKING SEQUENCES SHOWED THAT THE EXPRESSION OF THESE GENES IN THE TRANSFORMED DROSOPHILA LINES WAS RESTRICTED TO THE GUT. (ABSTRACTTRUNCATED)