Προοπτική μελέτη των επιπέδων ορού της NGAL, MMP-9 και των αγγειογεννητικών μορίων PIGF και sFLT-1 σε εγκύους με υπερτασική νόσο

Abstract

Aim of the study: Preeclampsia is a systematic disease of pregnancy characterized by hypertension and proteinouria developing after the 20th week of pregnancy. Several new studies have shown that the blood serum levels of circulating NGAL are seriously altered in preeclamptic pregnancies and their measurement in maternal serum may be useful in screening and/or diagnosis of patients at high risk of developing preeclampsia. The purposes of our study were initially to explore the levels and the possible pathophysiological role of NGAL, MMP-9, their complex (MMP-9/NGAL), PLGF and sFLT-1 in normal and preeclamptic pregnancies and then to evaluate their significance as specific diagnostic markers in the prediction of the disease. Patients and Methods: In 95 pregnant women [69 normal, 12 pregnancies that developed preeclampsia and 14 with SGA (small for gestational age) fetuses] we determined the serum concentrations of NGAL, MMP-9, MMP-9/NGAL complex, PLGF and sFLT-1 in the first (11+1 to 13+6 weeks), second (20+1 to 24+0 weeks) and third (28+1 – 34+0 weeks) trimester of pregnancy. Serum concentrations of NGAL, MMP-9 and MMP-9/NGAL complex were determined with commercially available kits: Human Lipocalin-2/NGAL Quantikine ELISA Kit, Human Matrix Metalloproteinase-9/MMP-9 Quantikine ELISA Kit and Human MMP-9/NGAL Complex Quantikine ELISA Kit, R&D SYSTEMS. Results: Median serum concentrations (ng/ml) and interquartile range (IQR) of NGAL in normal pregnancies were: 12.8 (8 - 21.1); 25.9 (14.7 – 34.6) and 48 (22.7 – 78.6) ng/mL in the three trimesters of pregnancy respectively. NGAL serum concentrations(ng/ml) in pregnancies that developed preeclampsia were significantly different from normal in the 1st and 2nd trimester but not in the 3rd [30.9 (21 – 52.3)/p=0,006; 44.6 (35.7 – 71.8) p=0,015; 87.6 (43.5 – 115.6)/ p=0,174 in the three trimesters respectively]. On the contrary, MMP-9 and MMP-9/NGAL complex serum concentrations in pregnancies that developed preeclampsia didn’t differ significantly between normal and preeclamptic pregnancies in any trimester. Additionally, women with SGA fetuses had no significantly different NGAL, MMP-9 and MMP-9/NGAL complex serum concentrations in any trimester compared to normal or pre-eclamptic pregnancies. Finally, PLGF serum concentrations (pg/ml) were statistically different between normal and preeclamptic pregnancies in the 2nd and in the 3rd (p=0.019 and p<0.001 respectively) but not in the 1st trimester, while those of sFLT-1 (pg/ml) were different only in the 3rd trimester (p=0.011).Conclusion: According to our findings serum concentrations of NGAL, MMP-9, MMP-9/NGAL and PLGF in normal pregnancies were significantly different between the 1st and the 3rd, trimester increasing as the pregnancy develops. In pregnancies that developed preeclampsia, statistically significant difference in NGAL, MMP-9, MMP-9/NGAL complex, PLGF and sFLT-1 serum concentrations was found between 1st and 3rd trimesters. The most important finding of our study is the fact that NGAL levels in pregnancies with preeclampsia were significantly different than those in normal pregnancies in the 1st and 2nd but not in the 3rd trimester (p=0,006 for 1st trim; p=0,015 for 2nd trim; p=0,174 for 3rd trim). Finally NGAL, MMP-9, MMP-9/NGAL complex and PLGF serum concentrations in pregnancies that developed preeclampsia didn’t differ significantly from concentrations in normal or pregnancies with SGA fetuses in any trimester.

Σκοπός: Σκοπός της μελέτης μας ήταν ο προσδιορισμός των επιπέδων της NGAL, της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL, του PLGF και του sFLT-1 στις φυσιολογικές και στις κυήσεις με προεκλαμψία προοπτικά κατά τη διάρκεια της κύησης, καθώς και η διερεύνηση της αξίας τους ως νέους δείκτες στην έγκαιρη διάγνωση της νόσου. Υλικό και Μέθοδος: Συνολικά παρακολουθήθηκαν προοπτικά 541 κυήσεις από το 1ο τρίμηνο έως και τον τοκετό. Έγινε μία λήψη αίματος σε κάθε ένα από τα τρία τρίμηνα της κύησης (1ο τρίμηνο: 11η -13η Ε.Κ., 2ο τρίμηνο: 20η-24η Ε.Κ., 3ο τρίμηνο: 28η-34η Ε.Κ.). Τα δείγματα που μελετήθηκαν προήλθαν από 95 έγκυες και η μέτρηση της NGAL, της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL, του PLGF και του sFLT-1 έγινε στο Ορμονολογικό Εργαστήριο του Αρεταίειου Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου. Από τις 95 γυναίκες οι 12 εμφάνισαν προεκλαμψία κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης τους, οι 14 γέννησαν νεογνά, των οποίων το βάρος ήταν μικρό για την ηλικία κύησης (SGA), ενώ οι υπόλοιπες 69 είχαν μια απολύτως φυσιολογική εγκυμοσύνη. Η επιλογή των φυσιολογικών κυήσεων έγινε τυχαία από το σύνολο αυτών.Αποτελέσματα: Παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά της συγκέντρωσης της NGAL, της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL και του PLGF μεταξύ 1ου και 3ου τριμήνου στις φυσιολογικές κυήσεις, καθώς και στις κυήσεις που ανέπτυξαν προεκλαμψία. Στις προεκλαμπτικές κυήσεις επιπλέον υπήρξε στατιστικά σημαντική διαφορά μεταξύ 1ου και 3ου τριμήνου και στα επίπεδα του sFLT-1. Δεν υπάρχει στατιστικά σημαντική διαφορά των συγκεντρώσεων της MMP-9 και του συμπλέγματος MMP-9/NGAL μεταξύ των φυσιολογικών, προεκλαμπτικών και των SGA κυήσεων σε κάθε τρίμηνο ξεχωριστά. Αντιθέτως, τα επίπεδα της NGAL διαφέρουν στατιστικά σημαντικά μεταξύ φυσιολογικών και κυήσεων που ανέπτυξαν προεκλαμψία στο 1ο (p=0,006) και στο 2ο τρίμηνο (p=0,015) όχι όμως και στο 3ο (p=0,174). Τέλος, τα επίπεδα του PLGF και του λόγου sFLT-1/PLGF διαφέρουν στατιστικά σημαντικά μεταξύ φυσιολογικών και προεκλαμπτικών κυήσεων τόσο στο 2ο όσο και στο 3ο τρίμηνο, ενώ εκείνα του sFLT-1 μόνο στο 3ο τρίμηνο. Δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά των συγκεντρώσεων της NGAL, της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL και του PLGF μεταξύ φυσιολογικών και κυήσεων με SGA νεογνά. Συμπεράσματα: Οι συγκεντρώσεις της NGAL, της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL και του PLGF παρουσιάζουν στατιστικά σημαντική άνοδο από το 1ο στο 3ο τρίμηνο τόσο στις φυσιολογικές όσο και στις κυήσεις που ανέπτυξαν προεκλαμψία. Επιπλέον, στις προεκλαμπτικές κυήσεις τα επίπεδα του sFLt-1 παρουσιάζουν στατιστικά σημαντική άνοδο από το 1ο στο 3ο τρίμηνο. Πολύ σημαντικό εύρημα της μελέτης μας αποτελεί η ανίχνευση στατιστικά σημαντικής διαφοράς ανάμεσα στις φυσιολογικές και στις κυήσεις που ανέπτυξαν προεκλαμψία στο 1ο και στο 2ο τρίμηνο ως προς τις συγκεντρώσεις της NGAL, γεγονός το οποίο μας επιτρέπει να θεωρήσουμε την NGAL ως πιθανό νέο δείκτη ένδειξης ή/και πρόληψης του συνδρόμου. Αντιθέτως, δεν φαίνεται να υπάρχει στατιστικά σημαντική διαφορά των συγκεντρώσεων της MMP-9, του συμπλέγματος MMP-9/NGAL, του PLGF, του sFLT-1 και του λόγου sFLT-1/PLGF μεταξύ των φυσιολογικών και των προεκλαμπτικών κυήσεων στο 1ο τρίμηνο.