Σύγκριση της αιμοστατικής λειτουργίας των επεξεργασμένων με ριβοφλαβίνη αιμοπεταλίων αφαίρεσης, σε ασκούς με PAS

Abstract

Background - The impact of pathogen reduction technology (PRT) such as Mirasol, and the effect of platelet additive solutions (PAS) on the activity and hemostatic profile of transfused apheresis platelets remain largely unknown. The aim of this study was to assess the in vitro hemostatic and metabolic profile of Mirasol treated platelets in PAS during a 7-day storage period. Material and methods - Ten split bags containing apheresis platelets stored in PAS were split into two groups; control platelets (No.=10 units) and PRT-treated platelets (No.=10 units). In vitro evaluation of the platelet components was performed on the 1st, 3rd, 5th, and 7th days of the storage period. Several metabolic parameters including pH, glucose, and lactate levels were evaluated, while assessment of their hemostatic capacity was performed using light transmission aggregometry (LTA) and viscoelastic studies such as rotational thromboelastometry (ROTEM) and thromboelastography (TEG).Last, Annexin V levels were measured though flow cytometry for evaluation of platelet activation. Results - Clot strength, as reflected by the maximum clot firmness (MCF) and the maximum amplitude (MA) parameters of the viscoelastic studies was significantly decreased in the PRT-treated platelets compared to the control platelets (p<0.05). Clot strength based on MCF and MA values was also found to be decreasing over storage time in PRT-treated platelets (p<0.001), while this was not evident in control platelets. Moreover, the comparison between pH, glucose, and lactate levels were indicative of increased metabolic activity in PRT-treated platelets compared to control platelets (p<0.001). Last, Annexin-V was significantly higher in PRT-treated platelets compared to control platelets on the 7th day of the storage period (p<0.001).Discussion - The results of this study indicate that increased PSL induced by PRT treatment leads to a decreased in vitro platelet hemostatic efficacy and increased metabolic activity. However, the clinical impact of these alternations needs further investigation.

Στόχος όλων των τραπεζών αίματος είναι η ασφάλεια των προϊόντων αίματος να διασφαλίζεται στο μέγιστο δυνατό βαθμό και η ποιότητα και λειτουργικότητα των προϊόντων αυτών να είναι εξασφαλισμένη. Η ασφάλεια σχετίζεται με την πρόληψη της μετάδοσης παθογόνων, ενώ η ποιότητα περιλαμβάνει την βελτιστοποίηση των συνθηκών αποθήκευσης και την αποφυγή πρόσθετων βλαβών αποθήκευσης στα αιμοπετάλια. Στόχος μας ήτα να διερευνήσουμε τον αντίκτυπο της αδρανοποίησης στην μεταβολική και αιμοστατική αποτελεσματικότητα των αιμοπεταλίων αφαίρεσης σε PAS, αξιολογώντας το σύνολο του αιμοστατικού προφίλ τους. Δηλαδή, η in vitro σύγκριση στις λειτουργικές, αιμοστατικές και προπηκτικές ιδιότητες των αδρανοποιημένων αιμοπεταλίων σε σύγκριση με μη επεξεργασμένα PAS αιμοπετάλια, που θα περιλαμβάνουν το μεταβολικό προφίλ των αδρανοποιημένων αιμοπεταλίων με τις μετρήσεις γλυκόζης, γαλακτικού, διττανθρακικών, LDH και αερίων αίματος και της αννεξίνης-V. Επίσης αναλύθηκαν τα αποτελέσματα της θρομβοελαστομετρίας, της θρομβοελαστογραφίας και της συσσώρευσης αιμοπεταλίων σε βάθος χρόνου 7 ημερών. Όλες οι παραπάνω μετρήσεις πραγματοποιήθηκαν στα αδρανοποιημένα αιμοπετάλια, και διενεργήθηκαν ταυτόχρονα και στους ασκούς αιμοπεταλίων που δεν είχαν αδρανοποιηθεί προκειμένου να εκτιμηθεί το αιμοστατικό, μεταβολικό και προπηκτικό προφίλ τους και να συγκριθούν μεταξύ τους. Η συλλογή των ασκών αιμοπεταλίων πραγματοποιήθηκε στο τμήμα Αιμοδοσίας του ΠΓΝ «Αττικόν». Η αιμοπεταλιαφαίρεση διενεργήθηκε σε υγιείς αιμοπεταλιοδότες, οι οποίοι ενημερώθηκαν για τη μελέτη και έδωσαν τη συγκατάθεσή τους. Στο τμήμα Αιμοδοσίας έλαβε επίσης χώρα η διαδικασία της αδρανοποίησης των ασκών αιμοπεταλίων με τη συμβολή πλήρως καταρτισμένου προσωπικού. Η ανάλυση των δειγμάτων έγινε στο Αιματολογικό εργαστήριο του νοσοκομείου «Αττικόν» όπου μετρήθηκαν οι δείκτες του μεταβολικού προφίλ και έγιναν οι μετρήσεις θρομβοελαστομετρίας, θρομβοελαστογραφίας και της αγγρεγκομετρίας. Στο Βιοχημικό εργαστήριο του νοσοκομείου «Αττικόν» μετρήθηκε η LDH. Τέλος, στο τμήμα Βιοϊατρικών Επιστημών του Πανεπιστημίου Δυτικής Αττικής διενεργήθηκαν οι μετρήσεις της P-σελεκτίνης, αννεξίνης-V. Από την ολοκλήρωση των πειραματικών διαδικασιών και τη συγκέντρωση και αξιολόγηση των αποτελεσμάτων, προέκυψε μια σειρά συμπερασμάτων. Ο μεταβολισμός των αιμοπεταλίων που υποβάλλεται σε επεξεργασία με PRT επιταχύνεται και η ισχύς του θρόμβου επηρεάζεται δυσμενώς όσο παρατείνεται ο χρόνος αποθήκευσης. Επίσης, οι μη επεξεργασμένοι ασκοί αιμοπεταλίων με PAS φαίνεται να διατηρούν επαρκώς την αιμοστατική τους λειτουργία καθ' όλη την περίοδο αποθήκευσης. Τα ευρήματά μας, υποδεικνύουν ότι η επεξεργασία με Mirasol και η ακόλουθη αποθήκευση επηρεάζει την αιμοστατική ικανότητα των επεξεργασμένων αιμοπεταλίων in vitro με πολύπλευρο τρόπο, δημιουργώντας ερωτήματα σχετικά με την ορθή διαχείριση των αδρανοποιημένων αιμοπεταλίων. Είναι λοιπόν, αναγκαία περαιτέρω έρευνα σχετικά με την αδρανοποίηση, το μέσο συντήρησης των αιμοπεταλίων και την περίοδο αποθήκευσής τους. Επιπλέον, η in vivo αποτελεσματικότητα των αιμοπεταλίων που αδρανοποιήθηκαν με PRT και η ικανότητά τους να επιτύχουν τους στόχους της μετάγγισης, παραμένουν σε μεγάλο βαθμό άγνωστα και εξάγονται συμπεράσματα κυρίως μέσω έμμεσων στοιχείων. Οι πειραματικές μετρήσεις ολοκληρώθηκαν και τα αποτελέσματά τους επεξεργάστηκαν και αξιολογήθηκαν με τις κατάλληλες στατιστικές μεθόδους για τον εντοπισμό σημαντικών στατιστικών ευρημάτων και την εξαγωγή συμπερασμάτων. Τα αποτελέσματα αυτά δημοσιεύτηκαν στο ιατρικό περιοδικό Blood Transfusion με DOI: 10.2450/BloodTransfus.600 και DOI: 10.2450/BloodTransfus.800.