Ο ρόλος του εναλλακτικού ματίσματος στον νευροενδοκρινικό καρκίνο παγκρέατος

Abstract

Pancreatic neuroendocrine tumors (PanNET) are a heterogeneous group of neoplasms arising in pancreatic islets and altering the hormone secreting function of neuroendocrine cells. Genome wide approaches have revealed the genomic landscape of PanNET but have not explained their problematic hormone secretion. In this thesis, it is revealed that alternative splicing (AS) deregulation is responsible for changes in the secretory ability of PanNET cells. As shown, the splicing factor SRRM3 (RNA binding protein) is upregulated in PanNET and favors the inclusion of a group of alternative microexons in certain mRNAs. These microexons are part of a larger neural program regulated by SRRM3 and their inclusion results in protein isoforms that change stimulus-induced insulin trafficking and secretion. By downregulating SRRM3 or inhibiting its binding on three of the microexon bearing pre-mRNAs, in animal and cellular PanNET models, we prove the necessity of SRRM3 for hormone secretion, PanNET progression and the enhanced neural component of PanNET tumors.

Οι νευροενδοκρινείς όγκοι του παγκρέατος (PanNET) είναι μια ετερογενής ομάδα νεοπλασμάτων που εμφανίζονται σε νησίδια του παγκρέατος και μεταβάλλουν την εκκριτική λειτουργία ορμονών των νευροενδοκρινών κυττάρων. Προηγούμενες γονιδιωματικές αναλύσεις έχουν αποκαλύψει το γονιδιωματικό υπόβαθρο των PanNET, αλλά δεν έχουν εξηγήσει τη διατάραξη ορμονικής έκκρισης του παγκρέατος. Στην παρούσα διατριβή φανερώνεται ότι η απορρύθμιση του εναλλακτικού ματίσματος (AS) είναι υπεύθυνη για αλλαγές στην εκκριτική ικανότητα των κυττάρων PanNET. Όπως αποδεικνύεται, ο παράγοντας ματίσματος SRRM3 (μόριο δέσμευσης RNA) είναι υπερεκφρασμένος στην περίπτωση των PanNET και ευνοεί την ένταξη μιας ομάδας εναλλακτικών μικροεξονίων σε ορισμένα mRNAs. Αυτά τα μικροεξόνια αποτελούν μέρος ενός ευρύτερου προγράμματος νευρικής ρύθμισης που ελέγχεται από τον SRRM3 και η ένταξή τους έχει ως αποτέλεσμα ισομορφές πρωτεϊνών που αλλάζουν την επαγόμενη από ερέθισμα διακίνηση και έκκριση ινσουλίνης. Μειώνοντας την πρωτεΐνη SRRM3 ή αναστέλλοντας τη σύνδεσή της σε τρία από τα προ-mRNA που φέρουν χαρακτηριστικά μικροεξόνια νευρικής φύσης, σε ζωικά και κυτταρικά μοντέλα PanNET, αποδεικνύεται ο κρίσιμος ρόλος του SRRM3 στον έλεγχο ορμονικής έκκρισης, την εξέλιξη της νόσου και τον ενισχυμένο νευρικό χαρακτήρα των PanNET.