Συγκριτική μελέτη της έκφρασης της κερατίνης 8 και της γλυκοζυλιωμένης ομάδας της Η στο μυομήτριο και στα λειομυώματα του

Abstract

In this study, fifty cases of uterine leiomyomas with their adjacent myometrium and five cases of uterine leiomyosarcomas with their adjacent myometrium were investigated immunohistochemically in order to detect the distribution of the keratin 8 and its glycosylated group H, which represents the epitope H which includes the sugar O -linked N - acetyl glycosamine residue in a specific conformation and/or environment. The study of this material gave the following results: The keratin 8 was not detected in any case of leiomyomas, leiomyosarcomas and myometrial tissues.The epitope H showed high expression in 46% and moderate expression in 54% of the cases of leiomyomas. The epitope H showed high expression in 40% and moderate expression in 60% of the cases of leiomyosarcomas. The epitope H did not show any difference in its expression among leiomyomas and their adjacent myometrium and among leiomyosarcomas and their adjacent myometrium. The epitope H in the normal smooth muscle cells of the myometrium and in the smooth muscle cells of the leiomyomas is located in four polypeptide chains with molecular weights 100.000, 61.000, 59.000 and 54.000 which all are produced by both the normal and benign neoplastic smooth muscle cells as it was revealed by western blotting and immunoblotting studies. The cytokeratin 8 was not detected in the normal and benign neoplastic smooth muscle cells as it was revealed by western blotting and immunoblotting studies. Finally, it is concluded that, although keratin 8 is not present in the smooth muscle cells of the myometrium, leiomyomas and leiomyosarcomas, it shares its epitope H which contains the sugar O-linked N- Acetylglucosamine residue in a specific conformation and/or environment with other four unrelated polypeptides which all are produced by the normal myometrial and the benign neoplastic uterine smooth muscle cells. This finding from one point of view has to be taken into consideration when anti-keratin 8 antibodies are used for immunohistochemistry due to the risk of cross- reactivity resulting in false positive findings and from the other point of view it contributes more knowledge into the biology of the myometrium and its neoplasms. Future further identification and characterization of the four polypeptides, which bear the epitope H, might shed more light in the pathways of the glycosylation with O-linked N-Acetylglucosamine, which are involved in the biology of the myometrium and in the pathology of the uterine leiomyomas and leiomyosarcomas.

Στην εργασία αυτή μελετήθηκαν ανοσοϊστοχημικώς 50 περιπτώσεις λειομυωμάτων με το παρακείμενο μυομήτριό τους και 5 περιπτώσεις λειομυοσαρκωμάτων με το παρακείμενο μυομήτριό τους για να ανιχνευθεί σ΄αυτά η κατανομή της κερατίνης 8 και του επιτοπίου Η που περιέχεται στο μόριο της κερατίνης 8 και περιλαμβάνει και το μοναδικό σάκχαρο της κερατίνης 8 που είναι η Ο-Ν ακετυλογλυκoζαμίνη. Η μελέτη του υλικού έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: Η κερατίνη 8 δεν εντοπίστηκε σε καμία περίπτωση λειομυώματος, λειομυοσαρκώματος ή μυομητρίου. Το επιτόπιο Η παρουσίασε έντονη έκφραση στο 46% και μέτρια έκφραση στο 54% των περιπτώσεων των λειομυωμάτων. Το επιτόπιο Η παρουσίασε έντονη έκφραση στο 40% και μέτρια έκφραση στο 60% των περιπτώσεων των λειομυοσαρκωμάτων. Το επιτόπιο Η δεν παρουσίασε διαφορά στην έκφρασή του ανάμεσα στα λειομυώματα και στο παρακείμενο μυομήτριό τους και στα λειομυοσαρκώματα και στο παρακείμενο μυομήτριό τους. Το επιτόπιο Η στις λείες μυϊκές ίνες του φυσιολογικού μυομητρίου και στις λείες μυϊκές ίνες των λειομυωμάτων βρίσκεται σε τέσσερα πολυπεπτίδια με μοριακά βάρη 100.000, 61.000, 59.000 και 54.000 που παράγονται όλα και από τα φυσιολογικά και από τα καλοήθη νεοπλασματικά λεία μυϊκά κύτταρα, όπως αποδείχθηκε με τη μέθοδο των ανοσοαποτυπωμάτων (immunoblotting).Η κερατίνη 8 δεν βρέθηκε στις λείες μυϊκές ίνες είτε του μυομητρίου ή των λειομυωμάτων όπως αποδείχθηκε με τη μέθοδο των ανοσοαποτυπωμάτων (immunoblotting). Τελικά συμπεραίνεται, ότι η κερατίνη 8 χωρίς να βρίσκεται στα λεία μυϊκά κύτταρα του μυομητρίου, των λειομυωμάτων και των λειομυοσαρκωμάτων μοιράζεται το επιτόπιό της Η που περιέχει και το μοναδικό σάκχαρό της, που είναι η Ο-Ν ακετυλογλυκοζαμίνη με τέσσερα άλλα άσχετα πολυπεπτίδια που παράγονται από τα φυσιολογικά και τα νεοπλασματικά λεία μυϊκά κύτταρα. Αυτό αφ΄ ενός πρέπει να λαμβάνεται υπ΄ όψη στις ανοσοϊστοχημικές μεθόδους, όταν χρησιμοποιούνται αντισώματα εναντίον της κερατίνης 8 γιατί μπορεί να υπάρξει διασταυρούμενη αντίδραση και να παρατηρηθούν ψευδώς θετικά αποτελέσματα με κίνδυνο ένα άτυπο λειομύωμα, ένα αδιαφοροποίητο λειομυοσάρκωμα και ένα αδιαφοροποίητο μεταστατικό λειομυοσάρκωμα να εκληφθούν σαν καρκινώματα. Αφετέρου συμβάλλει περισσότερο στην κατανόηση της γλυκοζυλίωσης με Ο-Ν-Ακετυλογλυκοζαμίνη στην βιολογία του μυομητρίου και των νεοπλασμάτων του. Μελλοντική περαιτέρω ταυτοποίηση των πεπτιδίων που φέρουν το επιτόπιο Η θα συμβάλλει στην ανίχνευση των οδών που εμπλέκονται τα τέσσερα αυτά πολυπεπτίδια ρίχνοντας περισσότερο φως στις οδούς της γλυκοζυλίωσης με Ο-Ν-Ακετυλογλυκοζαμίνη αναφορικά με την βιολογία του μυομητρίου και των λειομυωμάτων και λειομυοσαρκωμάτων του.