Αιμοστατικοί δείκτες σε πλασματικά παράγωγα αίματος

Abstract

Introduction: Despite the fact that there are clear guidelines on industrial manufacture of plasma-derived medicinal products, there is no expiration date for plasma intended for fractionation and the effect of prolonged storage remains unknown. Furthermore, although factor VIII (FVIII) is the quality assurance indicator of plasma, global assays could more accurately reflect the hemostatic profile of plasma. Aim: The aim of this study was to investigate the effect of prolonged storage on the degradation kinetics and stability of various coagulation factors and inhibitors, as well as to analyze recovered plasma stored for a long period of time using a global method and correlate the results with the activity of FVIII. Materials and methods: Two separate studies were performed. In both, units of recovered plasma, which had been stored at –30 °C at the National Blood Donation Center for up to 11 years and came from a temporarily inactive fractionation program were examined. In the first part of the study, a total of 237 plasma units stored for one year (62 units), five years (75 units) and 10 years (100 units) were examined. The factors studied were: FII, FV, FVII, FVIII, FIX, FX, FXI, FXII, FXIII, fibrinogen, antithrombin (AT) and albumin. Comparison of values between 1 and 5, 1 and 10 and 5 and 10 years of storage was performed. In the second part of the study, a total of 60 plasma units, stored for 11 years (12 units), 7 years (18 units), 3 years (17 units) and 2 years (13 units) were examined. The analyses were performed using rotational thromboelastometry (ROTEM®, Munich, Germany) without accelerating activators (NATEM assay). The results were correlated with the activity of FVIII.Results: Albumin, AT, fibrinogen, FIX, FXI, FXII and FXIII remain rather stable even after 10 years of storage. The levels of FII, FV, FVII, FVIII and FX decreased after 5 years of storage. Despite the decrease in FVIII, most ROTEM parameters (CT, CFT, α-angle, LI30 and LI60) were within normal range regardless of storage time. Conclusions: Recovered plasma could possibly be used for industrial manufacture of medicinal products after several years of storage at the recommended temperature. If confirmed in further studies, global methods, such as thromboelastometry, could more accurately assess the hemostatic potential of recovered plasma.

Εισαγωγή: Παρά το γεγονός ότι υπάρχουν σαφείς οδηγίες για την παρασκευή φαρμακευτικών σκευασμάτων που προέρχονται από το πλάσμα, δεν προβλέπεται χρόνος λήξης για το πλάσμα που προορίζεται για κλασματοποίηση και η επίδραση της παρατεταμένης αποθήκευσης παραμένει άγνωστη. Επιπλέον, αν και ο παράγοντας VIII (FVIII) αποτελεί το δείκτη διασφάλισης της ποιότητας του πλάσματος, οι σφαιρικές δοκιμασίες πιθανά να αντικατοπτρίζουν με μεγαλύτερη ακρίβεια το αιμοστατικό προφίλ του πλάσματος. Σκοπός: Σκοπός της παρούσας ερευνητικής μελέτης ήταν να διερευνηθεί η επίδραση της παρατεταμένης αποθήκευσης στην κινητική αποδόμησης και τη σταθερότηταδιαφόρων παραγόντων πήξης και ανασταλτών, καθώς επίσης και η ανάλυση με σφαιρικές μεθόδους και η συσχέτιση των αποτελεσμάτων με τη δραστικότητα του FVIII ανακτημένου πλάσματος αποθηκευμένου για μεγάλο χρονικό διάστημα. Υλικό και μέθοδος: Πραγματοποιήθηκαν δύο επιμέρους μελέτες. Σε αμφότερες εξετάστηκαν μονάδες πλάσματος ανάκτησης, οι οποίες ήταν αποθηκευμένες στους – 30 °C στο Εθνικό Κέντρο Αιμοδοσίας (Ε.ΚΕ.Α) για έως και 11 έτη και προέρχονταν από ένα προσωρινά ανενεργό πρόγραμμα κλασματοποίησης. Στο πρώτo μέρος της μελέτης εξετάστηκαν συνολικά 237 μονάδες πλάσματος εκ των οποίων οι 62 ήταν αποθηκευμένες για 1 έτος, οι 75 για 5 έτη και οι 100 για 10 έτη. Οι παράγοντες που μελετήθηκαν ήταν οι εξής: FII, FV, FVII, FVIII, FIX, FX, FXI, FXII, FXIII, ινωδογόνο, αντιθρομβίνη (ΑΤ) και αλβουμίνη. Πραγματοποιήθηκε σύγκριση των τιμών μεταξύ ενός και 5, ενός και 10 και 5 και 10 ετών αποθήκευσης. Στο δεύτερο μέρος της μελέτης εξετάστηκαν συνολικά 60 μονάδες πλάσματος εκ των οποίων 12 ήταν αποθηκευμένες για 11 έτη, 18 για 7 έτη, 17 για 3 έτη και 13 για 2 έτη. Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη μέθοδο της περιστροφικής θρομβοελαστομετρίας (ROTEM®, Munich, Germany) χωρίς ενεργοποιητή (δοκιμασία ΝΑΤΕΜ). Τα αποτελέσματα συσχετίστηκαν με τη δραστικότητα του FVIII. Αποτελέσματα: Η αλβουμίνη, η AT, το ινωδογόνο, ο FIX, ο FXI, ο FXII και ο FXIII παραμένουν μάλλον σταθερά ακόμη και μετά από 10 έτη αποθήκευσης. Τα επίπεδα των FII, FV, FVII, FVIII και FX μειώθηκαν μετά από 5 έτη αποθήκευσης. Παρά τη μείωση του FVIII, οι περισσότερες παράμετροι ROTEM (CT, CFT, α-γωνία, LI30 και LI60) ήταν εντός φυσιολογικού εύρους ανεξάρτητα από το χρόνο αποθήκευσης. Συμπεράσματα: Το ανακτημένο πλάσμα μπορεί ενδεχομένως να χρησιμοποιηθεί από τη φαρμακοβιομηχανία έπειτα από αρκετά έτη αποθήκευσης στη συνιστώμενηθερμοκρασία. Εάν επιβεβαιωθούν τα αποτελέσματα σε περαιτέρω μελέτες, οι σφαιρικές μέθοδοι, όπως η θρομβοελαστομετρία, θα μπορούσαν να αξιολογήσουν με μεγαλύτερη ακρίβεια το αιμοστατικό δυναμικό του ανακτημένου πλάσματος.