ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΗΣ PNEUMOCYSTIS CARINII ΜΕ DNA ΥΒΡΙΔΙΣΜΟ. ΣΥΓΚΡΙΣΗ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΜΕ ΣΥΜΒΑΤΙΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΥΣ

Abstract

WE TRIED TO DEVELOP A METHOD OF DETECTING AND QUANTIFYING P. CARINII RESPECTIVEINFECTIONS. THIS METHOD UTILIZES A SYNTHETIC 5' 32P-LABELLED-26-OLIGODEOXYNUCLEOTIDE PROBE FOR DNA-RRNA HYBRIDIZATION. WE DEVELOPED A MEANS OF ESTIMATING THE TOTAL BIOMASS OF P. CARINII USING A LABELLED DNA PROBE WHICH BINDS SPECIFICALLY TO P. CARINII RRNA. THERE WAS NO CROSS REACTION WITH THE RNA OF THE UNINFECTED LUNG, OR RNA OF OTHER ORGANISMS CAUSING INVASIVE LUNG INFECTIONS NAMELY: ASPERGILLUS NIGER, CANDIDA ALBICANS, HISTOPLASMA CAPSULATUM, M. TUBERCULOSIS, M. AVIUM, CRYPTOCOCCUS, STREP. PNEUMONIAE. THE CYTOLOGICAL DATA CORRELATED WELL WITH THIS METHOD'S DATA. THE LINEARITY AND REPRODUCIBILITY OF THE PROBE METHOD WAS DEMONSTRATED.

ΠΡΟΤΥΠΩΣΗ ΜΕΘΟΔΟΥ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΗΣ ΣΥΝΟΛΙΚΗΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΗΣ ΜΑΖΑΣ ΤΗΣ P. CARINII (ΚΥΣΤΕΩΝ ΚΑΙ ΤΡΟΦΟΖΩΙΤΩΝ) ΜΕ ΤΗ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΗ ΕΝΟΣ ΡΑΔΙΟΣΗΜΑΣΜΕΝΟΥ DNA ΑΝΙΧΝΕΥΤΗ, Ο ΟΠΟΙΟΣ ΣΥΝΔΕΕΤΑΙ ΜΕ ΤΟ ΡΙΒΟΣΩΜΑΤΙΚΟ RNA ΤΗΣ P. CARINII. ΜΕ ΤΗ ΜΕΘΟΔΟ ΑΥΤΗ ΕΠΙΤΥΓΧΑΝΕΤΑΙ ΤΟΣΟ Η ΠΟΙΟΤΙΚΗ, ΟΣΟ ΚΑΙ Η ΠΟΣΟΤΙΚΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΤΗΣ P. CARINII. ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ Η ΕΠΑΝΑΛΗΨΗΜΟΤΗΤΑ ΚΑΙ Η ΓΡΑΜΜΙΚΟΤΗΤΑ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ, ΔΕΝ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΔΙΑΣΤΑΥΡΟΥΜΕΝΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΕΞΕΤΑΣΗ ΠΝΕΥΜΟΝΩΝ ΑΡΟΥΡΑΙΩΝ ΜΗ ΜΟΛΥΣΜΕΝΩΝ ΜΕ P. CARINII ΚΑΙ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΕΞΕΤΑΣΗ ΕΚΧΥΛΙΣΜΑΤΩΝ RNA ΑΠΟ ASPERGILLUS NIGER, CANDIDA ALBICANS, HISTOPLASMA CAPSULATUM, M. TUBERCULOSIS, M. AVIUM, CRYPTOCOCCUS, STREP. PNEUMONIAE. ΑΚΟΜΗ ΒΡΕΘΗΚΕ ΜΙΑ ΠΟΛΥ ΚΑΛΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΣΥΣΧΕΤΙΣΗ ΑΝΑΜΕΣΑ ΣΤΗ ΜΕΘΟΔΟ ΑΝΑΦΟΡΑΣ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗΣ ΤΗΣ P. CARINII (ΧΡΩΣΗ GIEMSA) ΚΑΙ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ DNA-RRNA ΥΒΡΙΔΙΣΜΟΥ.