Διερεύνηση των αντινεοπλασματικών ιδιοτήτων τετραθειούχου άλατος μολυβδαινικού οξέος στο ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα του στόματος

Abstract

Tetrathiomolybdate (TM) forms a ternary complex with copper and albumin and contributes to the reduction of copper levels in the organism and, has strong antitumor activity reducing the angiogenic potential of the tumor with minimal toxic effects. The purpose of this study is to examine the antitumor-antiangiogenic properties of TM in squamous cell carcinoma of the oral mucosa in a chemical carcinogenesis model using 4-NQO, by investigating the expression levels of VEGF, NO (NOS), microvascular density (MVD), and the inflammatory response (CD 68) in the tumor environment, and comparing it to the gradual reduction of Cu level in both precancerous and cancerous stages levels for preventative purposes. Materials and Methods. 70 Wistar male rats were used 4 months old weighing 200gr separated into 4 groups with different administration periods for TM. The control group A was divided into two subgroups. In subgroup A₁ only 4-NQO was administered for a total period of 30 weeks. In the subgroup A₂, 4-NQO was administered for a total period of 30 weeks, after the appearance of malignancy, TM was time for 17 weeks. In group B 4-NQO and TM were simultaneously administered for a total period of 40 weeks. Group C, was divided into 2 subgroups, the subgroup C₁ taking 4-NQO for 2 weeks and then TM. In the subgroup C₂ 4-NQO was first administered for 4 weeks and then TM. Group D also was divided into two subgroups, D₁ where TM was initially administered for 4 weeks, while the Cu plasma levels dropped to 20% of the total mean level, 4-NQO was administered. The simultaneous administration of both substances lasted 45 weeks. In the subgroup D₂ TM was initially administered for 2 weeks, while the Cu plasma levels dropped to 20% of the total mean level, then 4-NQO was administered. The simultaneous administration of both substances lasted 45 weeks. Results. The administration TM, at therapeutic level, seems to normalize tumor vasculature and fully reverses the angiogenic phenotype in squamous cell carcinoma of the oral cavity in the groups D₁ and D₂ that had prophylactic administration of TM. Conclusions. The administration of TM, proactively, appears to delay the onset of development of malignancy (45th week against the 23th week), and could be administered as chemoprophylaxis for developing second primary tumor in patients with squamous cell carcinoma of the oral cavity, as in healthy subjects risk.

Το τετραθειούχο άλας του μολυβδαινικού οξέος καθώς σχηματίζει τριμερές σύμπλεγμα με τον χαλκό και την λευκωματίνη συμβάλει στην μείωση των επιπέδων χαλκού, παρουσιάζει έντονη αντινεοπλασματική δράση μειώνοντας το αγγειογενετικό δυναμικό του όγκου με ελάχιστα τοξικά φαινόμενα. Σκοπός της παρούσας μελέτης είναι να εξετάσει τις αντινεοπλασματικές-αντιαγγειογενετικές ιδιότητες του ΤΜ στο ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα του στοματικού βλεννογόνου, σε ένα μοντέλο χημικής καρκινογένεσης με χρήση της 4-NQΟ, ερευνώντας τα επίπεδα έκφρασης της VEGF, του NO (NOS), την μικροαγγειακή πυκνότητα (MVD), αλλά και την φλεγμονώδη αντίδραση (CD 68) στο περιβάλλον του όγκου, και σε σύγκριση με την βαθμιαία μείωση των επιπέδων του Cu, τόσο σε προκαρκινικό όσο και καρκινικό επίπεδο, αλλά και κυρίως σε προληπτικό επίπεδο. Υλικά και μέθοδοι. Χρησιμοποιήθηκαν 70 Wistar αρσενικοί επίμυες ηλικίας 4 μηνών με βάρος 200gr χωρισμένοι σε 4 ομάδες με διαφορετική περίοδο χορήγησης ΤΜ. Η ομάδα ελέγχου Α, χωρίσθηκε σε δύο υποομάδες. Στην υποομάδα Α₁ χορηγήθηκε αποκλειστικά μόνο 4-NQO για συνολικό διάστημα 30 εβδομάδων. Στην υποομάδα Α₂ χορηγήθηκε 4-NQO για συνολικό διάστημα 30 εβδομάδων, μετά την εμφάνιση κακοήθειας, χορηγήθηκε Τ.Μ για διάστημα 17 εβδομάδων. Στην ομάδα Β χορηγήθηκαν ταυτόχρονα, 4-NQO και ΤΜ για συνολικό διάστημα 40 εβδομάδων έως και την θυσία των πειραματόζωων. Η ομάδα Γ, χωρίστηκε σε 2 υποομάδες, στην υποομάδα Γ₁ 4-NQO για διάστημα 2 εβδομάδων και στην συνέχεια ΤΜ. Στην υποομάδα Γ₂ χορηγήθηκε πρώτα 4-NQO για διάστημα 4 εβδομάδων και στην συνέχεια ΤΜ. Η ομάδα Δ χωρίστηκε επίσης σε δυο υποομάδες. Στην υποομάδα Δ₁ όπου χορηγήθηκε πρώτα ΤΜ για διάστημα 4 εβδομάδων και αφού τα επίπεδα του χαλκού βρέθηκαν στο 20% της μέσης τιμής χορηγήθηκε 4-NQO. Η ταυτόχρονη χορήγηση και των δυο ουσιών διήρκεσε 45 εβδομάδες. Στην υποομάδα Δ₂ χορηγήθηκε πρώτα ενδοπεριτοναϊκά Τ.Μ για διάστημα 2 εβδομάδων, και αφού τα επίπεδα του χαλκού βρέθηκαν στο 20% της μέσης τιμής, χορηγήθηκε 4-NQO δια επαλείψεως στην ραχιαία επιφάνεια της γλώσσας. Η ταυτόχρονη χορήγηση και των δύο ουσιών διήρκεσε 45 εβδομάδες. Αποτελέσματα. Η ομάδα Α παρουσίασε ανάπτυξη προκαρκινικών αλλοιώσεων κατά την 19η εβδομάδα και ακανθοκυτταρικό Ca κατά την 23η εβδομάδα με υψηλό αγγειογενετικό φαινότυπο [VEGF (mean 3,320 ± sd 0.6106), CD68 (mean 2,360 ± sd 0.2011), NOS (mean 2,950 ± sd 0.430), και CD34 (mean 2,960 ± sd 0,688)]. Η υποομάδα Α₂ στο τέλος της πειραματικής διαδικασίας παρουσίασε πλήρη αντιστροφή του αγγειογενετικού φαινότυπου [VEGF (mean 1,820 ± sd 0.2486), CD68 (mean 1,660 ± sd 0.1430), NOS (mean 1,760 ± sd 0.2716), και CD34 (mean 1,680 ± sd 0,2486)]. Η αμάδα Β παρουσίασε ανάπτυξη προκαρκινικών αλλοιώσεων κατά την 23η εβδομάδα και ακανθοκυτταρικό Ca κατά την 30η εβδομάδα. Η ομάδα Γ παρουσίασε ανάπτυξη προκαρκινικών αλλοιώσεων κατά την 26η εβδομάδα και ακανθοκυτταρικό Ca κατά την 32η εβδομάδα. Ο αγγειογενετικός φαινότυπος των Α₂, Β, Γ ομάδων ήταν παρόμοιος. Η ομάδα Δ (Δ₁, Δ₂) παρουσίασε ανάπτυξη προκαρκινικών αλλοιώσεων κατά την 41η εβδομάδα και ακανθοκυτταρικό Ca κατά την 45η εβδομάδα με χαρακτηριστικά ήπιο αγγειογενετικό φαινότυπο [VEGF (mean 0,170 ± sd 0.1494), CD68 ( mean 0,190 ± sd 0.1149), NOS (mean 0,350 ± sd 0.1354) CD34 (mean 0,190 ± sd 0,1197]. Συμπεράσματα. Η χορήγηση του ΤΜ, σε προληπτικό επίπεδο, δείχνει να καθυστερεί την εμφάνιση ανάπτυξης κακοήθειας (45η εβδομάδα έναντι 23ης εβδομάδας), και θα μπορούσε να χορηγηθεί ως χημειοπροφύλαξη για την ανάπτυξη δεύτερου πρωτοπαθούς όγκου σε ασθενείς με ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα στοματικής κοιλότητας, όπως και σε υγιή άτομα υψηλού κινδύνου.